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文档简介
项目六氨基酸的分析与检验任务二谷氨酸的测定
■谷氨酸是一种酸性氨基酸。分子内含两个羧基,化学名称为α-氨基戊二酸,俗名又叫麸酸。■有鲜味,微溶于水,而溶于盐酸溶液,等电点为3.22。■L-谷氨酸的用途广泛,它本身作为药品,能治疗肝昏迷症,也可用来生产味精、食品添加剂、香料和用于生物化学的研究。
■检测方法主要有旋光法、滴定法、比色法和色谱法等任务二谷氨酸的测定一、旋光法测定谷氨酸含量
1.原理
谷氨酸是一种酸性氨基酸,由于其分子结构中含有一个不对称碳原子,具有光学活性(即旋光性),能使偏振光面旋转一定角度,故可以采用旋光仪测定其旋光度,然后根据旋光度换算成谷氨酸的含量。
2.试剂与仪器1.试剂
■
盐酸谷氨酸样品蒸馏水等2.仪器■
旋光仪(精度±0.10),备有钠光灯(钠光谱D线589.3nm)、天平容量瓶烧杯玻璃棒等
一、旋光法测定谷氨酸含量3.操作步骤1.试液的制备
称取样品10g,精确至0.0001g,置50mL烧杯中,加水20mL,在搅拌下加入盐酸16.5mL,待谷氨酸全部溶解后移人100mL容量瓶中,冲洗烧杯的洗液并入容量瓶中。待溶液冷却至20℃时,定容至100mL,混匀。用滤纸过滤,收集滤液。若试液颜色较深,可加入活性炭0.1g(以糖蜜为原料颜色很深时,最多可加入活性炭0.3g),搅拌脱色。用滤纸过滤,弃去前5mL滤液,收集其余滤液作为试液。2.测定
在恒温室(20℃)里,先用标准旋光角校正仪器,然后将上述试液置于旋光管中(不得有气泡),观测其旋光度,同时记录旋光管中试液的温度。一、旋光法测定谷氨酸含量4.结果计算X——样品中谷氨酸含量(%)α——实测试液的旋光度(0)L——旋光管长度(即液层厚度)(dm)c——1mL试液中含谷氨酸的质量(g/mL)32.00——谷氨酸的比旋光度[α]20D(O)t——测定时试液的温度(℃)0.06——温度校正系数20——标准温度(℃)计算结果精确至1位小数一、旋光法测定谷氨酸含量5.结果记录测定次数测定内容123实测试样液的旋光度(0)旋光管长度(即液层厚度)(dm)1mL试液中含谷氨酸的质量(g/mL)测定时试液的温度(℃)样品中谷氨酸含量(%)样品中谷氨酸含量平均值(g/100mL)相对平均偏差(%)一、旋光法测定谷氨酸含量6.注意事项
◆同一样品测定结果,相对平均偏差不得超过0.3%
◆由于样品准备时使用滤纸过滤或加活性炭脱色后过滤,会造成c偏大,影响α的值,
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