药物的杂质检查weiying详解演示文稿

药物的杂质检查weiying详解演示文稿目前一页\总数一百二十六页\编于二十三点（优选）药物的杂质检查weiying目前二页\总数一百二十六页\编于二十三点基本要求

一、掌握药物杂质的来源、分类、杂质限量的概念和计算，一般杂质和特殊杂质检查方法。二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。三、了解热分析在药物分析中的应用。返回目前三页\总数一百二十六页\编于二十三点第三章药物的杂质检查

Testforpurity第一节药物的杂质与限量第三节一般杂质检查第四节特殊杂质检查第二节杂质的检查方法目前四页\总数一百二十六页\编于二十三点有效性针对某些药效进行检查的项目如利福平的结晶度，影响生物利用度

制剂的有效性—附录中的一些检查项

目，崩解时限、溶出度、溶出度等。均一性含量均一性如“含量均匀度”试验概述药品标准中的检查项目是对药物以下四个方面的状态进行试验分析：P37目前五页\总数一百二十六页\编于二十三点安全性

进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目纯度要求

对杂质限量进行检查

目前六页\总数一百二十六页\编于二十三点例：纯度要求PethidineHydrochloride

盐酸哌替啶无效异构体I无效异构体II目前七页\总数一百二十六页\编于二十三点第一节药物的杂质与限量一、药物的杂质与纯度1.纯度（Purities）药物的纯净程度1）评价：综合考虑药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含量测定来综合评定药物的纯度.杂质检查是药物纯度评价的一项重要内容.目前八页\总数一百二十六页\编于二十三点药物只有合格品与不合格品；一般化学试剂分为4个等级（基准试剂、优级纯或特种试剂(光谱纯、色谱纯、农药残留检测级)、分析纯、化学纯）药物的纯度和化学试剂的纯度在要求上不同：2.药物纯度与试剂纯度化学试剂硫酸钡：不检查可溶性钡盐药用规格硫酸钡：检查酸溶性钡盐、重金属、砷盐例化学试剂不能代替药品！目前九页\总数一百二十六页\编于二十三点3.杂质

(Impurities)

药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。简言之:任何影响药品纯度的物质。1）对人体有害的如：砷盐、重金属、毒素2）影响药物稳定性如：水分（青霉素钾盐）3）虽对人体无害也不影响药物稳定性，但可用于考核生产工艺和生产控制是否正常——指示性杂质（信号杂质）如：Cl-

SO42-目前十页\总数一百二十六页\编于二十三点杂质的来源生产过程储藏过程合成过程中，原料不纯或反应不完全，中间体、副产物在精制中未除尽制剂过程试剂、溶剂、还原剂残留异构体、多晶体使用的金属器皿、装置、工具引入的金属杂质在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下，或因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化二、杂质来源与种类

sourceandsortsofimpurities目前十一页\总数一百二十六页\编于二十三点1.生产过程中引入杂质的例子

酸度：水解试剂带入

乙醇中不溶物：水解中间体(糊精)

SO32-：产品用H2SO3漂白

可溶性淀粉：水解不完全生产过程目前十二页\总数一百二十六页\编于二十三点药典中葡萄糖检查项下目前十三页\总数一百二十六页\编于二十三点双氯非那胺的合成工艺生产过程中引入杂质例子:地塞米松磷酸钠生产过程中使用大量甲醇和丙酮——残留溶剂杂质目前十四页\总数一百二十六页\编于二十三点2.贮藏过程中引入

例如：麻醉乙醚醛及有毒的过氧化物药典规定:起封后24小时内使用如：具有酯键、酰胺、环酰胺、卤代烃等药物易水解；具有Ar-OH,-SH,-NO2,-CHO,C=C-C=C等结构的药物在空气中易氧化。OH--,H2O青霉噻唑酸分解青霉醛、青霉胺青霉素目前十五页\总数一百二十六页\编于二十三点卡比马唑的合成工艺阿司匹林水解——水杨酸（杂质）水解目前十六页\总数一百二十六页\编于二十三点四环素在酸性条件下可发生差向异构化反应，生成差向四环素(毒性高、活性低)目前十七页\总数一百二十六页\编于二十三点三、杂质的种类按毒性分类毒性杂质和信号杂质（如氯化物、硫酸盐）按来源分类按理化性质分类工艺杂质、降解杂质、反应物和试剂中混入的杂质有机杂质、无机杂质、残留溶剂一般杂质特殊杂质目前十八页\总数一百二十六页\编于二十三点一般杂质：（信号杂质）在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮存过程中易引入的杂质，如酸、碱、水分、Cl-、SO42-、铁盐、重金属、砷盐、残渣等。

特殊杂质：是指在特定的药物生产和贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。这类杂质随药物不同则不同。目前十九页\总数一百二十六页\编于二十三点无效或低效杂质1.具有立体异构体的药物,其生物活性有很大差异;如：肾上腺素为左旋体,其升压作用是右旋体的12倍.2.异构体中,其顺式体与反式体的生物活性也不相同;如：VA以全反式的生物活性为最高.3.药物的晶型不同,其理化常数,溶解性稳定性、体内的吸收和疗效也有差异.

如：驱虫药甲苯咪唑,有A、B、C三种晶型.

其中C晶型的驱虫率90%,B晶型的驱虫率40~60%,A晶型的驱虫率小于20%.必须重视异构体和多晶型对药物有效性和安全性的影响.目前二十页\总数一百二十六页\编于二十三点杂质的限量：药物中所含杂质的最大允许量。限量表示(g/g)：百分之几（%）百万分之几（10-6）ppm限量检查：检查所含杂质是否超过杂质限量的规定，通常不要求测定其准确含量。

四、杂质的限量（limittest）目前二十一页\总数一百二十六页\编于二十三点

杂质限量对于不同杂质各不相同。如As对人体毒性大，其限量规定较严，一般最大限量不超过百万分之十（10ppm）；如Pb重金属，允许存在的最大限量一般不超过百万分之五十（50ppm）。目前二十二页\总数一百二十六页\编于二十三点1、杂质限量检查方法

三种检查方法比较法灵敏度法标准对照法注意平行原则（供试溶液和对照溶液应在完全相同的条件下反应）目前二十三页\总数一百二十六页\编于二十三点NaCl对照液葡萄糖稀硝酸10ml硝酸银1ml稀硝酸10ml硝酸银1ml对照液浊度>供试液浊度取一定量(C·V)与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与一定量(S)药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果（浊度或颜色），以确定杂质含量是否超过规定。标准对照法目前二十四页\总数一百二十六页\编于二十三点灵敏度法

在供试品溶液中加入试剂,在试验条件下反应,不得出现正反应.既以检测条件下反应灵敏度控制杂质限量.

如：蒸馏水中氯化物的检查5滴1mL0.2mg/50mL4µg/mL目前二十五页\总数一百二十六页\编于二十三点比较法

取一定量供试品,在规定条件下测定待检杂质参数,与规定限量比较,判断供试品中杂质限量.

例：肾上腺素中肾上腺酮的检查

规定：A310nm≯0.05供试品液(2.0mg/ml)盐酸溶液样品

(0.05mol/L)A310nm目前二十六页\总数一百二十六页\编于二十三点220260300nmλmax310nm肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线目前二十七页\总数一百二十六页\编于二十三点2、杂质限量的计算：式中：

L杂质的限度（%）

C对照液浓度（g/ml）

V对照液的加入体积（ml)

S供试品的量(g)注意:单位统一

供试品是否有稀释目前二十八页\总数一百二十六页\编于二十三点例1：对乙酰氨基酚中氯化物的检查：样2.0g溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准NaCl溶液(10μg/ml)5ml对照液相比，不得更深。

C=10μg/mlV=5.0mlS=252.0100=0.5g目前二十九页\总数一百二十六页\编于二十三点谷氨酸钠中重金属的检查：

取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲溶液（pH3.5)2ml，依法检查，与标准铅溶液（10μgPb/ml）所呈的颜色相比不得更深，已知重金属的限量为百万分之十，求算应取标准铅溶液（V）多少毫升？例2：目前三十页\总数一百二十六页\编于二十三点例3：肾上腺素上酮体的检查：取本品0.2g,置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9-2000)溶解并稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过0.05，酮体的百分吸收系数为435，求酮体的限量V样品=100mlC酮体=?S样品=0.2g

目前三十一页\总数一百二十六页\编于二十三点习题一磷酸可待因中吗啡的检查取本品0.10g,加盐酸溶液(9-1000)使溶解成5ml，加亚硝酸钠试液2ml，放置15min，加氨试液3ml，所显颜色与吗啡试液[取无水吗啡2.0mg，加盐酸溶液(9-1000)使溶解成100ml]5.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量是多少？目前三十二页\总数一百二十六页\编于二十三点习题二苯巴比妥钠中重金属的检查取本品2.0g,加水32ml，溶解后缓缓加入1mol/L盐酸溶液8ml，充分振摇，静置数分钟，滤过，取滤液20ml，加酚酞指示液1滴与氨试液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量成25ml，依法检查，含重金属不得超过10ppm。试计算应取得标准铅溶液(每1ml相当于10μgPb)的体积。目前三十三页\总数一百二十六页\编于二十三点第二节杂质的检查方法药物中可能存在的杂质

——决定杂质检查的项目药物中杂质的来源与种类

——有针对性地制订杂质检查项目的方法和限度一、杂质的研究规范质量标准中杂质的项目名称——1.杂质的化学名称；2.某类杂质总称3.检测方法目前三十四页\总数一百二十六页\编于二十三点一般有化学方法、色谱方法、光谱方法、物理方法二、杂质常用检查方法 A.显色1、化学方法：目前三十五页\总数一百二十六页\编于二十三点目前三十六页\总数一百二十六页\编于二十三点盐酸肼屈嗪中游离肼的检查:B.生成沉淀目前三十七页\总数一百二十六页\编于二十三点C.生成气体：盐酸乙基吗啡中胺盐检查.D.滴定法:如硫酸亚铁中的高铁盐检查目前三十八页\总数一百二十六页\编于二十三点薄层色谱TLC毛细管电泳CE高效液相色谱HPLC气相色谱GC2.色谱方法特殊杂质检查首选方法目前三十九页\总数一百二十六页\编于二十三点(一)薄层色谱法(TLC)

根据药物与杂质对吸附剂的吸附或对展开剂的解析能力不同(Rf值的差异),加以分离和检查.特点：

本法灵敏、简便、快速；不需特殊的设备、费用低；分离和鉴定同步进行.原点至溶剂前沿的距离原点至斑点中心的距离=fR薄层涂布：无粘合剂含粘合剂：常加入10~15%

煅石膏(CaSO4·2H2O,180℃烘4h)或0.5~0.7%羧甲基纤维素钠水溶液目前四十页\总数一百二十六页\编于二十三点TLC检查杂质的方法1)杂质对照品法

——适用于杂质已知并有杂质对照品的情况.

方法根据杂质限量,取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液,分别点于同一薄层板上展开,定位后进行检查.2)供试品溶液自身稀释对照法——适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况.方法将一定浓度供试品溶液按限量要求进行稀释并作为对照溶液，然后与供试品溶液在同一板上展开比较。目前四十一页\总数一百二十六页\编于二十三点

供试品10µlN-甲基哌嗪10µl

50mg/ml50µg/ml供试液中如显与对照品相应的杂质斑点，颜色与对照品主斑点比较，不得更深。枸橼酸乙胺嗪检查“N-甲基哌嗪”薄层：硅胶G展开剂：三氯甲烷-甲醇-氨溶液（13:5:1）显色：I2蒸气显色目前四十二页\总数一百二十六页\编于二十三点规定：如显杂质斑点，其颜色与对照溶液所显主斑点相比较，不得更深吡罗昔康供试液吡罗昔康供试液

20mg/ml

0.20mg/ml

吡罗昔康中检查“有关物质”薄层：硅胶GF254（含NaOH）展开剂：三氯甲烷-丙酮-甲醇（25:25:5）检视：紫外灯（254nm）目前四十三页\总数一百二十六页\编于二十三点例：例：氢化可的松中“其他甾体”检查供试液:3mg/ml对照液:60g/ml(供试液稀释50倍)判断:供试液的杂质斑点数≯3个,且供试液的杂质斑点颜色≯对照液主斑点颜色.目前四十四页\总数一百二十六页\编于二十三点3)杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照法P1074)对照药物法P107——无杂质对照品，或供试品杂质斑点与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量。方法选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为对照品.以后的常用术语，要知道操作方法目前四十五页\总数一百二十六页\编于二十三点(二)高效液相色谱法(HPLC)

根据供试品与杂质的对照品保留时间（tR）相同测定各杂质峰面积.特点：

分离效能高、专属性强、检测灵敏性好、应用范围广，能准确、快速、分离分析同时进行.目前四十六页\总数一百二十六页\编于二十三点

分类柱填充剂流动相正相色谱硅胶极性小的有机溶剂极性化学键合硅胶正己烷,氯仿,二氧六环等反相色谱十八烷基硅烷键合硅胶甲醇/水乙腈/水四氢呋喃/水离子对色谱ODSRP流动相中加离子对试剂离子交换色谱离子交换填料电解质水溶液排阻色谱

凝胶渗透有机凝胶有机溶剂

凝胶过滤玻璃微孔球水溶液高效液相色谱法

HPLC目前四十七页\总数一百二十六页\编于二十三点HPLC检查杂质的方法1）外标法（杂质对照品法）供试液、杂质对照品液分别进样测定Axmx=Armrmx=mr

×AxAr例：卡托普利及其片剂中卡托普利二硫化物的检查方法：CHP2010二部色谱柱：LunaC18(2)5μ250*4.6流动相：0.01mol/L磷酸氢二钠溶液－甲醇－乙腈（70:25:5）用磷酸调节pH值至3.0±0.05流速：1.0ml/min进样体积：20μl检测波长：215nm目前四十八页\总数一百二十六页\编于二十三点2）加校正因子的主成分自身对照法目前四十九页\总数一百二十六页\编于二十三点例：红霉素中红霉素B、红霉素C及有关物质的检查红霉素A是主要活性物质方法：取本品，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇(15：1)溶解并稀释制成每lml中约含4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取5ml,置100ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇(15：1)稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。照红霉素A组分项下的色谱条件，取对照溶液20ul注人液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的50%,精密量取供试品溶液与对照溶液各20ul，分别注人液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3.5倍。红霉素B按校正后的峰面积计算(乘以校正因子0.7)和红霉素C峰面积均不得大于对照溶液主峰面积(5.0%)。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，红霉素烯醇醚、杂质1按校正后的峰面积计算（分别乘以校正因子0.09,0.15)和其他单个杂质峰面积均不得大于对照溶液主峰面积的0.6倍(3.0%);其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(5.0%),供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.01倍的峰可忽略不计。目前五十页\总数一百二十六页\编于二十三点3)不加校正因子的主成分自身对照法——适用于有杂质含量少、无法得到杂质对照品、杂质的结构与对照品相似，即响应因子基本相同.将供试溶液稀释成一定浓度作为对照溶液，调节检测灵敏度（对照溶液主成分峰高约为满量程的20%-25%）后，分别进样，将供试溶液中各杂质峰面积及总和与对照溶液主成分峰面积比较。例1：甲硝唑中检“2-甲基-5-硝基咪唑”供试液：0.1mg/ml对照溶液：0.01mg/ml规定：供试液色谱图中各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主成分峰面积的1%。目前五十一页\总数一百二十六页\编于二十三点方法：CHP2010二部色谱柱：RezexROA-OrganicAcid150×7.8mm（货号：00F-0138-K0）保护柱：03B-0138-K0（保护柱套）+AJ0-4490（保护柱芯）流动相：水（用稀硫酸调节pH值至2.5±0.1）流速：0.6ml/min进样体积：20μl检测波长：207nm例：利巴韦林中有关物质的检查目前五十二页\总数一百二十六页\编于二十三点伊维菌素溶液中“有关物质”的检查对照溶液供试溶液稀释10倍A主=72181A1+A2+A3=67260123目前五十三页\总数一百二十六页\编于二十三点4)面积归一化法——适用于供试品中结构相似、相对含量较高且限度范围较宽的杂质含量的粗略考察.例如：β-内酰胺抗生素中“异构体”的比例检查总峰面积（除溶剂峰外）杂质峰面积总和×100%≤规定限量目前五十四页\总数一百二十六页\编于二十三点(三)气相色谱法(GC)——用于药物中挥发性杂质的检查,如药物中残留溶剂、农药残留量等.检查方法:除同高效液相色谱法外，还有“标准溶液加入法”计算公式如下：目前五十五页\总数一百二十六页\编于二十三点(四)毛细管电泳(CE)——适用于酶类药物中酶类杂质的检查,如抑肽酶中去丙氨酸-抑肽酶的检查.检查方法:除同高效液相色谱法外.目前五十六页\总数一百二十六页\编于二十三点3.光谱方法(一)可见-紫外分光度法432地蒽酚（二羟基蒽醌）λ432nm地蒽酚基本无吸收二羟基蒽醌最大吸收规定：0.01%的供试溶液在432nm处的A≤0.12利用药物与杂质的紫外吸收差异进行检查.如：地蒽酚中二羟基蒽醌的检查目前五十七页\总数一百二十六页\编于二十三点(二)红外分光度法——适用于药物中无效或低效晶型的检查.如-OH：3650～3200cm-1有强宽峰，1400～1260cm-1弱峰；-NH：3500～3100cm-1有强峰，1650～1550cm-1弱峰；C=O：1700cm-1左右有强峰；-CH3，-CH2-在2960cm-1

，2850cm-1有强峰，同时在1450cm-1，1375cm-1有强峰等。目前五十八页\总数一百二十六页\编于二十三点甲苯咪唑无效A晶型640cm-1强吸收662cm-1弱吸收C晶型640cm-1弱吸收662cm-1强吸收因此，供试品中若含有A晶型，在此二波长处的吸收度的比值会发生改变。例：甲苯咪唑中A晶型的检查：640cm-1662cm-1

供试品D1'D2'10%A晶型的甲苯咪唑对照品

D1D2R=D1/D2R'=D1'/D2'

R'应小于R，则供试品中A晶型在10%以下。目前五十九页\总数一百二十六页\编于二十三点662cm-1640cm-1甲苯咪唑A晶型C晶型662cm-1640cm-1620cm-1803cm-1目前六十页\总数一百二十六页\编于二十三点目前六十一页\总数一百二十六页\编于二十三点(三)原子吸收分光度法——适用于药物中金属杂质的检查.采用“标准溶液加入法”，例如维生素C中铁盐和铜盐的检查

利用药物中所含待检元素的原子蒸气，吸收发自光源的该元素特征共振射线，使原子中的电子被激发，原子由基态跃迁到激发态，测定基态原子对辐射能的吸收程度，即可测出供试药物中待检元素的含量。例：肝素钠中检查钾盐供试液供试液+标准KCl原子吸收λ

766.5nm测定ba则应b<a-b目前六十二页\总数一百二十六页\编于二十三点4.热分析法（Thermalanalysis）热重分析法(ThermogravimetricAnalysis,TGA)差热分析法(Differential

ThermalAnalysis,DTA)差示扫描量热法(Differential

ScanningCalorimetry,DSC)测定物质的物理化学性质与温度关系的仪器分析方法。目前六十三页\总数一百二十六页\编于二十三点1）热重分析法(TGA)

应用热天平在程序控温的条件下测量物质的质量随温度变化的热分析技术,可计算出样品在相应温度范围内减失质量的百分率.特点：分析样品用量少,适用于贵重药材或在空气中容易氧化药物干燥失重测定.灵敏度高,可达1g以下测定速度快可用于判断结晶水或吸附水,并推断结晶水含量.目前六十四页\总数一百二十六页\编于二十三点草酸钙(CaC2O4·H2O)的热重曲线ΔG1ΔG2ΔG310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T(℃)在温度T1时CaC2O4·H2OCaC2O4+H2O在温度T2时CaC2O4CaCO3+CO在温度T3时CaCO3CaO+CO2目前六十五页\总数一百二十六页\编于二十三点2）差热分析法(DTA)在程序控制温度下，测量供试品和惰性参比物(常用石英砂、煅制MgO)之间的温度差与温度(或时间)关系的热分析技术。供试品发生放热反应温度高于参比物质从而产生吸热峰供试品发生吸热反应温度低于参比物质从而产生放热峰目前六十六页\总数一百二十六页\编于二十三点DTA用途(1)熔点测定熔程T△T=0目前六十七页\总数一百二十六页\编于二十三点(2)定性和纯度检定——根据峰的数目、形状、位置对供试品进行纯度判别T供试品对照品△T=0目前六十八页\总数一百二十六页\编于二十三点盐酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲线10090807060DTAT(℃/min)196℃233℃目前六十九页\总数一百二十六页\编于二十三点15℃/minProgram1、纯双氯青霉素转变成液态并降解2、加入乳糖3、加入硬脂酸镁4、加入硬脂酸，主成分峰消失5、单加入硬脂酸，主峰亦消失℃0100200△T12345DTA扫描图目前七十页\总数一百二十六页\编于二十三点···样品参比加热炉至信号放大器加热器导线炉温控制器差示扫描量热分析仪主要结构简图3）差示扫描量热法(DSC)

测量保持供试品和惰性参比物的温度相同,系统所需输给供试品或参比物的能量差随温度(或时间)变化的热分析技术.吸热变化，增补能量，峰向上放热变化，释放能量，峰向下目前七十一页\总数一百二十六页\编于二十三点用于待测物质的鉴别、晶型鉴别、纯度检查以及熔点和水分等的测定，更适合于测量物质在物理变化或化学变化中焓的变化。不纯物质的DSC图t(min)△T目前七十二页\总数一百二十六页\编于二十三点不同纯度苯甲酸的DSC曲线温度97.2%98.6%标准品目前七十三页\总数一百二十六页\编于二十三点温度(℃)508011014017020023026029015.000.007.50盐酸舍曲林晶型Ⅰ的DSC曲线mcal/sec目前七十四页\总数一百二十六页\编于二十三点温度(℃)50801101401702002302602905.000.002.50mcal/sec盐酸舍曲林晶型Ⅲ的DSC曲线目前七十五页\总数一百二十六页\编于二十三点应用热分析法检查药物纯度的条件样品纯度在98.0%以上杂质不与主成分反应杂质不与主成分形成共晶或固熔体杂质与熔融试样有化学相似性药物在熔融过程中化学性质稳定药物如存在多晶现象则必须全部转变成某一晶型目前七十六页\总数一百二十六页\编于二十三点甲磺酸二氢麦角毒碱的DSC-TGA曲线℃50100150200DSCTGA失溶剂失水分解目前七十七页\总数一百二十六页\编于二十三点5.酸碱度检查法1）酸碱滴定法在一定指示液下,用酸或碱滴定供试品中碱性或酸性杂质,以消耗滴定液的ml数作为限度指标.如：已酸羟孕酮酸度的检查.2）指示液法

取一定量指示液,以pH值的变色范围作为酸碱性杂质的限度指标.如：地蒽酚酸度的检查.目前七十八页\总数一百二十六页\编于二十三点例：蒸馏水的酸碱度取样品10mlpH值范围：a→甲基红(pH4.2-6.3,红-黄)指示液2滴,不得显红色;b→溴麝香草酚蓝指示液5滴(pH6.0-7.6,黄-蓝),不得显蓝色.3）pH测定法

用电位法测定供试品溶液的pH值.例：注射用水的pH值范围

目前七十九页\总数一百二十六页\编于二十三点6.物理性状检查法臭味及挥发性差异颜色差异溶解行为差异旋光性质的差异目前八十页\总数一百二十六页\编于二十三点2.杂质无挥发性利用药物在室温或加热挥发后,遗留残渣于一定温度加热至恒重,其重量不得超过规定.例：乙醇中不挥发物的检查.1)嗅味及挥发性差异1.杂质有特殊气味：乙醇中的杂醇油（异臭）目前八十一页\总数一百二十六页\编于二十三点药物自身无色生产中引入有色的有关物质或分解产物.例：磺胺嘧啶原料药颜色检查

——磺胺苯环上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物.2)颜色差异3)溶解行为的差异根据药物与杂质溶解度的差异例：葡萄糖中糊精的检查

目前八十二页\总数一百二十六页\编于二十三点1.药物有旋光度而杂质没有.4)旋光性质的差异Ch.P规定黄体酮在乙醇中的比旋度为：＋186°～198°黄体酮及其中间体的比旋度（溶剂：乙醇）化合物

浓度%

温度℃

[а]D

黄体酮1～1.4

20～25

+193°±4°

醋酸双烯醇酮0.920-31°±2°

醋酸妊娠烯醇酮～1常温+20°±2°2.杂质有旋光度而药物没有.例:硫酸阿托品中莨菪碱的检查,供试品水溶液50mg/mL不得过-0.4°目前八十三页\总数一百二十六页\编于二十三点化学法薄层色谱法（TLC）光谱法物理法显色反应检查法沉淀反应检查法生成气体检查法滴定法高效液相色谱法（HPLC）气相色谱法（GC）毛细管电泳法（CE）色谱法红外分光光度法（IR）可见-紫外分光光度法原子吸收分光光度法（AAS）热分析法酸碱度检查法物理性状检查法酸碱滴定法指示液法pH测定法检查方法总结

目前八十四页\总数一百二十六页\编于二十三点（一）氯化物（二）硫酸盐（三）铁盐（四）重金属（五）砷盐（六）干燥失重（七）水分测定（十）残留溶剂（八）炽灼残渣比浊法比色法（九）易炭化物（十一）溶液颜色（十二）溶液澄清度第三节药物中一般杂质的检查目前八十五页\总数一百二十六页\编于二十三点供试品稀HNO310mlH2OAgNO31ml标准溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml

暗处放置5min(避免AgCl分解)一、氯化物（Chloride）检查1、原理：2、检查法：目前八十六页\总数一百二十六页\编于二十三点3、反应条件（1）灵敏度（合适的浑浊度）：[Cl–

]以50—80ug/50ml

（相当于NaCl标准液5—8ml）为宜，AgCl的浊度梯度明显。（2）酸及酸度：

HNO3

加入量：10ml稀HNO3

或1ml浓HNO3/50ml

加入作用：加速AgCl浑浊的生成，又可防止形成Ag2CO3、Ag2O、Ag3PO4。目前八十七页\总数一百二十六页\编于二十三点（3）温度：以30--40℃产生的浑浊最大，结果也稳定，但供试液与对照液相同条件下处理，仍可在室温进行。（4）避光：暗处放置5分钟后比较。从比色管上方向下观察。目前八十八页\总数一百二十六页\编于二十三点1.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。2.平行操作原则。3.供试品不澄清：应过滤，其滤纸应用含HNO3的蒸馏水洗净。4.若供试品有色，需经处理后方可检查。

注意：HNO3+3Cl-+3H+Cl2+NOCl2+2H2O+NOCl目前八十九页\总数一百二十六页\编于二十三点

（1）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。（2）内消色法：倍量法供试品有色处理方法目前九十页\总数一百二十六页\编于二十三点SO42-+Ba2+HCl原理：二、硫酸盐(Sulfates)的检查BaSO4(浑浊）目前九十一页\总数一百二十六页\编于二十三点（三）铁盐(Iron)的检查ChP、USP------硫氰酸盐法BP------巯基醋酸法1、原理：Fe3++6SCN–稀HCl2、检查法：、检查法：[Fe(SCN)6]3-（红色，比色）目前九十二页\总数一百二十六页\编于二十三点（2）酸及酸度：稀HCl，稀HCl4ml/50ml为宜。在中性或碱性液中，Fe3+可水解生成棕色的水合羟基铁离子或红棕色的Fe(OH)3沉淀，故反应应在酸性液中进行。由于HNO3有强氧化性，可能使SCN–被破坏，且HNO3中含有HNO2，能与SCN–生成红色化合物（NOSCN），故不能选用HNO3。3、反应条件：（1）供试品取样量：目视比色[Fe3+]以10-50ug/50ml为宜，相当于10ugFe3+/ml的硫酸铁铵标准液1-5ml，色泽梯度明显。目前九十三页\总数一百二十六页\编于二十三点HNO3:必须加热煮沸除去NO，因HNO2可能与SCN–生成红色化合物（NOSCN）。（3）加入氧化剂：使Fe2+Fe3+

过硫酸铵：2Fe2++（NH4)2S2O8HCl2Fe3++（NH4)2SO4SO42-+注意:具环状结构的有机药物，需经700～800℃炽灼破坏处理后再依法检查目前九十四页\总数一百二十六页\编于二十三点4、注意：若供试管与对照管色调不一致，或所呈颜色较浅不便比较时：硫氰酸铁配离子在正丁醇等有机溶剂中溶解度大。目前九十五页\总数一百二十六页\编于二十三点四、重金属（HeavyMetals）的检查重金属：在规定条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠显色的金属，如Ag、Hg、Pb、Cd、Bi、As、Zn、Co、Ni、Cu、Sb、Sn等。其中以Pb最为普遍，故以Pb为代表。如第一法第四法重金属含量低的药物(2～5μg)第三法使用范围微孔滤膜法硫化钠法溶于碱性水溶液而难于溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物如磺胺类方法硫代乙酰胺法溶于水、稀酸、乙醇的药物炽灼后的硫代乙酰胺法含芳环、杂环以及难溶于水、稀酸、乙醇的药物第二法ChPChP（2005年版及以前）收载如苯佐卡因、甲硝唑目前九十六页\总数一百二十六页\编于二十三点1、第一法硫代乙酰胺法

适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物

（1）原理：

Pb2++H2SpH=3.5PbS（黄色→棕黑色）H2S：原来采用FeS+HClH2S从ChP(90版)开始采用硫代乙酰胺pH=3.5H2SCH3CONH2硫代乙酰胺优点：无恶臭，浓度易控制。H2O目前九十七页\总数一百二十六页\编于二十三点（2）

方法：

甲管乙管丙管标准铅溶液供试品溶液25ml与乙管同量供试品醋酸盐缓冲溶液（pH3.5，2ml）标准铅溶液溶剂溶解硫代乙酰胺试液2ml比较颜色丙管颜色不浅于甲管时，乙管中颜色与甲管比较，不得更深。丙管颜色浅于甲管时，取样按第二法重新检查。目前九十八页\总数一百二十六页\编于二十三点目前九十九页\总数一百二十六页\编于二十三点葡萄糖中重金属的检查：样4.0g溶于23ml水，加入2ml缓冲盐，依法检查，其重金属不得超过百万分之五，取标准铅（10μg/ml），v=?C=10μg/mlL=510-6S=4.0g

V=2.0ml

例：目前一百页\总数一百二十六页\编于二十三点

注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。

1.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液；2.内消色法。3.改用第四法，微孔滤膜过滤法。

目前一百零一页\总数一百二十六页\编于二十三点C垫圈(外径10mm,内径6mm)

D滤膜(直径10mm,孔径3.0µm)E辅助滤板CDABFE滤器下部滤器上盖连接头

微孔滤膜过滤法检查重金属装置目前一百零二页\总数一百二十六页\编于二十三点2、第二法炽灼后的硫代乙酰胺法供试品（固体）蒸干HNO3蒸干HCl金属氯化物水浴蒸除HCl残渣炽灼残渣残渣0.5ml2ml调pH值对酚酞显中性氨试液醋酸盐缓冲溶液（pH3.5，2ml）蒸发至干残渣甲管：乙管配制供试品溶液的试剂醋酸盐缓冲溶液（pH3.5，2ml）加水稀释成25ml微热溶解微热溶解水15ml标准铅溶液甲管硫代乙酰胺试液2ml比较颜色乙管颜色与甲管比较，不得更深乙管：如：苯佐卡因，甲硝唑等加水稀释成25ml目前一百零三页\总数一百二十六页\编于二十三点3、第三法硫化钠法

适合于溶于碱、不溶于稀酸的药物如：磺胺类，巴比妥类等药物供试品Na2SNaOH显色5ml5滴目前一百零四页\总数一百二十六页\编于二十三点（1）适合的酸碱度：

硫代乙酰胺：pH3.5醋酸-醋酸钠缓冲液

硫化钠：碱性(2)适合的比色浓度：含Pb10~20μg/35ml，

相当于标准铅液1-2ml。(3)比色方法：白色背景。注意：目前一百零五页\总数一百二十六页\编于二十三点五、砷盐

(arsenic)国内外常用方法：ChP、JP:古蔡氏法、二乙基二硫代氨基甲酸银法

BP:古蔡氏法、次磷酸法

USP:二乙基二硫代氨基甲酸银法

第一法古蔡氏法Gutzeit第二法Ag-DDC法白田道夫法Bettendorff目前一百零六页\总数一百二十六页\编于二十三点目前一百零七页\总数一百二十六页\编于二十三点各试剂的作用：H2：由Zn+浓HCl制备，与三价砷生成AsH3气体。

酸性SnCl2作用：As5+As3+KI被氧化生成的I2转变为I-，并与Zn2+形成稳定的配位化合物，有利于砷化氢气体的不断生成。在锌粒表面形成Zn—Sn齐，使氢气均匀发生。抑制Sb的干扰。目前一百零八页\总数一百二十六页\编于二十三点H2S+Pb(AC)22HAC+PbSHgS+H2SHgBr2+2HBrKI作用：As5+As3+

。被氧化生成的I2转变为I-，并与Zn2+形成稳定的

配位化合物，有利于砷化氢气体的不断生成。抑制Sb的干扰。醋酸铅棉花作用：除去硫化物的干扰。目前一百零九页\总数一百二十六页\编于二十三点AsH3发生瓶HClZn粒碘化钾试液酸性氯化亚锡试液8cm有孔玻璃旋塞导气管溴化汞试纸醋酸铅棉花(60mg)生成砷斑吸收硫化氢气体（2）装置目前一百一十页\总数一百二十六页\编于二十三点注意事项

砷斑不稳定，应干燥、避光、立即比较。有机结合态的砷应破坏后检查（加酸或碱），但温度应低于600C。供试品若为铁盐，能消耗碘化钾和氯化亚锡，可加酸性氯化亚锡，使高铁离子还原后检查。供试品（硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐）若在酸性条件下生成硫化氢或二氧化硫，与溴化汞试纸作用生成黑色硫化汞和金属汞，可先用硝酸处理，使其氧化为硫酸盐。锑盐含量较多时，可改用白田道夫（Bettendorff）法检查砷目前一百一十一页\总数一