实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座

试验目标和要求：掌握大鼠大致解剖次序、主要脏器腺体解剖位置与形态特征及脏器指数计算方法。试验材料：解剖刀、剪、针、镊子,开颅器及白瓷盘，麻醉剂；动物每组雌性、雄性大鼠各一只。注意点：注意器械伤害学生。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第1页试验操作：1.将大鼠麻醉后放入白瓷盘中观察其外形观察大鼠毛色及身体头、颈、躯干、四肢、脚、尾、鼻、口，口中有齿及齿式，雌性和雄性生殖器。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第2页2.剖开头骨用剪刀小心自头骨与颈柱相接枕骨大孔，向眼窝和前方剪开头骨，剪刀不要插入太深，并尽可能保持硬脑膜。然后再在额前横剪，小心用镊子取下头盖骨，可分别观察硬脑膜。有血管分布蛛网膜和脑表面软脑膜。小心将脑取出，由前向后分别为嗅球、大脑、间脑（大脑腹面）、中脑、小脑、延脑及脊髓。间脑下方脑漏斗中为脑下垂体。在大脑腹面分布有12对脑神经。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第3页3.将大鼠腹面向上拉直四肢用大头针固定在木板上放入白瓷盘中。用镊子轻轻提起腹部皮肤，在生殖和排泄孔稍前方剪开一裂口，从此处伸入剪刀，沿身体腹中线向前剖至下颌，再在前肢与后肢向两侧作横剖。然后用镊子夹住剖面边缘，用刀背轻轻分离皮肤同时，能够观察到颈浅淋巴结。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第4页4.剖开颈部镊子提起胸骨舌骨肌并将其剪断除去，暴露气管及喉头，可观察喉，甲状软骨，环状软骨及气管，在前4-5节气管环左、右偏腹侧有粉红色、三角形或菱形甲状腺。分离观察左右颈动脉、颈静脉，下颌腺舌下腺。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第5页5.剖开胸腔

用镊子提起胸部左侧缘肌肉，向前剪至前肢基部（注意此处有粗大静脉血管），用一样方法剪断胸部右侧缘肌肉然后从胸廓下角开始，从两侧斜向前肢基部剪开胸壁（剪断肋骨）当剪至第一、二、肋骨要小心，不要剪破血管，用剪刀把三角形基部与膈分开，提起三角形基部，可见纵膈将胸腔分为左右两部，小心剥离胸骨下面结缔组织与肉色脂肪状胸腺（位于心脏前方），了解心脏，肺脏结构和位置。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第6页6.剖开腹腔

用剪刀在腹正中线稍左侧剪开一小切口向前至胸骨剑突处，再沿肋骨后缘向两侧作横切口，以暴露腹腔。观察腹腔内脏器官自然位置。膈前为胸腔，膈后为腹腔。肝脏，胃肠（贲门、幽门），脾脏，十二指肠，胰脏，肾脏（肾动脉、肾静脉），肾上腺，膀胱，精囊腺，前列腺，睾丸、附睾、输精管，尿道球腺、输精管腺，卵巢，输卵管，双子宫。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第7页7.脏器称重内脏重量和体重之比（某个脏器湿重与单位体重比值，常以每100g体重计）称脏器指数，脏器指数常能反应试验动物总营养状态和内脏病变情况，不一样龄期动物脏器指数有一定规律，如接触处由物质使某个脏器受到损害，脏器指数将发生改变。惯用试验动物脏器包含肝、脾、肾、心、肺、脑、甲状腺、肾上腺、脑垂体、眼球、睾丸、胰、胸腺。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第8页一、尿液采集1.用代谢笼采集尿液

代谢笼用于搜集试验动物自然排出尿液，是一个尤其设计为采集试验动物各种排泄物密封式喂养笼，有代谢笼除可搜集尿液外，又可搜集粪便和动物呼出CO2。普通简单代谢笼主要用来搜集尿液。放在代谢笼内喂养试验动物，可经过其特殊装置搜集尿液。附：试验动物体液采集实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第9页2.导尿法搜集尿液

施行导尿术，较适宜于犬、猴等大动物。普通不需要麻醉，导尿时将试验动物仰卧固定，用甘油润滑导尿管。对雄性动物，操作员用一只手握住阴茎，另一只手将阴茎包皮向上，暴露龟头，使尿道口张开，将导尿管迟缓插入，导尿管推进到尿道球部时有抵抗感，此时注意动作轻柔，继续向膀胱推进导尿管，即有尿液流出。雌性动物尿道外口在阴道前庭，导尿时于阴道前庭腹侧将导尿管插入阴道外口，其后操作同雄性动物导尿术。用导尿法导尿可采集到没有污染尿液。严格执行无菌操作，可搜集到无菌尿液。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第10页3.输尿管插管采集尿液

普通用于要求准确计量单位时间内试验动物排尿量试验。剖腹后，将膀胱牵拉至腹腔外，暴露膀胱底两侧输尿管。在两侧输尿管近膀胱处用线分别结扎，于输尿管结扎处上方剪一小口，向肾脏方向分别插入充满生理盐水插管,用线结扎固定插管,即可见尿液从插管滴出，能够搜集。采尿过程中要用38℃热生理盐水纱布遮盖切口及膀胱。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第11页4.压迫膀胱采集尿液

试验人员用手在试验动物下腹部加压，手法既轻柔又有力。当增加压力使试验动物膀胱括约肌松弛时，尿液会自动流出，即行搜集。5.穿刺膀胱采集尿液

试验动物麻醉固定后，剪去下腹部耻骨联合之上，腹正中线两侧被毛，消毒后用注射针头接注射器穿刺。取直角进针，针头穿过皮肤后稍微改变角度，以防止穿刺后漏尿，然后刺向膀胱方向，边迟缓进针边回抽直到抽到尿液为止。

实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第12页6.剖腹采集尿液

按上述穿刺膀胱采集尿液法做术前准备,其皮肤准备范围应更大。剖腹暴露膀胱，直视下穿刺膀胱抽取尿液。也可于穿刺前用无齿镊夹住部分膀胱壁，从镊子下方膀胱壁进针抽尿。

7.提鼠采集尿液

鼠类被人抓住尾巴提起即出现排尿反射,以小鼠这种反射最显著。能够利用这一反射搜集尿液。当鼠类被提起尾巴排尿后，尿滴挂在尿道外口附近被毛上，不会马上流走，操作人员应快速用吸管或玻璃管接住尿滴。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第13页二、脑脊液采集

脑脊液可能经过脊髓腔穿刺法采集，小动物也可经过枕骨大孔直接采集。狗、免脑脊液采集通常采取脊髓穿刺法：穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物轻度麻醉后，侧卧位固定，使头部及尾部向腰部尽可能屈曲，剪去第七腰椎周围被毛。消毒后操作者在动物背部用左手拇、食指固定穿刺部位皮肤，右手持腰穿刺针直刺入，当有落空感及动物后肢跳动时，表明针已达椎管内（蛛网膜下腔），抽去针芯，即见脑脊液流出。假如无脑脊液流出，可能是没有刺破蛛网膜。轻轻调整进针方向及角度，假如脑脊液流太快，插入针芯稍加阻塞，以免造成颅内压突然下降而形成脑疝。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第14页

大鼠脑脊液采集可采取忱骨大孔直接穿刺法：在大鼠麻醉后，头部固定于定向仪上。头颈部剪毛、消毒，用手术刀沿纵轴切一纵行切口（约2cm）用剪刀钝性分离颈部背侧肌肉。为防止出血，最深层附着在骨上肌肉用手术刀背刮开，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔进针直接抽取脑脊液。抽取完成缝好外层肌肉、皮肤。刀口处可撒些磺胺药粉，预防感染。采完脑脊液后，应注入等量消毒生理盐水，以保持原来脑脊髓腔里压力。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第15页三、胸水采集主要采取胸腔穿刺法搜集试验动物胸水，也可处死试验动物剖开胸腔采集胸水。1.穿刺点定位于试验动物腋后线第11~12肋间隙穿刺，穿刺针紧贴肋骨上缘，不然轻易损伤肋间神经。也可在胸壁近胸骨左侧缘第4~5肋间隙穿刺。2.穿刺方法试验动物取立位或半卧位固定，局部皮肤去毛、消毒、麻醉，穿刺针头与注射器之间接三通连接装置，试验人员以左手拇指、食指绷紧局部皮肤，右手握穿刺针紧靠肋骨下缘处垂直进针，穿刺肋间肌时产生一定阻力，当阻力消失有落空感时，说明已刺入胸膜腔，用左手固定穿刺针，打开三通连接装置，迟缓抽取胸水。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第16页四、腹水采集

动物取自然站立位固定。穿刺部位在耻骨前缘与脐之间，腹中线两侧。剪毛、消毒，局部浸润麻醉。操作者左手拇、食指紧绷穿刺部位皮肤，右手控制穿刺深度做垂直穿刺。注意不可刺太深，以免刺伤内脏。穿刺针进入腹腔后，腹水多时可见腹水因腹压高而自动流出。腹水少可轻轻回抽，并同时稍稍转动一下针头，一旦有腹水流出，马上固定好针头及注射器位置连续抽吸。抽腹水时注意不可速度太快，腹水多时不要一次大量抽出，以免因腹压突然下降造成动物出现循环功效障碍等问题。

实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第17页五、唾液采集1.直接抽吸法在急性试验中，可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液。此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。2.制备腮腺瘘法在慢性试验中，搜集狗唾液，要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管开口为中心，切成一直径约2~3cm圆形粘膜片，将此粘膜片与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外，将带有导管开口粘膜片与周围皮肤缝合，腮腺分泌唾液就流出颊外。这种方法能够搜集到比较纯净唾液。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第18页六、胃液采集1.直接搜集胃液法急性试验时，先将动物麻醉，假如是狗，能够用插胃管法搜集胃液；如是大鼠，需手术剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用pH7.0、35℃左右生理盐水，以12ml/h流速灌胃，搜集流出液，进行分析。2.制备胃瘘法在慢性试验中，搜集胃液多用胃瘘法，如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常消化，从小胃可搜集到纯净胃液。应用该法，能够待动物恢复健康后，在动物清醒状态下重复采集胃液。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第19页七、胰液和胆汁采集

在动物试验中，主要是经过对胰总管和胆总管插管而取得胰液或胆汁。狗胰总管开口于十二指肠降部，在紧靠肠壁处切开胰管，结扎固定并与导管相连，即可见无色胰液流入导管。大鼠胰管与胆管聚集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，可分别搜集到胰液和胆汁。有时也可经过制备胰瘘和胆囊瘘来取得胰液和胆汁。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第20页八、淋巴液采集

淋巴液采集比较困难，普通主要采集大动物淋巴液。惯用大量搜集淋巴液方法是解剖出胸导管后插管搜集淋巴液。以大鼠为例，选择180~250g雄性大鼠，麻醉、固定、消毒，从剑突起沿其左侧肋缘向下外方作一长约5cm切口，再从剑突向下作正中切开，暴露横膈与腹主动脉，胸导管紧贴在腹主动脉左后侧。在胸导管上剪一斜口，将塑料插管顶端插入，即可见乳白色淋巴液流出。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第21页九、阴道液采集1.滴管冲洗法用消毒滴管吸收少许生理盐水仔细、重复冲洗被检雌性动物阴道，将冲洗液吸出滴在载玻片上晾干后染色镜检。也可直接将冲洗液置于低倍显微镜下观察，依据细胞类型改变判别试验动物动情周期中不一样时期。2.擦拭法用生理盐水将消毒棉拭子湿润后，挤干棉拭子上生理盐水，轻轻插入雌性动物阴道内，沿阴道内壁擦拭、转动，然后取出并作阴道涂片，进行镜检。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第22页十、精液采集1.人工阴道套采精液法本法适合用于犬、猪、羊等大动物，采取特制人工阴道套套在试验动物阴茎上采集精液。采精时，一手捏住阴道套，套住雄性动物阴茎，以完全套住雄性动物阴茎为佳，插入阴道套后，若试验动物发出低叫声，表明已经射精。此时可取下阴道套，拆下采精瓶，取出精液，快速做相关检验。2.阴道栓采精法本法是将阴道栓涂片染色，镜检凝固精液。阴道栓是雄性大、小鼠精液和雌性阴道分泌物混合，在雌鼠阴道内凝结而成白色稍透明、圆锥形栓状物，普通交配后2~4小时即可在雌鼠阴道口形成，并可在阴道停留12~24小时。3.其它采精液法用电流等物理方法刺激雄性动物阴茎或其它性敏感区，使雄性动物被刺激发情，直至射精，用采精瓶采集射出精液。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第23页十一、前列腺液采集

对体形较大试验动物，可用手按摩雄性动物前列腺部，使腺体分泌来采集前列腺液。十二、乳汁采集1.人工按摩法用按摩挤奶搜集乳汁方法适合犬、猪、羊等大动物乳汁采集。选取哺乳期试验动物，早上采集乳汁量最多，用手指轻轻按摩试验动物乳头，使乳汁自然流出，如乳汁不能自然流出，可张开手掌从乳房基底部朝乳头方向按摩、挤压整个乳房，即可挤出乳汁。2.吸奶器吸奶法采取吸奶器吸在动物乳头上，造成负压而使乳汁被动吸出。实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别专家讲座第24页十三、骨髓采集

采集骨髓普通选择胸骨、肋骨、胫骨和股骨等造血功效活跃骨组织。猴、犬、羊等大动物骨髓采集用活体穿刺取骨髓方法；大、小鼠等小动物骨头小难穿刺，只能剖杀