药物的含量测定方法与验证

药物的含量测定方法与验证

2021/10/101药物的含量测定方法与验证药物的含量含量测定效价测定药物含量测定方法容量分析法光谱分析法色谱分析法2021/10/102药物的含量测定方法与验证方法选择中的供试品因素化学原料药的含量测定首选容量分析法药物制剂的含量测定首选色谱分析法药物制剂的定量检查首选光谱分析法含量测定方法须准确、稳定、耐用2021/10/103第一节定量分析方法的分类与特点2021/10/104一、容量分析法（滴定法）基本术语滴定：将滴定剂通过滴管滴入待测溶液中的过程滴定剂：浓度准确已知的试样溶液指示剂：滴定分析中能发生颜色改变而指示终点的试剂滴定终点：滴定分析中指示剂发生颜色改变的那一点（实际）化学计量点：滴定剂与待测溶液按化学计量关系反应完全的那一点（理论）滴定误差：滴定终点与化学计量点不一致产生的误差2021/10/105一、容量分析法（滴定法）特点方法简便易行方法耐用性高测定结果准确方法专属性差适用范围：较多用于化学原料药物的含量测定2021/10/106一、容量分析法（滴定法）有关计算滴定度：每1ml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。中国药典用mg表示。滴定度的计算2021/10/107一、容量分析法（滴定法）有关计算含量的计算直接滴定法所配制滴定液浓度与规定浓度不一致时：2021/10/108一、容量分析法（滴定法）有关计算含量的计算间接滴定法：生成物滴定法简接滴定法：剩余量滴定法2021/10/109二、光谱分析法紫外-可见分光光度法（200～400～760nm）朗伯-比耳定律

A为吸收度，l为液层厚度，c为溶液浓度，E为吸收系数。E：单位液层厚度时的吸收度。有两种表示法摩尔吸收系数：在一定波长下，溶液浓度为1mol/L，厚度为1cm时的吸收度。用ε表示。百分吸收系数：在一定波长下，溶液浓度为1%（W/V），厚度为1cm时的吸收度。用表示。2021/10/1010二、光谱分析法紫外-可见分光光度法特点与适用范围简便易行灵敏度高，可达10-4g/ml～10-7g/ml。准确度较高，相对误差为2%～5%。专属性较差较少应用于原料药含量测定，多用于制剂的定量检查。2021/10/1011二、光谱分析法紫外-可见分光光度法仪器校正与检定波长：常用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线校正，或用钬玻璃的尖锐吸收峰。吸光度的准确度：与规定的吸收系数比较。杂散光的检查对溶剂的要求：截止波长测定法：波长扫描与吸光度读数2021/10/1012二、光谱分析法紫外-可见分光光度法含量测定方法对照品比较法吸收系数法计算分光光度法比色法D为稀释倍数。2021/10/1013二、光谱分析法荧光分析法特点与适用范围灵敏度高，可达10-10g/ml～10-12g/ml.浓度太大会有“自熄灭”作用，故适用于低浓度的溶液。干扰因素多，须做空白试验。取样少，方法快速。衍生化试剂提高了适用范围2021/10/1014二、光谱分析法荧光分析法干扰的排除溶剂：进一步纯化溶剂，空白试验溶液：适当的浓度，减少杂质，降低溶氧，调节pH玻璃量器：高洁净度温度：稳定的温度2021/10/1015二、光谱分析法荧光分析法含量测定相对定量方法测定线性范围较窄式中：Ci为供试品溶液的浓度，Cr为对照品溶液的浓度，Ri为供试品溶液的读数，Rib为供试品溶液试剂空白的读数，Rr为对照品溶液的读数，Rrb为对照品溶液试剂空白的读数。2021/10/1016三、色谱分析法特点与适用范围高灵敏度高专属性高效能与高速度适用于药物制剂，尤其复方制剂的含量测定。分类依据分离原理：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、分子排阻色潽等依据分离方式：纸色谱法，薄层色谱法，柱色谱法，气相色谱法，高效液相色谱法等2021/10/1017三、色谱分析法高效液相色谱法药品标准对HPLC方法改变的要求对仪器的一般要求色谱柱：填料，孔径与粒径，柱直径，温度，pH等检测器：通用型检测器与选择性检测器，对流动相的要求流动相：反相系统与正相系统2021/10/1018三、色谱分析法高效液相色谱法系统适用性试验色谱柱的理论塔板数色谱峰的分离度色谱系统的重复性：RSD≤2.0%色谱峰的拖尾因子d1为极大峰至峰前沿之间的距离。T应在0.95～1.05之间。2021/10/1019三、色谱分析法高效液相色谱法测定法外标法：一点法；两点法；工作曲线法内标法2021/10/1020三、色谱分析法气相色谱法检测器、固定液及特殊指定的色谱柱材料不能更换对仪器的一般要求载气色谱柱填料，柱管材质，固定液检测器种类，使用温度进样方式系统适用性试验测定法：多采用内标法2021/10/1021第二节样品分析的前处理方法2021/10/1022样品分析的前处理方法在分析含金属或卤素、氮、硫、磷等元素的有机药物前，需进行适当的药品前处理。分类不经有机破坏的前处理方法经有机破坏的前处理方法2021/10/1023样品分析的前处理方法不经有机破坏的前处理方法直接测定法——含金属或C-M不牢固的有机金属药物配位滴定法氧化还原滴定法经水解后测定法——卤素联脂肪碳链（溶于适当溶剂再水解）碱水解后测定法酸水解后测定法经氧化还原后测定法——卤素联芳环牢固（一般用于测碘）2021/10/1024样品分析的前处理方法经有机破坏的前处理方法湿法破坏硫酸-硫酸盐法——凯氏定氮法硝酸-高氯酸法硝酸-硫酸法其它湿法干法破坏高温炽灼法

氧瓶燃烧分解后测定法2021/10/1025经有机破坏的前处理方法硫酸-硫酸盐法——凯氏定氮法将含氮药物与硫酸在凯氏定氮烧瓶中共热，药物分子中有机结构被氧化分解（亦称“消解”或“消化”）成二氧化碳和水，有机结合的氮则转变为无机氮，并与过量的硫酸结合为硫酸氢铵及硫酸铵，经氢氧化钠碱化后释放出氮气，并随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或碱滴定液滴定。高温炽灼法将含待测元素的有机药物经高温灼烧灰化，使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐，以供分析。根据分析对象与目的不同，常加无水碳酸钙、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化。氧瓶燃烧法2021/10/1026第三节药品质量标准分析方法验证2021/10/1027药品质量标准分析方法验证方法验证的目的需验证的分析项目：鉴别试验；杂质定量或限度检查；含量测定等验证内容：准确度；精密度；专属性；检测限/定量限；线性及范围；耐用性等2021/10/1028一、准确度含量测定方法的准确度原料药的含量测定制剂的含量测定杂质定量测定方法的准确度使用杂质对照品缺少杂质对照品数据要求2021/10/1029二、精密度标准偏差（SD）与相对标准偏差（RSD）验证内容重复性中间精密度重现性数据要求2021/10/1030三、专属性鉴别反应含量测定和杂质测定阴性对照阳性对照纯度测试2021/10/1031四、检测限/定量限检测限常用方法目视法：非仪器法信噪比法：色谱法标准偏差法：光谱法定量限：信噪比要求不同数据要求2021/10/1032五、线性及范围线性回归方程相关系数范围原料药和制剂含量测定制剂含量均匀度检查溶出度或释放度中的溶出量测定特殊元素含量测定杂质测定2021/10/1033六、耐用性耐用性典型的变动因素被测溶液环境因素液相色谱法中典型因素气相色谱法中典型因素2021/10/1034七、验证内容的选择非定量分析方法定量分析方法微量定量分析方法2021/10/1035七、验证内容的选择项目内容鉴别元素或杂质检查含量测定及溶出量测定定量限度准确度＋＋精密度＋

＋重复性＋＋中间精密度

＋①

＋①

专属性②＋＋＋＋检测限＋

－③＋－定量限＋－线性＋＋范