HE制片质量控制改

病理检验技术HE制片的质量控制04HE制片质量控制要求影响HE切片质量的主要因素常见HE切片染色缺陷HE切片的质控评价指标HE制片的质量控制010203HE制片的质量控制病理制片技术可以说是医学科学技术中的一门工艺。病理技术工作者把来自临床患者、尸体解剖或动物实验的组织标本通过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、摊片、贴片、烤片、染色和封片等一系列操作过程，制成一张玻片标本。在显微镜下观察时，达到核质清楚、红蓝分明、对比恰当、清晰如画，才算是优质的HE玻片标本。一、HE制片的质量控制要求010502切片完整、薄切和厚薄均匀、无刀痕贴片位置恰当、无皱褶，贴片时要“定点”和“定向”染色鲜艳、对比清晰无污染、无“龟裂”、无“炭化”胞核封片无气泡、封胶不外溢HE制片的质量控制具体要求包括以下六方面：06封片无气泡、封胶不外溢0304HE制片的质量控制二、影响HE切片质量的主要因素：01组织处理和包埋切片染色0203组织固定是制片的关键，固定的好坏，决定以后制片的各个环节。一般采用10%的甲醛液固定。固定要及时组织处理和包埋:脱水要彻底常用乙醇脱水，由低浓度至高浓度逐步置换组织内的水分。透明剂多采用二甲苯，透明时间依据组织大小和厚薄，一般组织约需60～90分钟，穿刺小组织15～25分钟，并采用Ⅱ级或Ⅲ级二甲苯。透明宜充分HE制片的质量控制浸蜡需足够包埋应恰当

浸蜡常用纯净熔点稍低的石蜡，可采用Ⅱ级或Ⅲ级，以尽量清除二甲苯。开始一级用熔点较低石蜡，最后一级用熔点较高石蜡或包埋石蜡。浸蜡时间依据组织大小和厚薄而定，一般为2～3小时。包埋时，包埋石蜡的温度要比组织浸蜡高4～6℃，否则包埋冷凝后组织与石蜡易分离。包埋时把组织最大最平切面或所需的病灶切面向下置入包埋模具。

HE制片的质量控制切片要切出薄而平整的蜡带,关键在切片刀。一次性刀片要锋利度，否则应适时更换新刀片。摊片要平整无皱折

摊片时水盆一定要清洁，避免造成组织污染。贴片时要注意“定点”和“定向”

要把组织蜡片捞至载玻片的适宜位置，即注意“定点”和“定向”。把握烤片温度和时间

贴片后立即置入电热烤片箱内烤片，温度约60～65℃，时间约30～60分钟。HE制片的质量控制染片:HE制片的质量控制染色:1.切片脱蜡要于净脱蜡不全染色后模糊不清，如雾中观花。2.苏木精染液要配好苏木精染液配制关键在氧化。每次染色前必须过滤或用纸把液面的氧化膜拖走，以免污染切片。3.盐酸乙醇分化要适度分化是一个重要环节，分化时间一般为2～3秒，若不分化或分化不足，胞核深染且境界不清晰；若分化过度，胞核过淡不清楚。4.分化后要充分水洗

流水冲洗一般要15～30分钟。目的是一方面返蓝，另一方面冲走多余的酸液。5.伊红染色要适宜

伊红水溶液染色时间约2～5分钟。

HE制片的质量控制染色:6.切片脱水、透明要彻底

HE染色后，还要经无水乙醇和二甲苯彻底脱水透明。

7.封胶要中性,浓度要适中树胶受热或放置时间过长，因氧化而变酸，用酸性的树胶封片可使染片褪色。树胶过浓，封片时易导致气泡，树胶过稀，封片时树胶外溢，影响玻片美观。8.染片过程忌切片干涸切片干涸，组织收缩，割裂形成“龟裂”现象。封片前过度干燥，部分胞核透明不良，胞核透光不良，使核“炭化”。

HE制片的质量控制三、常见HE切片染色缺陷1.切片污染包括染液污染和组织污染2.染色不均匀3.切片呈云雾状4.组织“发白”，镜下细胞模糊不清，核不着染，呈灰白色。5.组织和细胞过度固缩6.组织“龟裂”7.胞核“炭化”HE制片的质量控制三、常见HE切片染色缺陷8.切片内有大小不一的气泡9.切片不完整10.切片时不成片，整片易破碎11.切片时裂开不成片12.刀痕13.筛状小空洞14.切片一截厚一截薄,呈阶梯状,染色后深浅不一

HE制片的质量控制三、常见HE切片染色缺陷15.切片太厚或厚薄不均16.切片有皱褶17.切片组织自溶18.人为挤压组织变形19.组织表层固缩成壳20.甲醛色素沉积21.组织高温烧灼变形22.冷冻切片出现冰结晶

HE制片的质量控制上述所列的22种常见切片缺陷，有些是制片过程中造成的，只要严格执行制片质控标准，熟练技术操作，改善仪器设备和工作环境是可以避免的。但组织自溶、组织人为挤压变形、组织表层固缩壳状改变、甲醛色素沉积和因高温电灼使组织变形等则是由于送检标本处理不当造成的，应与送检医师沟通，尽量避免。HE制片的质量控制HE制片的质量，可从以下8个方面，以不同权重给予评价:1.切片完整、贴片恰当10分2.切片较薄和均匀,无污染20分3.无皱褶10分4.无刀痕10分5.染色清晰、核质分明、透明度好30分6.无固缩、“龟裂”、“炭化”胞核10分7.封胶适当、玻片整洁5分8.字体端正、号码清楚5分HE制片的质量控制根据上述8个方面的质量严格给分，优质的HE切片每项分数要求达到90%以上。一张优质玻片标本，就是一个精美的工艺品。既给人一种美的感觉和享