微生物课件细菌各论版

2004级兽医微生物学

郭霄峰兽医学院微生物教研室第八章革兰氏阳性球菌

第一节葡萄球菌属（Staphylococcus）一、属的特征：

1、空气、饲料、饮水、地面及物体表面。人及畜禽的皮肤、粘膜、肠道、呼吸道及乳腺中也有。2、致病性葡萄球菌常引起各种化脓性疾患，账血症或脓毒账血症。当污染食品时，可引起食物中毒。3、革兰氏阳性。圆形、无芽胞、无鞭毛，有的可形成荚膜或粘液层。4、需氧或兼性厌氧，可在普通培养基中生长，但不能在麦康盖培养基中生长。最适温度35—40℃，最适pH为7.0-7.5。5、致病性菌株多能产生脂溶性的黄色或柠檬色，不着染培养基。6：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。二、金黄色葡萄球菌（

Staphylococcus

aureus）1、形态、培养及生化特征：（1）革兰氏阳性。圆形、无芽胞、无鞭毛。但在脓汁、乳汁、液体培养基中呈双球或短链排列。（2）普通琼脂平板：光滑、湿润、隆起的圆形菌落，金黄色、黄色或柠檬色。致牛乳腺炎的菌多为深黄色。血液琼脂平板：菌落大、致病菌多呈明显β溶血。普通肉汤：浑蚀、沉淀。2、致病性及毒力因子：（1）引起化脓和中毒。（2）毒力因子：α溶血素（坏疽性乳腺炎）、肠毒素（人食物中毒）、凝固酶（致病菌的重要毒力因子）、耐热核酸酶（致病菌的重要毒力因子）。3、微生物学诊断：（1）涂片、染色、镜检：（2）分离培养鉴定：致病菌的特点：菌落金黄色，呈β溶血，凝固酶、耐热核酸酶阳性，分解甘露醇，皮下接种家兔后24H致局部皮肤溃疡坏死。第二节链球菌属（streptococcus）一、属的特性：1、空气、饲料、饮水、地面及物体表面。人及畜禽的皮肤、粘膜、肠道、呼吸道、泌尿生殖道及乳腺中也有。2、部分是人和动物的正常菌群，有的可致病，引起化脓、肺炎、乳腺炎、账血症。3、分类：依表面蛋白抗原，分为从个型，其中II型为人猪致病菌。4、链状、圆形、G+、有些有荚膜。致病性链球菌链较长。5、兼性厌氧，最适温度为37℃，pH7.4-7.6,。普通培养基生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖。菌落为灰白色、表面光滑、边缘整齐的小菌落。

α溶血：

β溶血：

γ溶血：二、无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌：1、培养特点：无乳链球菌呈α或β溶血；停乳链球菌和乳房链球菌呈微弱的α溶血。2、致病性：引起牛、羊的急性和慢性乳腺炎。乳房链球菌还能引起婴儿账血症、脑膜炎和肺炎。3、微生物学诊断：（1）涂片、染色、镜检：（2）分离培养：用叠氮钠血平板。3、CAMP试验：血平板上先接种一条金黄色葡萄球菌的划线，与此线垂直接种乳汁或分离的培养物，原来不溶血或溶血不明显的无乳链球菌，在金黄色色葡萄球菌产物的存在量，呈现明显的β溶血。三、化脓链球菌：引起人的化脓性炎、猩红热、扁桃腺炎等，牛乳腺炎。四、猪链球菌1、血清型：按荚膜抗原的差异分为35个血清型，包括1－34和1/2，猪链球菌2型是其中毒力最强、最常见的一种，猪链球菌1型、7型及9型也可使猪发病死亡。2、致病性：表现败血症、脑膜炎、关节炎、心内膜炎、肺炎和突然死亡。猪链球菌2型在猪群中通常通过口鼻感染，在扁桃体中增值，还可存在于母猪的子宫或阴道中，携带猪链球菌2型的猪只对其它猪具有传染性。猪链球菌2型可通过伤口感染人，致人败血症、脑膜炎和心内膜炎，从事养猪、屠宰加工及与猪肉有密切接触的人群是高危人群。3、我国于1991年在广东省首次证实该病的存在；1998年和1999年夏季分别在江苏部分地区猪群中爆发，并导致特定人群的25人感染，致死1人；2005年夏季，在四川省资阳、内江等8地市21个县市区爆发，致死猪只647头，感染发病人数为204，其中致死38人。4、微生物学诊断：（1）取样：（2）样品的处理：将猪链球菌接种于高葡萄糖肉汤培养基中，37℃培养6h。取培养液1mL，12000r/min离心3min，去掉上清。用200µL灭菌双蒸水充分重悬菌泥，100℃煮沸15min，再12000r/min离心5min，收集上清。上清即可以作为模板进行PCR扩增。（3）PCR：在1个PCR管中依次加入10×Buffer2.5µL，2mmol/LdNTP5µL，epf-1、epf-2各0.2µL，cps2J-1、cps2J-2、mrp-1、mrp-2各0.3µL，Taq酶0.3µL，模板1µL，补双蒸水至25µL。94℃预变性2min，94℃50s，53℃40s，72℃50s，运行30个循环，最后延伸8min。取5µLPCR产物，于1%琼脂糖凝胶电泳，在紫外灯下观察。cps2J-230bpepf-570bpMrp-860bp第九章肠杆菌科第一节埃希氏菌属（Escherichia）本属共有五个种，最重要的是大肠埃希氏菌（Ecoli）。一、形态及染色特征：革兰氏阴性无芽胞杆菌。大部分有周鞭毛和菌毛。直杆状，两端稍园。单在或成双排列。

二、培养特性：本菌为兼性厌氧菌。最适生长温度为37℃，最适pH为7.2-7.4.1、普通培养基：中生长良好。隆起、光滑，整齐，灰白色。

2、肉汤：浑浊，粘性沉淀，管壁有菌环。3、麦康盖培养基：红色菌落。4、伊红美兰鉴别培养基：黑色带金属光泽的菌落。5、血平板：β溶血(致病菌株)。三、生化特性：大肠杆菌能分解多种碳水化合物产酸产气。大多数菌株可发酵乳糖。乳糖蔗糖H2S尿素吲哚MRV枸椽酸盐+___++_

四、抗原及血清型：1、O抗原：菌体抗原，有173种。121℃不破坏其抗原性，可用单因子抗O血清做凝集以鉴定。2、K抗原：菌体表面的一种热不稳定抗原，位于被膜或荚膜中。有K的不被抗O血清凝集。分为L、A、B三型，共80种。3、H抗原：热不稳。抗原结构式:O:K:H五、致病性：1、产肠毒素大肠杆菌（ETEC）：毒力因子主要是粘附素和肠毒素。引起动物腹泻。2、肠产毒性大肠杆菌（EnterotoxigenicE.coli,ETEC）：引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性，一般2～3天即愈。营养不良者可达数周，也可反复发作。致病因素是LT或ST，或两者同时致病。有些菌株具有定居因子，常见者为O6：K15：H16、O25：K7：H42。鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素，血清型有一定参考意义。3、产类志贺毒素大肠杆菌（SLTEC）：主要毒力因子是粘附性菌毛和类志贺毒素，引起猪水肿和人的出血性肠炎。4、肠致病性大肠杆菌：是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死；成人少见。细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。切片标本中可见细菌粘附于绒毛，导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损，造成严重腹泻。EPEC不产生LT或ST。有人报道，EPEC可产生一种由噬菌体编码的肠毒素，因对Vero细胞（绿猴肾传代细胞）有毒性，故称VT毒素。VT毒素的结构、作用与志贺氏毒素相似，具有神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。鉴定EPEC可根据临床表现与血清型。5、败血性大肠杆菌：6、尿道致病性大肠杆菌：六、微生物学诊断：涂片、染色、镜检分离培养、纯化生化试验、血清学

病料粪便或肠内容物血、肠淋巴结或其它病变组织麦康凯或伊红美蓝血琼脂和麦康凯三糖铁琼脂生化猪水肿病株血清型ETEC毒力因子SLT-2e粘附素培养基CAYE培养基粘附素抗原定型肠毒素定型七、防治：1、抗粘附素全价或亚单位苗2、类毒素苗或LT-B亚单位苗3、基因工程苗4、抗血清5、抗菌药大肠杆菌O157：H7Reley(1982)报道了两起在美国爆发流行的出血性肠炎,首次分离到大肠杆菌O157：H7（E.coliO157:H7）。800bp、568bp、480bp、366bp、177bp的片段，fliC、rfbE、eaeA、slt-II、slt-I基因

第二节沙门氏菌属（Salmonella）一、形态及染色特征：革兰氏阴性，无芽胞，周鞭毛。呈直杆状。二、培养特性：与E.coli相似。只有鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒在普通培养基上生长较差。大部分不利用乳糖。培养基中加入硫代硫酸钠、胱氨酸、血清等可提高其生长效率。三、抗原及变异：沙门氏菌具有O、H、K和菌毛四种抗原。1、O抗原：细胞表面的耐热多糖抗原，每个菌株均有。A、B、C、---51个O群。2、H抗原：I相为特异相，为一部分血清型所有。II相为非特异相。常发生双相变异。3、K抗原：Vi抗原。沙门氏菌的抗原式：O：H1：H2四、致病性：主要引起败血症、胃肠炎、局部炎症。人中毒。食物中毒者最常见的症状是剧烈的呕吐、腹泻，同时伴有中上腹部疼痛。食物中毒者常会因上吐下泻而出现脱水症状，如口干、眼窝下陷、皮肤弹性消失、肢体冰凉、脉搏细弱、血压降低等、最后可致休克。五、微生物学诊断：病料未污染者污染者鉴别培养基增菌培养基三糖铁和尿素培养基生化鉴定A-F群多价O血清六、防制：1、疫苗2、净化3、药物

第三节鼠疫耶尔森菌(Yersiniapestis)一、形态与染色特性：革兰氏阴性，菌体呈球杆状。固体培养基培养，菌体为卵圆形或短杆状，散在或群集。肉汤中培养，细菌排成短链状。二、培养特性：兼性厌氧菌。最适生长温度为28-30℃，最适pH为7.2-7.4。1、普通琼脂培养基：生长贫瘠。菌落呈半透明、奶油状，光滑湿润。2、肉汤培养基：液体清亮，液面有菌膜。4-5天后形成长丝状下垂生长物。三、抗原性：18种O抗原。还有V抗原、FI、W和MT抗原。四、致病性：鼠疫是由鼠疫杆菌所致的烈性传染病，病死率30%～100%，《中华人民共和国传染病防治法》列为甲类传染病。历史上记载过三次鼠疫的世界性大流行，第一次发生在公元6世纪，几乎遍及全世界。第二次发生于14世纪，当时称为“黑死病”，波及整个欧洲、亚洲和非洲北部。第三次发生于1894年，于1900年流传到32个国家。自1940年后，较小范围的流行仍在世界上不断发生。

日本侵略中国期间，曾用鼠疫残害中国人民．细菌鼠腺型鼠疫疫蚤人腺型鼠疫败血型鼠疫肺鼠疫人感染后，死者皮下严重充血、出血，大量血红蛋白转为含铁血红素，致使皮肤变黑紫色，故又称为“黑死病”病。五、微生物学诊断：1、病料的采取2、分离培养3、鉴定病料4-25℃增菌直接分离接种实验动物，从死者肝、脾、淋巴结中接血琼脂

已污染未污染麦康凯或SS琼脂脑心浸出液或血琼脂可疑菌落纯培养生化试验

血清学鉴定毒力菌株鉴定第十章弧菌科（Vibrionaceae）

第一节副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)一、形态及染色特性：弧状、杆状或丝状。端鞭毛。革兰氏阴性。二、培养特性：1、血琼脂：在绵羊血平板上生长旺盛，但不溶血。2、TCBS琼脂：菌落绿色。甘露醇赖氨酸脱羧酶精氨酸双水解酶Na+++-高盐7.5%NaCl三、致病性：本菌存在于海产品中，人类食用污染本菌的鱼、贝类等引致食物中毒。主要由溶血素和磷酸脂酶A2引起。中毒者主要表现为水样腹泻、呕吐及发热。四、微生物学诊断：病人粪便或可疑食品接种嗜盐菌选择培养基或SS平板，取可疑菌作生化试验和神奈川试验。三、生化特性：第十一章巴氏杆菌科第一节巴氏杆菌一、形态及染色特性：G-球杆菌，来自组织的细菌以美蓝染色为两级浓染。无鞭毛、无芽胞。新分离的强毒株有荚膜。二、培养特性：需氧或兼性厌氧。1、普通培养基：生长贫瘠。2、血清或血液培养基：生长旺盛。淡灰白色、闪光的露珠样小菌落。不溶血。3、在麦康盖培养基：不生长。4、肉汤培养基：液体清朗，管底有粘稠的沉淀。三、生化特性：四、血清型：依荚膜抗原可分成6个血清型。依菌体抗原可分为16个型。我国家禽为5：A（菌体：荚膜），8：A；猪为5：A，6：B；兔为7：A，5：A。五、致病性主要引起败血症。六、微生物学诊断：1、取材：心、肝、脾、肺、肾、血液。2、涂片、镜检：3、分离培养：4、生化试验：5、动物试验：七、防治：1、疫苗2、血清3、抗菌药第二节鸭疫里(巴)氏杆菌(Riemerella)一、形态及染色特征：G-短杆菌，个别呈长丝状，多为单个，少数成双或短链，两级浓染。可形成荚膜，无芽胞、无鞭毛。二、培养特性：需氧或兼性厌氧。初次培养需5-10%CO2。1、普通培养基：生长贫瘠。2、巧克力或胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）：生长旺盛。光滑型奶油状小菌落。3、在麦康盖培养基：不生长。4、血清或胰蛋白胨的肉汤：轻微混浊，管底有少量沉淀。三、生化特性：巴氏杆菌与里氏杆菌生化特性比较葡萄糖蔗糖果糖甘露醇半乳糖靛基质巴氏杆菌++++++里氏杆菌------四、血清型：共有21个血清型，我国主要为I型。据报道，也有II型。五、抵抗力：与巴氏杆菌一样，4℃保存易死亡。六、致病性：主要感染2-3周的雏鸭。引起急性或慢性败血症和浆膜炎。七、微生物学诊断：1、涂片、染色、镜检2、分离、培养、纯化：取发病鸭的脑和心，接种巧克力培养基。3、生化鉴定4、血清学鉴定5、动物试验：豚鼠八、免疫：灭活菌苗和弱毒苗

第三节放线杆菌属（Actinobacillus）一、猪胸膜肺炎放线杆菌（A.pleuropneumoniae）（一）染色特征：G-球杆菌，组织涂片两级浓染。（二）养特性：兼性厌氧。初次培养需5-10%CO2，最适生长温度为37

℃。1、普通培养基：生长贫瘠。2、巧克力：生长旺盛。3、绵羊鲜血琼脂：β溶血，金色葡萄球菌可增强其溶血。4、麦康盖琼脂：不生长（与巴氏同）。（三）生化特性：产生脲酶、分解蔗糖。（四）血清型：14个型，1型的毒力最强，102个细菌可使猪发病，105可致猪死亡。我国为2、3、5、7、8型。（五）抵抗力：不强（与巴氏相同）。（六）致病性：主要引起猪的胸膜肺炎。（七）微生物学诊断：1、取材：肺、胸水、鼻及气管渗出物。2、涂片、染色、镜检3、分离、培养、纯化4、生化鉴定。5、血清学鉴定。6、动物试验。（八）免疫：灭活菌苗免疫母猪。净化。青霉素。

第四节嗜血杆菌(Haemophilus)嗜血杆菌是一群酶系统不完全的革兰氏阴性杆菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是X因子和V因子。一、形态与染色特性：短杆状，杆状或长丝状。无鞭毛、无芽胞。有荚膜，两极浓染。二、培养特性：需氧或兼性厌氧。最适温度37℃，pH7.6-7.8。初次分离需5-10%CO2，同时需提供X因子和V因子。在巧克力琼脂上，菌落为圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明小菌落。三、致病性：可致人和动物的多种疾病。毒力因子是荚膜、菌毛、内毒素。1、流感嗜血杆菌：人的呼吸道感染。2、副猪嗜血杆菌：引起猪的格氏病，主要表现为心肌炎、腹膜炎、胸膜炎、脑膜炎及关节炎。与猪流感联合引起流感。3、副禽嗜血杆菌：鸡鼻炎、打喷嚏、面部水肿、产蛋下降。四、微生物学诊断：1、取材：脑、血液、分泌物。2、染色、涂片、镜检：两极浓染3、分离培养：巧克力琼脂或鲜血琼脂，5-10%CO2。血琼脂平板上生长贫瘠。4、V因子金色葡萄球菌嗜血杆菌“卫星现象”第十二章革兰氏阴性需氧杆菌第一节布氏杆菌(Brucella)一、形态及染色特征：短杆、G-、鉴别染色法染成红色。不形成芽胞和荚膜。二、培养特性：专性需氧，但初次分离需5%-10%CO2。最适温度37℃，pH6.6-7.41、普通培养基，生长不良。2、肝汤琼脂：圆形、光滑、湿润、初无色、后带灰白或灰菌3、液体培养基：初浑浊久粘稠沉淀。三、种和生物型：马尔他布氏杆菌、流产布氏杆菌、猪布氏杆菌、绵羊布氏杆菌、沙林鼠布氏杆菌、犬布氏杆菌6个种，20个血清型。四、致病性：毒素为内毒素。五、微生物学诊断：1、细菌学检查（显微镜检查、分离培养、动物试验）2、血清学检查变态反应六、防治：疫苗第二节支气管败血波氏菌一、形态与染色特性：细小球杆状，无芽胞，周鞭毛。革兰氏阴性、两极浓染。二、培养特性：1、普通琼脂：生长良好。2、波-让氏琼脂：I相菌落----呈珍珠状或半圆状、乳白色，光滑致蜜，β溶血。多次传代后变异成II相或III相----灰白色，扁平、光滑、质地稀软、不溶血。3、蛋白胨琼脂：灰白、透明、光滑、边缘整齐、革兰氏染色I相菌，周生菌毛，无鞭毛，毒力强。III相菌，无荚膜和菌毛，有周鞭毛,毒力弱。I相菌的菌落微隆。4、麦康凯琼脂：菌落微红色，周围有小红圈。三、致病性：1、猪萎缩性鼻炎2、犬传染性支气管炎四、微生物学诊断：1、细菌学检查：2、动物试验：3、血清学检查：第三节军团菌(Legionella)一、形态及染色特性：杆状或长丝状，无芽胞和荚膜，端生鞭毛。二、培养特性：需氧，2.5%CO2。在C活性炭酵母浸液琼（CYE）中：需培养3-5天，菌落为雕花玻璃状。在缓冲活性炭酵母浸液琼脂（BCYE）中，针尖大小的菌落，园形、灰色。三、抗原性：具O抗原和H抗原。依O抗原的不同可分为多个血清型。在BCYE培养的菌落四、致病性人和多种动物均可感染。人表现为急性呼吸道传染病。五、诊断1、取材：肺、胸腔液等。2、分离培养：CYE和BCYE3、鉴定：对细菌作免疫荧光染色。第十一章革兰氏阴性厌氧和微需氧无芽胞杆菌第一节弯曲菌属(Campglobacter)一、空肠弯曲菌（C.jejuni）1、形态及染色特征：螺旋状弯曲杆菌，呈弧状或豆点状，G-。有端鞭毛。接触空气后成球状。2、培养特性：微需氧。5%O2、10%CO2、85%N2的混合气体。42-43℃。光滑型和粗糙型二种菌落。3、分型：利用萘啶酮酸敏感试验、马尿酸钠水解试验和快速H2S产生试验，将该菌分为生物I型和II型，前者H2S阴性、后者阳性。4、致病性：引起牛、猪、犬的腹泻，绵羊流产、禽传染性肝炎。人的急性胃肠炎和食物中毒。5、微生物学诊断：6、免疫防治：尚无疫苗。二、胎儿弯曲菌(C.fetus)1、形态及染色特征：螺旋状弯曲杆菌，两端尖细。2、培养特性：微需氧。5%O2、10%CO2、85%N2的混合气体。37℃，pH7。血清或血液培养基。初次在琼脂培养基中分离，菌落为光滑型、雕花玻璃型、粗糙型或粘液型。3、生化特性：4、分型：5、抵抗力：对氧敏感。6、致病性：引起绵羊和牛的流产，也可感染人引起流产、早产、败血症。7、微生物学诊断：涂片、染色、镜检。分离培养：用特殊培养基在特殊条件下培养。生化鉴定。血清凝集试验（与布氏相似）。8、免疫：可用菌苗。第十三章革兰氏阳性无芽胞杆菌第一节单核细胞李氏杆菌(Listeriamonocytogenes)一、形态与染色特点：短杆菌，两端钝圆，多单在，有时排列成V型、短链。老龄培养物或粗糙型菌落的菌体为长丝状。G+，无荚膜、无芽胞，20-25℃条件下培养可形成4根周鞭毛，37℃至少可产生1根鞭毛。二、培养特性：需氧或兼性厌氧，生长温度为1-45℃，最适温度为30-37℃。1、普通培养基：生长良好，光滑型菌落透明、蓝灰色。2、鲜血培养基：β溶血。3、普通肉汤：轻度混浊，无菌环、无菌膜。三、生化特性：四、抵抗力：耐碱不耐酸。抗干燥能力强，在干粪中能存活2年以上。对氨苄青霉素敏感。五、血清型：具O抗原和H抗原。13个血清型。特别注意该菌与葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、链球菌及多数革兰氏阳性菌存在某些抗原交叉，故血清型诊断意义不大。六、致病性：侵害巨噬细胞，为胞内菌。犊牛和羔羊表现为败血症和肝坏死。成年牛、羊表现为神经症状，“转圈病”。孕畜流产。健康动物带菌从粪便中排出而污染环境。七、微生物学诊断：涂片、染色、镜检：分离、培养、纯化：生化：小动物试验：小白鼠八、免疫与治疗：第二节丹毒杆菌（Erysipelothrix)一、形态与染色特点：

短杆菌，两端钝圆，多单在，有时排列成V型、短链。老龄培养物或粗糙型菌落的菌体为长丝状。G+，无荚膜、无芽胞，无鞭毛。二、培养特性：需氧或兼性厌氧，生长温度为1-45℃，最适温度为30-37℃。1、普通培养基：生长不良。2、鲜血培养基：光滑、透明、露珠样小菌落，α溶血。3、普通肉汤：轻度混浊，无菌环、无菌膜。

三、生化特性：丹毒杆菌与李氏杆菌的生化特点菌名溶血型4℃生长运动性接触酶七叶苷水解VP及甲基红试验李氏杆菌β+++++丹毒杆菌α-----四、抵抗力：

耐碱不耐酸。抗干燥能力强，在干粪中能存活2年以上。对氨苄青霉素敏感。五、血清型：

具O抗原和H抗原。13个血清型。特别注意该菌与葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、链球菌及多数革兰氏阳性菌存在某些抗原交叉，故血清型诊断意义不大。六、致病性：可寄生于哺乳动物、禽和鱼类。引起3-12月猪的丹毒，羔羊关节炎，鸡下痢、鸭败血症和类丹毒。七、微生物学诊断：1、涂片、染色、镜检：2、分离、培养、纯化：3、生化：4、小动物试验：鸽子八、免疫与治疗1、疫苗：我国应用猪丹毒GC42或C4T（10）弱毒菌苗。2、抗血清3、抗菌素第十四章革兰氏阳性芽胞杆菌第一节芽胞杆菌属（Bacillus）一、炭疽芽胞杆菌（B.anthracis）1、形态及染色特征：G+链杆菌（组织中为短链，纯培养为长链），有芽胞和荚膜。

2、培养特性：需氧或厌氧。30-37℃，pH7.2-7.6。A、普通琼脂：强毒长成粗糙型菌落。B、血清或血液培养基、5%CO2可形成粘液型菌落。C、肉汤：上清透明，有白色絮状沉淀。D、明胶：成倒立的雪松状，时间稍长呈漏斗状。E、含青霉素的肉汤中：0.5U/mL呈“串珠反应”,1.0U/mL生长受到抑制。3、生化特性：4、分型：有荚膜抗原、菌体抗原、保护性抗原及芽胞抗原四种成分。5、抵抗力：60℃30-60min，常用消毒剂、常用浓度可杀死繁殖体，但芽胞的抵抗力很强。6、致病性：引起绵羊和牛的败血症。人感染后发生肠炭疽、肺炭疽和皮肤炭疽。7、微生物学诊断：（1）细菌学检查：涂片、染色、镜检。分离培养生化鉴定动物试验（2）血清学：用已知抗体检测未知抗原A、Ascolis氏沉淀反应B、串珠荧光试验8、免疫防治：菌苗、血清和抗菌素。炭疽杆菌与其它需氧芽胞杆菌的鉴别鉴别项目炭疽芽胞杆菌蜡状芽胞杆菌菌落粗糙、边缘不整齐蜡样光泽、波纹状荚膜形成+-肉汤生长絮状沉淀、上层清、无菌膜均匀混浊、颗粒沉淀、有菌膜溶血反应不溶解或微溶Β溶血动力-+串珠试验+-青酶霉素抑制+-Γ噬菌体裂解+-碳酸氢钠琼脂M型菌落R型对豚鼠致病力+-Ascolis反应强阳性阴性或阳性二、蜡状芽胞杆菌（B.cereus）第二节梭菌属(Clostridium)一、产气荚膜梭菌（魏氏梭菌）(Cl.perfringens)1、形态及染色特性：菌体直杆状，两端钝园，单在或成双。革兰氏阳性。无鞭毛。芽胞位于菌体中央，使菌体膨胀成梭状。多数有荚膜。2、培养特性：厌氧生长，A、D、E型最适温度为45℃，B和C型37℃-45℃，世代时间是8min。A、普通琼脂：可生长。B、绵羊血琼脂平板：菌落边缘整齐、灰色至灰黄色、表面光滑半透明、园屋顶状。有时呈叶状或丝状边缘。溶血，双溶血环，内环由θ毒素引起的完全溶血，外环由α毒素引起的不完全溶血。3、生化特性：发酵牛乳培养基，“暴烈发酵”。4、抵抗力：5、抗原性：根据致死性毒素，可分为A、B、C、D、E五个型。6、致病性：A型引起人气性坏疽和食物中毒。B型引起羔羊痢疾和其他动物的肠毒血症。C型引起羊猝疽。D、E型引起动物的肠毒血症。7、微生物学诊断：A、人中毒：作细菌的分离鉴定。B、动物的发病主要由细菌在肠道内产生的肠毒素引起，因此要进行毒素的中和试验。回肠内容物上清60℃30min不加热家兔或小鼠家兔或小鼠不死死亡回肠内容物上清+抗毒素静脉接种小鼠或兔子结果8、免疫防治：三联菌苗或五联菌苗。二、肉毒梭菌（Cl.botulinum)1、形态及染色特性：菌体直杆状，两端钝园，单在或成双。革兰氏阳性。周鞭毛。芽胞位于菌体近端，使菌体膨胀成球拍状。2、培养特性：专性厌氧生长。生长温度为30-37℃，但产毒素的温度为25-30℃。A、普通琼脂：可生长。B、绵羊血琼脂平板：菌落为园形扇状、裂叶状或根状边缘。扁平或隆起，透明或半透明，灰色至灰白色。β溶血。3、生化特性：变化较大，同一型不同菌株间不同。4、抗原性：根据毒素的不同，可分为A、B、C、D、E、F、G7个型。5、致病性：A、B、E、F引起人食物中毒。A、B引起马、牛、水貂中毒。C引起禽、马、牛等中毒。6、微生物学诊断：主要作毒素检查：材料+1/1010%胰酶37℃60min腹腔接种小鼠，若有毒素，24H内发病小鼠主要表现为坚毛、四肢瘫痪、呼吸困难、呼吸呈风箱式，腰部凹陷，宛如蜂腰，最终死于呼吸麻痹。毒素中和试验：三、气肿疽梭菌(Cl.chauvoei)1、形态及染色特性：菌体直杆状，两端钝园，单在或成双，在豚鼠腹腔渗出液中呈短链。革兰氏阳性。周鞭毛。芽胞位于菌体中央，使菌体膨胀成梭状或汤匙状。2、培养特性：专性厌氧生长。生长温度为37℃，pH为7.2-7.4。A、普通琼脂：生长不良。B、葡萄糖血琼脂：菌落园形，中央隆起纽扣状。β溶血。3、生化特性：4、抵抗力：5、抗原性：共同的O抗原6、致病性：6个月-2岁的牛最易感。7、微生物学诊断：细菌的分离鉴定四、破伤风梭菌(Cl.tetani)1、形态及染色特征：G+杆菌、两端钝圆、细长、正直或略弯曲。单在或成双。有鞭毛能运动。有芽胞，偏端而成球拍状。2、培养特性：厌氧。37℃，pH7.0-7.5。（1）普通琼脂上：生长旺盛。（2）血清或血液培养基：β溶血。3、生化特性：4、分型：10个血清型，我国为V型。各型均能产生外毒素，并只能被相应的血清中和。5、抵抗力：芽胞的抵抗力很强。6、致病性：7、微生物学诊断：一般无需作微生物学诊断。涂片、染色、镜检。动物试验（小鼠）8、免疫防治：（1）菌苗：（2）血清：第十五章分支杆菌属及相似菌属第一节分支杆菌(Mycobactreium)近年来结核病在全球范围内又死灰复燃，成为传染病的首位杀手。全世界已有1／3人口约20亿人感染了结核菌，现有结核病人2000万，每年新发病人约900万，每年死亡人数高达300万。且多种耐药病例日益增高，

一、形态与染色特点：细长、直或微弯的杆菌，单在，少数成丛。G+，抗酸性染色。不产生鞭毛、芽胞或荚膜。细胞壁含有10%左右的糖脂，抗3%盐酸酒精脱色。二、培养特性：专性需氧，生长温度为37-37.5℃，最适pH6.4-7.0。1、普通培养基：生长不良。2、罗杰二氏培养基（内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐等）：长成粗糙、隆起、不透明、边缘不整齐，颗粒、结节状、乳白色或米黄色的菌落。14-15小时分裂一次。3、肉汤：形成菌膜。三、抵抗力：抗干燥能力强；湿热抵抗力弱，62-63℃或煮沸可将其杀死。对紫外线敏感，直射日2H内可杀死该菌，对75%的酒精敏感。敏感药物有链霉素、异烟肼等，但易产生耐药性。五、血清型：分为结核分支杆菌、牛分支杆菌和禽分支杆菌。六、致病性：被巨噬细胞吞噬后不被消化降解，细菌在胞内繁殖，形成病灶，产生干酪样坏死。致病对象结核分枝杆菌牛分枝杆菌禽分枝杆菌绵羊和山羊_+++猪++++马-++++犬++++-猫-++-家兔++++-豚鼠++++-小鼠++++++田鼠+++-家禽--++鹦武类++--七、变异：易产生耐药性变异和毒力的变异。八、免疫与变态反应：机体主要产生细胞免疫。还产生迟发性变态反应。九、微生物学诊断：1、涂片、染色、镜检：2、分离、培养、纯化：病料用6%H2SO4或4%NaOH处理15min，每份病料接种4-6支管，培养8周。3、变态反应：用PPD4、血清学：ELISA5、PCR：十、免疫与治疗：结核病的免疫是带菌免疫。人可用卡介苗。但在动物，为防止对检疫的干扰，一般不作免疫。第二节副结核分枝杆菌(M.paraenberculosis)一、形态及染色特征：短杆状，无芽胞、无鞭毛、无荚膜。病料中成丛排列。革兰氏阳性、抗酸性阳性。二、培养特性：需氧，最适温度37.5℃，最适Ph6.8-7.2。生长缓慢，初代分离及困难，需在培养基中添加分支杆菌抽提物，一般需6-8周，或6个月。三、抵抗力四、致病性五、微生物学诊断第三节牛放线菌(Actinomycesbovis)一、形态及染色特性：从培养基中来的细菌呈杆状或棒状，可形成Y、V或T型排列的无隔菌丝。来自病料的细菌，呈菊花状，革兰氏染色中央为阳性、周围呈阴性。二、培养特性：初代分离需厌氧。培养基中加入甘油、血清或葡萄糖，生长更旺盛。在血琼中的菌落半透明、乳白色、不溶血、粗糙。三、致病性：主要感染牛、猪、马、羊。四、微生物学诊断：病料加5%KOH，盖上玻片。或作革兰氏染色镜检第十六章螺旋体(Spirochaeta)第一节概述一、形态：呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有多个完整的螺旋。二、结构：中心为原生质柱细胞膜2-100根轴丝外鞘（细胞壁和粘液层）三、染色方法：革兰氏染色：大部分不着色。姬姆萨染色：红色或蓝色。镀银染色：黑褐色。印度墨汁或刚果红：透明无色。暗视野:四、运动方式：在暗视野显微镜下观察，螺旋体浮游于组织中，有三种特征性的运动方式：①旋转式，依靠自己的长轴旋转，向前后移动，这是侵入人体的主要方式；②伸缩螺旋间距离活动，不断地拉长身体，使一端附着，再收缩旋距而前进；③蛇行式，弯曲，像蛇爬行。五、培养特性：多数厌氧，有的需血液、腹水或其它特殊成份。

六、分裂方式：二等分裂。七、分类：螺旋体目螺旋体科螺旋体属密螺旋体属蔬螺旋体属脊螺旋体属细螺旋体科细螺旋体属第二节疏螺旋体属（Borrelia）一、伯氏疏螺旋体（B.burgadorferi）是莱姆病(Lyme)病原,感染人、犬、牛、马等动物，致关节炎等多种疾病。伯氏疏螺旋体有数种基因型，已证实验我国至少有3种。1、生物学特性：菌体长20-30μM，直径0.2μM，有2-40个大而宽疏的螺旋，鞭毛缠绕菌体。致病性的疏螺旋体都能结合血小板，而且这种结合是由整合素介导。2、致病性：

伯氏疏螺旋体致人、犬、牛和马的关节炎，病人常出现的第一个病症是叮咬部位呈圆环状疹块。犬表现为游走性关节炎。硬蜱吸吮后数年内具传染3、微生物学检查：显微镜检查：用暗视野显微镜或姬姆萨染色等可观察到疏螺旋体。分离培养：用改良的Kelley氏培养基。血清学：ELISA，犬在感染4周后可检测出抗体，3个月后达高峰。分子生物学方法：PCR、核酸杂交。4、防治：药物：强力霉素、阿膜西林。疫苗：灭活疫苗、亚单位疫苗。二、鹅疏螺旋体（B.anserine）引起禽类的急性、败血性疏螺旋体病。中国1983年发现有该病。1、形态及染色特性：菌体长8-20μM，直径0.2μM。瑞氏染色呈紫兰色，碱性复红呈紫红色。2、培养特性：微需氧。普通培养基中不生长，但在凝固鸡蛋蛋白及马或鸡灭活血清培养基上，或以5倍量5%蛋白胨水和少量红细胞裂解液稀释的兔血清培养基上，或在含正常鸡血清的肝素培养基上生长。3、抵抗力：56℃15min可灭活。常用的化学消毒剂常用的浓度均可在5分钟内将其杀死。对多种抗生素不敏感。4、血清型：国内只有一个血清型。5、致病性：

经蜱传染，致禽类败血症。可感染鸡、鸭、鹅、火鸡及多种鸟类。病禽感染后体温升高、拒食、腹泻、贫血，死亡率高。6、微生物学诊断：镜检：高温期采血作血涂片。分离培养：血清学试验：琼脂扩散、凝集试验、间接免疫荧光。7、防治：药物：土霉素口服。疫苗：灭活疫苗第三节蛇形螺旋体属（Serpulina）猪痢疾蛇形螺旋体一、形态与染色特性：二、培养特性：

严格厌氧。培养基需预先还原，并置于一个大气压的H2和CO2的混合气体以及冷钯为触媒的环境中才能生长。培养基中应含有10%胎牛血清或血液的TSB或BHIB液体或固体培养基。在血液培养基中，38℃培养48-96min可形成扁平、半透明、针尖状、强β溶血性菌落。三、血清型：用琼脂扩散，可将其分为8个血清型。四、致病性：主要引起8-14周龄的猪发生血性下痢。五、微生物学检查：1、镜检：以病猪的新鲜粪便或表面粘液、或病变结肠粘膜或肠内容物直接制成涂片，以姬姆萨法染色。相差或暗视野检查：组织切片：2、培养：3、致病力鉴定：动物感染试验：将待检菌株的新鲜培养物制成悬液，给10-12周龄的仔猪灌服，连续2天，每天1次，每次灌服50ml/头。若猪在接种后30d以内有一半下痢和产生肠道病变，即可证明其有致病力。猪结肠结扎试验：六、防治：无疫苗，应净化猪群。第四节细螺旋体属（Leptospira）细螺旋体属成员是一大类菌体纤细、螺旋致密，一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体，故常称其为钩端螺旋体或钩体。其大部分营腐生生活，广泛分布于自然界，尤其存在于各种水生环境中。一部分为寄生性或致病性的螺旋体，可引起人和动物的细螺旋体病。一、形态结构与染色特性：

呈纤细的圆柱形，长6-20μM，直经0.1-0.2μM。在暗视野检查时，常形成串珠状结构，菌体一端或两端弯曲成钩。革兰氏染色阴性，但较难着色。姬姆萨染色可着色，但效果欠佳。镀银染色和刚果红染色较好。暗视野显微镜下可见其运动。二、培养特性：需氧，对营养要求不高。在含动物血清和蛋白胨的柯氏（Korthof）培养基中生长良好。最适pH7.2-7.4,最适生长温度是28℃-30℃,生长时间为2天-4周。在固体培养基中：长成无色、透明、边缘整齐、平贴于琼脂表面的菲薄菌落。在液体培养基中：半透明，云雾状混浊。三、生化特性：不发酵糖类，不分解蛋白质，氧化酶和过氧化酶为阴性。四、抵抗力：在中性的湿土和水中可存活数月，45℃30min，50℃min，60℃10min即可致死。4℃冰霜可存活2周。直射阳光和干燥可将其致死。常用消毒剂、常用浓度可将其灭活。对青霉素、金霉素和四环素敏感。五、致病性：六、微生物学诊断：镜检：直接镜检染色镜检分离培养：血清学检查：七、免疫：可用疫苗第十七章霉形体（Mycoplasma）第一节概述一、形态与染色特征：

霉形体细胞外围只有一层胞浆膜，无细胞壁。细胞膜分为三层，内、外层为蛋白质，中间为脂质，一种脂质含36%胆固醇、另一种脂质胆固醇含量低。具有多形性，常呈球状、环状、杆状，部分细胞还有分枝的丝状。球形细胞的直经一般为0.3-0.8μM。能通过450-220nm的滤膜。无鞭毛，但能滑动。革兰氏染色阴性，但着色不良。姬姆萨染色呈淡紫色。Mycoplasma-infectedcellcultures.Hoechst33258fluorochromestaining

二、繁殖方式：以二等分裂为主，也有出芽、分支或由球状细胞伸展成长丝，然后分节，成为许多球状和短杆状细胞。三、培养特性：大部分在有氧环境下生长，但在固体培养基分离时加入5%CO2和95%N2，生长更好。pH为7-8，适宜温度为36℃。一般培养基不生长，需牛心浸液、酵母膏、辅酶I、氨基酸等。培养基中加入醋酸铊、叠氮钠等药物可抑制杂菌的生长。在固体培养基：2-6天后，菌落为圆形、透明、露滴状。典型菌落呈“煎荷包蛋状”，菌落中心深入培养基中、致密、色暗，周围长在培养基表面、较透明。

在液体培养基：数量较少，不易见到浑浊。可在细胞培养中生长，但不引起细胞病变，可妨碍病毒的细胞培养。四、生化特性：发酵型：能分解葡萄糖及其它糖类，产酸不产气。非发酵型：不能分解糖类。五、分型：霉形体的抗原由细胞膜上的蛋白质和类脂组成，各种霉形体的抗原结构不同，交叉很少。六、抵抗力：因无细胞壁，所以对外界环境的抵抗力不强。45℃15-30min，55℃5-15min可将其杀死。常用消毒剂、常用浓度可将其杀死。但对醋酸铊、结晶紫、亚硝酸盐等有较强的抵抗力。青霉素、先锋霉素对它无效。对放线菌素D、丝裂菌素C最敏感。对四环素、强力霉素等影响蛋白质合成的抗菌素也敏感。七、致病性：病原性霉形体常定居于多种动物的呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面、乳腺及眼等。引起动物的多种传染病。八、微生物学诊断：1、直接镜检意义不大。2、分离培养：3、生理生化鉴定：4、血清学鉴定：生长抑制试验（血清置于培养基中，如同型可见抑菌圈），代谢抑制试验（血清加入含葡萄糖的液体培养基中，如同型可抑制糖的代谢）、表免疫荧光法（荧光抗体直接染于琼脂块，在入射式荧光的照射下，如同型可发出特异的荧光）。九、免疫