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吸附薄层色谱分离原理宜春职业技术学院王宜萍
01薄层色谱法概述02分离原理03固定相和流动相的选择01章节PART薄层色谱法概述吸附薄层色谱分离原理固定相涂铺或结合在平面载体上,组分的分离在平面上进行,这样的液相色谱法被称为平面色谱法。那么薄层色谱法是一种怎样的分离方法呢?和纸色谱法(PC)薄层色谱法(TLC)吸附薄层色谱分离原理快速展开一次只需几分钟到十几分钟。灵敏只需几微克至几十微克的物质就能检出。高选择性能分离结构相似的同系物、异构体。操作简便所用仪器简单,一般实验室均能开展工作。显色简便展开后可选用不同的显色剂喷雾显色,有助于定性鉴别。02章节PART分离原理吸附薄层色谱分离原理分离过程:制板→点样→展开→显色→定性定量分析固定相--吸附剂薄层色谱的固定相所用的吸附剂流动相---展开剂薄板的底端浸入到适当的流动相溶剂展开(分离)点样展开剂薄层色谱吸附薄层色谱分离原理吸附薄层色谱分离原理分离原理:展开剂在毛细管的浸润作用下,带着各组分沿着薄板向前移动。当各组分通过吸附剂时,被测组分在吸附剂和展开剂之间不断发生吸附——解吸附,不同组分的吸附能力和解吸附能力不同,因此产生差速迁移。吸附系数大的移动慢,吸附系数小的移动快,从而达到分离的目的。吸附薄层色谱分离原理比移值(Rf)原点到斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离Rfl0l1Rfl0l20≤Rf
≤1Rf
可用范围:0.2-0.8Rf
最佳范围:0.3-0.5在色谱条件确定的情况下,K大Rf小,K小Rf大吸附薄层色谱分离原理0102030405分离物质性质Rf
影响因素薄层板性质展开剂极性温度展开剂蒸气饱和程度吸附薄层色谱分离原理相对比移值Rr
参考物与被测组分在完全相同条件下展开,可以消除系统误差,大大提高重现性和可靠性;原点到斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离RrRf(参)Rf(组)参考物可以是后加入纯物质,也可是样品中已知组分;相对比移值Rr可以大于或小于1;Rr的重现性和可比性比Rf好。03章节PART固定相和流动相的选择吸附薄层色谱分离原理但薄层色谱所用的固定相颗粒更细,粒度更均匀,所以分离效能更高。吸附薄层色谱法的固定相又称为吸附剂,薄层色谱的固定相与吸附柱色谱的固定相类似分离极性较强的化合物时,选用活性较小的吸附剂。分离弱极性化合物,选择吸附活性较大的吸附剂;吸附薄层色谱分离原理硅胶G硅胶
+
煅石膏硅胶H硅胶(不含黏合剂)硅胶HF254硅胶H+
荧光物质硅胶GF254硅胶G+
荧光物质薄层色谱法常用的吸附剂有:硅胶、氧化铝、聚酰胺等硅胶:40μm,200目左右吸附薄层色谱分离原理组分极性吸附剂活度流动相极性大小大小大小吸附薄层色谱分离原理分离混合样品时,先用单一中等极性展开剂尝试,再摸索二元展开剂。问:A、B哪个组分的极性大?B的极性大。展开剂极性增大,极性大的Rf值增大。例:A,B
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