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文档简介
医用化学旋光度的测定能力目标知识目标素质目标掌握旋光仪的使用方法熟悉比旋光度的计算方法。了解旋光仪的构造。2一、实验原理物质可按是否具有光学活性分为两大类,一类具有使偏振光的振动平面旋转的性质,如乳酸、葡萄糖等,称为旋光性物质或光学活性物质;另一类对偏振光不产生影响,没有旋光性。旋光度是指光学活性物质使偏振光的振动平面旋转地角度。物质的旋光度与溶液的浓度、溶剂、温度、旋光测定管长度和所用光源的波长等都有关系,所以常用比旋光度[α]tλ来表示各物质的旋光性。4物质能使偏振光的振动平面发生旋转的性质称为旋光性,该物质被称为旋光性物质。旋光性能使偏振光振动平面沿顺时针方向旋转的物质称为右旋体,用“d”或“+”表示;能使偏振光振动平面沿逆时针方向旋转的物质称为左旋体,用“l”或“—”表示。5旋光度α旋光度α可用旋光仪进行测定[α]λt=αC×l比旋光度测定温度光源波长旋光度浓度(g/ml)测定管长度(dm)在一定条件下,比旋光度是旋光性物质的一个重要物理常数,通过对旋光度的测定可以确定光学活性物质的含量和纯度。二、实验仪器和试剂仪器:目测旋光仪、分析天平、100ml烧杯、100℃温度计、100ml容量瓶试剂:葡萄糖晶体、葡萄糖溶液三、实验步骤
1.旋光仪零点的校正。在测定样品前,必须先校正旋光仪的零点。将旋光仪的旋光管清洗干净,装上蒸馏水,使液面凸出管口,将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好,不能带入气泡,管内不能有空隙,否则将影响测定结果。然后拧上螺丝帽盖,使之不漏水,但不要拧得过紧。将旋光管外壁擦干,放入旋光仪内,罩上盖子,开启钠光灯约5分钟,待发光正常后,将标尺盘调到零点左右,旋动旋钮,使视场内I和II部分的明暗一致(实验图16-4)。记录读数。重复操作至少5次,取平均值。若零点相差太大时,应对仪器进行重新校正。2.测定已知准确浓度的葡萄糖溶液的旋光度。用分析天平准确称量10.000g(±0.003g)葡萄糖晶体于小烧杯中,加入适量蒸馏水,搅拌使之溶解,定量转移到100ml容量瓶中,稀释至标线,摇匀备用。用上述溶液少量润洗旋光管2次,以避免葡萄糖溶液被蒸馏水稀释而改变浓度。然后将溶液装入旋光管中,每隔2分钟测定1次旋光度,观察葡萄糖溶液的变旋现象,读取其稳定的读数。重复操作5次取5次稳定读数的平均值,此时所得的读数与零点之间的差值即为葡萄糖的旋光度。记录旋光度的长度和溶液的温度,根据公式计算葡萄糖的比旋光度。
明暗界限清晰明暗一致
旋光仪目镜视场图3.测定未知浓度的葡萄糖溶液的旋光度。将旋光管用蒸馏水洗净后,再用少量待测溶液润洗2次,按上述方法测定该溶液的旋光度。将所测旋光度的读数和上述实验(步骤2)所计算出的比旋光度代人公式,即可确定该溶液的浓度。四、注意事项及说明
1.在测定样品前,必须先校正旋光仪的零点。
2.旋光管装液时:使液面凸出管口,将玻璃盖沿管口边缘轻轻平推盖好,不能带入气泡,管内不能有空隙
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