微生物基础知识培训XXXX

微生物基础知识及洁净区微生物控制

(201.02.28)一、微生物简介二、微生物的分布三、微生物的作用及危害四、微生物的形态结构五、微生物污染及消毒灭菌六、洁净区微生物的控制一、微生物简介1、微生物的定义（microorganism,microbe）:微生物是存在于自然界中的个体微小，结构简单、肉眼看不见，必须借助于显微镜才能看清它们外形的一群低等的、原始的微小生物，如细菌。2、微生物的分类按其结构、化学组成可分为:★原核类:仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体。

★真核类:细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物、藻类★非细胞类:体积微小，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒按其致病性可分为:★病原性微生物：有致病性★非病原性微生物：无致病性3.微生物的五大特点：①个体小，面积大：小于0.1mm。肉眼不可见。②分布广,种类多（10万多种）

：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等,土壤中的数量最多。③代谢强，转化快：发酵乳糖的细菌在1小时内可分解其自重1000～10000倍的乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比食用公牛强10万倍④生长旺，繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代⑤适应性强，易变异（耐药性产生的原因）二、微生物的分布1.微生物在自然界的分布：土壤：是微生物生活的最适环境，土壤中的微生物又可分为如下几类：

细菌：占土壤微生物总数的70%~90%。

放线菌：占土壤中微生物含量的5%~30%。

霉菌：主要生活在靠近地面的土壤中，在通气良好的土壤中，霉菌数量很多。

酵母菌：普通土壤中酵母菌含量很少。水：仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所，90%为革兰氏阴性菌，主要有假单胞菌、黄杆菌等。空气：空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子的灰尘（这类微生物大多数是腐生性的，）还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。2.微生物在人体中的分布：在正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种腔道（如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位，存在着对人体无害的微生物群.

部位

常见菌种皮肤

表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等口腔

链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏

球菌、类白喉杆菌胃

正常一般无菌肠道

类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球

菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破

伤风杆菌、产气荚膜杆菌等鼻咽腔

甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链

球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等眼结膜

皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等人体中的微生物三、微生物的作用及危害

1.微生物的作用绝大多数微生物对人和动物是有益的。微生物已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。2.微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，如人类的许多传染病，如伤寒、结核、病毒性肝炎，鼠疫等。从药品生产的而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。

四、微生物的形态结构

（一）、细菌

细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。细菌的形态与结构

（1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。常见的有双球菌、链球菌、葡萄球菌等。（2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。（3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。

细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质是细菌的基本结构。

大肠菌群大肠菌群为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。生存环境大肠菌群在自然界中分布广泛，在15—46℃均可生长，最适生长温度为37℃。在水和土壤中大量存在，对自然环境有较强的抵抗力。主要污染的食品是肉类、水产品、蔬菜等。85℃热水1~3分钟灭菌。300ppm次氯酸纳溶液1~3分钟内杀灭本菌。

金黄色葡萄球菌在自然界中分布广泛，空气、水、地面、物体表面、人和动物的体表、粘膜等处均有存在。食品药品中生长有金黄色葡萄球菌，是食品药品卫生的一种潜在危险，因为金黄色葡萄球菌可以产生肠毒素，食后能引起食品中毒。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌

繁殖条件

金黄色葡萄球菌能在12~45℃生长繁殖，最适生长温度为37℃，特征

伤口化脓的地方、口、鼻子等处繁殖；污染来源于手指的可能性很高；产生的毒素，非常耐热；预防：

手指处有伤口、化脓口的人，不要直接接触产品；彻底对手指进行洗净消毒，佩戴手套，要戴帽子、戴口罩；杀灭条件加热80℃30分钟才能杀死，煮沸可迅速使它死亡沙门氏菌沙门氏菌常在动物中广泛传播，人的沙门氏菌感染也非常普遍。世界上沙门氏菌的食物中毒占首位，因此，检查食品药品中的沙门氏菌非常重要。生存环境

沙门氏菌在水中不易繁殖，但可生存2—3周，冰箱中可生存3—4个月，在—25℃可存活10个月，在自然环境的粪便中可存活1—2个月。繁殖条件沙门氏菌最适繁殖温度为37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低温储存食品是一项重要预防措施。污染渠道沙门氏菌的来源主要是患病的人和动物，及人和动物的带菌者，其中在肉类中最为多见。杀灭条件沙门氏菌对热及外界环境的抵抗力属于中等，60℃20—30分钟75℃5分钟即被杀死，100℃立即被杀死。沙门氏菌（二）、真菌真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞型微生物。真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，称为酵母菌；多细胞真菌由菌丝和孢子组成，并交织成团，称丝状菌或霉菌。真菌生长的最适的温度为22～28℃，最适的pH值为4～6。其繁殖能力强，但生长速度比细菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌对热的抵抗力不强，一般加热60~70℃1小时即被杀死，但对干燥、日光、紫外线和一些化学消毒剂有抵抗力，但对2.5％碘酒、10％甲醛则较敏感。（三）、病毒病毒属非细胞型微生物，在自然界分布非常广泛，可在人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起感染。病毒是体积最小、结构最简单的微生物，它仅有一种核酸（DNA或RNA）作其遗传物质。病毒必须在宿主活细胞内寄生，依靠细胞提供的能量、营养物质及生物大分子合成机制，完成病毒的复制过程。病毒与人类的关系极为密切，人类的传染病约75％是由病毒引起的。有些病毒传染性强，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。（四）、热原与内毒素热原：是微量即可引起恒温动物体温异常升高的物质的总称。内毒素：是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和微量蛋白的复合物，具有多种生物活性。热原包括内毒素，内毒素是主要的热原物质。在产品检测中，细菌内毒素是检测热原的方法之一。我厂产品，

脯氨酸检测内毒素---鲎试剂法。《中国药典》＜10EU/gAJI2002＜6EU/g肌苷检测热原----动物试验法（家兔法）。

消除细菌内毒素的方法高温破坏法：可用180℃干烤3~4h或250℃干烤至少60min。吸附法：一般选用活性炭。化学酸碱和氧化法。离子交换法。反渗透法。凝胶过滤法。注：在产品微检中，无菌生长，不代表无内毒素，细菌死亡后会产生大量内毒素。五、微生物污染及消毒灭菌1.药品微生物污染：药品微生物污染：微生物的产生、附着而给药品带来不良影响。药品的微生物污染也称染菌。污染药品的细菌：常见污染药品的细菌是一些生命力较强的细菌，如：葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草杆菌及一些霉菌，抵抗力弱的细菌一般不易造成污染。药品的微生物污染源：空气、水、厂房与设备、药品生产用原辅料、包装材料、昆虫、生产操作人员等2.消毒与灭菌消毒：杀死物体上病源微生物的方法，并不一定能杀死细菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常为防腐剂。无菌：不存在活的细菌。防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，为无菌操作。3、常朽用的消策毒灭菌铅法：物理灭菌场法和化学哭消毒法物理灭菌妻方法热力灭菌广法辐射杀蹈菌法滤过除菌凯法超声波迎杀菌法干燥与朝低温抑世菌法热力灭刚菌法：使蛋白质爸、酶及核领酸永久性须破环，细拢胞膜溶解野，导致细盘胞发生不雨可逆转的油死亡。①干热灭卡菌法：采用灼烧朗或干热空孙气灭菌。接常用方式喷是把待灭泽菌的物品宝均匀的放怀入烘箱，勾升温至1寺60℃，累恒温1h遮。此方法饥适合玻璃项皿，金属螺用具的灭勒菌。②湿热灭菌烫法—利用热否蒸汽杀泉死微生涛物。相因同条件质下，湿热灭妻菌效果比干热灭热菌效果好彼。这是鼓因为一挖方面细闷胞内蛋愿白质含船水量高询，容易筝变性，贺另一方虎面高温限水蒸气弯对蛋白蜡质有高辨度的穿术透力，唯从而加障速蛋白月质变性罩，死亡快。高压蒸暮汽灭菌：湿热灭拍菌法的阀一种。高压蒸汽犹灭菌是最可泡靠、最因适用、耗最广泛肢的灭菌匪方法。辐射灭舰菌法：是采用辐票射进行灭驶菌消毒。涌包括可见妹光、红外航线、紫外谅线、X射尝线和γ射置线等。紫外线慈：波长袭200企-30叙0nm框的紫外交线具有闭杀菌作柿用，2脊65~赖266霉nm波静段杀菌三能力最竹前。紫革外线穿建透物质嫌的能力员差，一关般用于良空气及磁物体表睛面消毒是。电离辐约射：高钱速电子翻、X射豪线、γ射线，上适用于疏不耐热脱物品的秩灭菌，合常用于屿药品和粉医疗用径品的灭欺菌。微波：波歉长1mm纳~1m。滤过除虾菌法用物理腔阻留的棵方法将英液体或某空气中磁的细菌抚除去,啊以达到非除菌目缴的。滤菌器含垦有微细小探孔≤0.22皂微米,只粱允许液体卫或气体通鸟过,而大撕于孔径的纠细菌等颗疏粒不能通旱过。适用范漠围：血李清、毒水素、抗睬生素以股及空气椅等的除隆菌。化学消毒刊法法：一般化学毁药剂无法护杀死所有犹的微生物功，而只能绿杀死其中海的病原微诸生物，所恨以是消毒奴的作用，下而不是灭椅菌的作用刊。消毒剂：奸能迅速杀棚灭病原微血生物的药屑物。防腐剂：材能抑制或照阻止微生览物生长繁歇殖的药物梯。消毒剂承、防腐排剂没有轨选择性爆，对一柱切活细口胞都有专毒性，赔不仅能籍杀死或煤抑制病闸原微生优物，而五且对人缺体组织定细胞也扩有损伤备作用，数所以常碰用于器多械，体债表、环胞境的消休毒。常用的字化学消贺毒剂有纷：来苏酸水、碘锁酒、酒争精等类别作用机制常用种类用途酚类蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸地面、器具表面、皮肤消毒醇类蛋白变性75％酒精皮肤、体温计消毒氧化剂氧化、蛋白沉淀二氧化氯地面、器具表面、皮肤消毒过氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮肤消毒重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞皮肤、粘膜、小创伤消毒表面活性剂蛋白变性细胞膜损伤0.1％新洁尔灭地面、器具表面、皮肤消毒化学灭菌疼法常用消专毒剂种类理和用途：洁净区的耐主要污染茎源：空气、状制药用脑水、操扁作人员朵、设备株，原辅隶料等，其中操作坚人员是主定要的污染疫源。《药品生砍产质量管刮理规范》性中明确规活定：洁净幕区内的人畜员应严格邮控制，其罗工作人员饰应定期进夺行卫生和坑微生物学丙基础知识可、洁净区巡寿作业等方肚面的培训普和考核；损进进入洁葡净区的临艺时外来人喉员因进行物指导和监窗督。防止微遵生物污草染的措发施：①了解斜污染源落、杜绝都污染途世径②洁净区动洁净技术而的的应用峰及卫生管厌理③制药朝用水的秘质量控灵制④进行糖微生物猾限度检冻查，控楼制药品删质量洁净区渐防污染否必须以毯尘埃粒露子和微绵生物为红环境监强控对象怎。六、洁侨净区微异生物的蓝控制六、洁写净区微腹生物的符控制洁净区的餐污染源：跟尘埃及细吃菌污染来自人访的尘粒企污染占禁洁净室秘污染的至80%生产工具必和设备引搬起的污染录占15%洁净区本梁身和过滤征器的缺陷提引起的污扯染占5%1.1塑操作人因员带来竖的尘埃是粒子：a.成年人上产生的金皮屑：逼10万讯~10株00万青粒子/为min坛；b.操作人家员身穿窑工作服挺，剧烈蝴活动：绳产生100万济个粒径＞照0.1扒μm的微军粒20万碌个粒径佩0.5李μm雷的微粒c.交久谈1m允in拥，产生裳1.5沿~2.挡0万粒敌子d.咳嗽:畏70万厘个粒子志，喷嚏锈：14塑0万个港粒子1.2人镇体微生物傍分布情况：人体部位微生物种类名称检出率%皮肤表皮葡萄球菌疮疱丙酸杆菌类白喉棒杆菌金黄色葡萄球菌85~10045~100555~25鼻和鼻咽表皮葡萄球菌金黄色葡萄球菌类白喉棒杆菌黏膜炎布兰汉氏球菌流感嗜血杆菌9020~855~801212口腔表皮葡萄球菌α-溶血链球菌唾液链球菌消化链球菌金黄色葡萄球菌流感嗜血杆菌产碱韦荣氏球菌75~100100100占优势常见25~100100口咽部表皮葡萄球菌类白喉棒杆菌α-链球菌和非溶血链球菌金黄色葡萄球菌30~7050~9025~9935~40大肠脆弱拟杆菌产黑素拟杆菌口腔拟杆菌具核梭杆菌坏死梭杆菌肠球菌大肠杆菌100100100100100100100在洁净区炎内的人员仁数量应尽至量少，应沈严格按照SOP要求操作炕以减少尘吵埃粒子,博要有自我砍约束的概场念。1.3犯人体带贵菌及皮屑熄情况项目部位数量（个）细菌手前额头皮100~1000/立方厘米1000~10万/立方厘米100万/立方厘米皮屑皮肤表面皮肤更替脱落尘粒1.75平方米5天一次7.1亿/天为保证生挽产环境的尸洁净度，雀应认清人捆体产生污亲染的部位葛，做好措灿施①出入洁针净区的无饶菌服应尽扣可能覆盖桑全身，皮示肤暴露部镰分越少越血好，以尽咸量减少产诉品的污染搜。②在洁滩净区从钢事药品符生产的旦人员须逗每年至猾少进行恼一次身提体检查部，有皮炉肤疾病所者、传幻玉染病者酱、体表五有伤口勉者不得逆进入洁秘净区。2.1卷洁净颜室的设兰计：表面应光向滑平整易嘱于清洁消狮毒、无死叛角、无裂遥缝，不易旬藏灰尘；不同洁熄净度级叮别的房沃间应有净足够的帝压差天花板棍应密封叙、穿墙颜的管道朱与墙体再之间应舟密封100转级洁净屋区内应匹无地漏倘、其它策区域地抹漏应液堪封设置更穗衣室、卸缓冲间升，并安纱装过滤揪器，门禁设计成镇连锁空气流动舟一般为杂萌流，上送递风下排风胀，100菜级为层流更衣室的污洁净度级艰别应与高勤级别的房独间相同。2.洁个净区洁平净技术脏的应用2.2洁笋净区污染乘的控制①保持房委间正压手：洁净级汇别不同库的相邻洁房间，浆之间的去静压差雕＞5P尸a洁净区障对外界挨的静压杆差＞1伟0Pa空气总是由由洁净级柏别高的房离间向低的皱房间流动②对洁义净区空贸气进行豪净化：保持空调仓系统的设佩计符合洁姑净区洁净稀度要求。保持空龙调系统藏的净化柿功能符刺合要求负。按规定对浊洁净区进雷行消毒、榨灭菌③保持洁门净室联锁即装置的正责常：3.洁含净区操作略注意事项跃：3.1鼻洁净晓区人流币管理操作人员泉进入洁净秩区应严格亏按照SO杀P程序：存放个许人物品雪→换鞋甚→梢穿上洁罪净拖鞋输→肢脱去外持衣→侍洗手魄→穿万上洁净弊服→兰戴上口童罩→检剩查→手框消毒→死戴上洁进净手套抖→进入脉洁净区人员离凑开洁净插区程序镇：洁净区充→缓冲回间→更源衣室（缠脱下工泉作鞋、岸换穿拖私鞋、脱堪下口罩循、衣、洪帽）→禾存衣室返（洗手竹、穿上陆外衣）胁→换鞋幼间（脱皆下拖鞋茄、走出进换鞋间附）→换踏鞋→存耐放室维修人员聋进入洁净悔区维修工任作要求：①必须按进委入洁净区天的SOP牲要求进入胁洁净区。②将工具落清洁后从护传递窗传致入。③在生产危状态下，腥不得从事揪可能影响待产品质量侧的维修④维修黑工具必涨须为专回用工具既，存放伙在专用殃地点，症并有标康识。⑤维修民用具在歼使用完寸后必须伯马上清絮洁，并霸放回指扯定地点辛。⑥不得裸水手直接接班触药品。⑦不得词高声谈稻笑，必再须戴口鲜罩。⑧不可穿勤着洁净服俩走出更衣羽室外面，耗然后再回骑到洁净区零。洁净区晌人员工票作要求匆：①个人卫天生要求不得化妆不得在洁仰净区内吃选饭、喝水肿。不得在怒洁净区牛内抽烟不得有可哈见伤口不得留吴长手指掘甲、戴炸首饰、传染病患粗者不得进衔入洁净区搁。平时生产软工作中，搭如患有腹酬泻、感冒掀、咳嗽、央不明原因接发热或体球表有伤口竭等轻微疾若病，不得嘴进入洁净辫区。洁净区子人员工愈作要求调：②正确偷的行为朗和操作蹈：保持在穷洁净区腊内工作示，不随婆意出入骡洁净区不随便说妙话，必要帅时才说话不要通过嘉传递窗说泼话，使用煌电话总是戴上迫口罩以减四少来自口惜腔的污染机械和纺设备的笼维修保盒养必须活有规律砖的进行定期对统洁净室首和洁净循室内物时品进行党清洁始终保堵持洁净纸区的清耀洁和整课齐良好的两行为很训关键，家请记住浆：穿着葡正确、培移动正决确、行迁动正确司、工作劝正确③防止不贩正确的行促为和操作镜：防止着街装不正茂确而散岁播身体纺的粒子质，引起柿污染防止不冶戴手套欣接触物帜料，引界起交叉慕污染防止在脱洁净室双内脱去李洁净室铲工作服防止用手滔指接触头阿发或身体春的其他部快位防止在沫患感冒计或其他期疾病期顷间进洁巴净室工坑作防止在妨洁净室梳内吃、芳喝、抽慰烟或读射报等防止在季洁净室磁内戴首效饰、手携表防止在洁初净室使用滩错误清洁据物料防止在驻洁净室瓣内快速是地走、些移动、量转身防止靠在姑工作台、碧产品或其脾它物料上防止把所手、手孕臂和手子肘放在坑超净工婶作台上直休息防止搬运恢物料的顶乳部防止在腿工作台油上滑动衣物品3.2俩洁净区物页流管理物品进品出洁净绑区应该津使用传渔递窗：①使用吴前先检晨查传递星窗连锁午装置是榨否正常钉，②检查传债递窗内、点外是否清榴洁，无粉谦尘，否则堡，应立即挣用干净的黑微湿抹布商抹干净才磁能使用。③同一申时间，连传递窗狼只能用边于一种北物料的斗传递，践在清洁狱后才能钳进行另朴一种物勤料的传始递。④由非洁愁净区进入血洁净区的盯物料及物晋品，通过叮传递窗，妻须开启紫斑外灯照射耽10mi筐n。4.洁口净区的传清洁和狐消毒4.1消逼毒剂的选吴择地面和工赤作台面消觉毒--新疮洁尔灭不锈钢表畏面消毒-丝式-75%僵乙醇手消毒默--织75