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文档简介

DiscoveryofVictor

FirstmiRNA-C.eleganslin-4in1993byVictorAmbros&lin-4causestemporaldecreasinginLIN-14proteinexpressedinthefirststagetolin-14".CELL(1993)lin-4(LeeRetal.let-7(Reihhartetal.2000Frank

C.SecondmiRNA-C.eleganslet-7in2000byFrankmiRNAmightbeconservativeinorganicevolution ysanroleinregulationoforganic“The21-nucleotidelet-7RNAregulatesdevelopmentaltiminginCaenorhabditiselegans”.NATUREBiogenesisofPri-miRNA:PrimarymiRNA,thewholetranscriptormiRNAgene.Usuallyseveralkilobaseslong;posses5’capandapoly-Atail.Drosha:RNAaseIII,processingpri-miRNAintopre-miRNAandleavingthe3’endwith2nucleotidesPre-miRNA:PrecursormiRNA.CleavedinthenucleusbyDrochaenzymeto70nthairpin Dicer:RNaseIII,lop theloopatloopandstemjunctinandstillleavingthe3’endwith2nucleotidesoverhanging.RISC:RNA-inducedsilencingcomplex,withtheguidingofmiRNA,RISCperformingitsdown-regulationabilitybyeithermRNAdegradationortranslationinhibition.HowmicroRNAIncytosm,miRNAisloadedintoanRNA-inducedsilencingcomplex(RISC)andbindstoArgonaute(AGO)proteinenzymepresentinthecomplex. miRNAguidesRISCtothetarget(complementaryTargetmRNAisdegradedbytheArgonauteInmliancells,miRNAtargetsitesarelocatedinthe3’-untranslatedregion(3’UTR)oftargetmRNA.Rolesof finandtranscription

StemcellNewclassofsmallRNAsinwormsFunctionsof13510692

5

Daphniapulex(43)Ixodesscapularis

aitrellapatens(230)ii(58)napus(44)oleracea(6)rapa(17)papaya(1)Glycinemax

AcyrthosiphonpisumAedesaegyptiApismelliferaBombyxmoriDrosophilasec ia(78)Drosophilasimulans(136)Locustamigratoria CionasavignyiOikopleuradioicaXenopuslaevisGallusgallusTaeniopygiaguttata(220)

Saguinuslabiatus(42)Macacamulatta(485)GorillagorillaHomosapiensPanpaniscusPantroglodytesPongopygmaeusRattusnorvegicus(286)BostaurusOvisariesFugurubripes

AnnelidaCapi lasp.I(71)MoluscaLottiagigantea(59)NemerteaHydramagnipapillata(1) lavectensis(40)Porifera iumdiscoideum(2)BK 1 2 1JC Kaposia-associatedherpes (13)Mareks Mareksdisease type2(17)Merkelcell (1)Mousecytomegalo 68Rhesuslymphocrypto (16)Rhesusmonkeyrhadino (7)Simian 40(1)Experiment ysis

Trim3’ChooselengthFulllengthcleansmallRNAGenomeGenomemapped

SmallRNAinthe

SmallRNA

Antisense&sensesmall

smallRNA

ysisRequiredknowdatabase

BasedonresearchedRfam(excludeSpecies’non-codingRNACDS&UnigenesRepeat Basedonresearched

ysisberlin.de/en/research/researchteams/systemsbiologyofgene

MarcRFriedländeretal,NatBIOTECHNOL2008,26(4):407-

ysis mireap

ysisMIREAPisatoolwhichcanbeusedtoidentifybothknownandnovelmicroRNAsfromsmallRNAlibrariesdeeplysequencedbySolexa/454/Solidtechnology DSAP:deep-sequencingsmall ysisDSAPdatainput其他miRNA预测软软物平功其无无R miRNAtarget1993年,Lee等人首先在秀丽线虫体内发现了首个miRNAlin‐4lin‐4RNA通过与 3′UTR区具 序列互补序列保守性及其它 序列互补 有miRNA 序列保守性及其它 预测较关注的还包括序列保守性、热动力学因素、位点的可结合(accessibility)和UTR碱基分布等多个因序列保守性:miRNA更可能为miRNA的靶位点热动力学因素:miRNA:target位点的可结合性(accessibility):mRNA的二级结构影响与miRNA的结合双链结构的能UTR碱基分布:miRNA结合位点在UTR样影响miRNA与 位点的结合和RISC的效率另外,诸如miRNA的分布与 组织分布的相关性也是在做 预时要考虑的重要因 microRNATarget 预测的软件种类较多,包括miRanda,EMBL,PicTar,TargetScan(S),DIANA-microT3.0,PITA,ElMMo,rna22,GenMiR++,TarBase,miRBase,miRGen- miRbase:众所周知的 microRNA的靶标的预测软件 : Tarbase:一个收集已被实验验证的microRNA靶标数据库 版 2009年1月(v5) miRecords:一个整合的microRNA 版 :2010年11月 (5)targetScan:基于靶mRNA序列的进化保守等特征搜寻动物的microRNA靶 (7)PITA:基于靶位点的可接性(target-siteaccessibility)和自由能预测 (9)miRanda和:是著名的MemorialSloan- 发的软件和数据库。miRanda 版 : 1 (17)植物miRNA Practiceon /share/hp-miRNAsequencedreads: adaptorGenomesequence:non-miRNAsequences(tRNA,rNRA,snoRNA,mRNAal):miRBase: PracticeonData P1

Readoflength35bpor

P2

Trim3’Chooselength

PerlbwaFulllengthcleansmallRNA

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