对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品专家讲座

对化学性肝损伤有辅助保护作用保健品对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第1页化学性肝损伤定义及毒性物质分类化学毒物损伤肝脏机理含有保肝作用功效食品对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第2页化学性肝损伤定义及毒性物质分类定义：是由化学性肝毒性物质所造成肝损伤。分类：依据毒性强弱,这些亲肝毒物可分为三类：1.剧毒类：包含磷、三硝基甲苯、四氯化碳、氯奈、丙烯醛等。2.高毒类：砷、汞、锑、苯胺、氯仿、呻化氢、二甲基甲酰胺等。3.低毒类：二硝基酚、乙醛、有机磷、丙烯晴、铅等。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第3页化学毒物损伤肝脏机理1.脂肪变性。四氯化碳、黄磷等可干扰脂蛋白合成与转运，形成脂肪肝。2.脂质过氧化反应，这是中毒性肝损伤特殊表现形式，如四氯化碳在体内代谢产生一个氧化能力很强中间产物，造成生物膜上脂质过氧化，破坏膜磷脂，改变细胞结构与功效。3.胆汁郁积反应，主要与肝细胞膜和微绒毛受损，引发胆汁酸排泄障碍相关。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第4页对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第5页对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第6页含有保肝作用功效食品

当前我国已经研制开发,经国家食品药品监督管理局同意对化学性肝损伤有保护作用保健食品共有322种,最新同意对化学性肝损伤有保护作用保健品是北京世纪合辉医药科技有限企业开发合辉牌和泰粉。主要原料葛根提取物、党参提取物、枳椇子提取物、红景天提取物、葡萄糖。标志性成份是葛根素。同意日期是9月18日，同意文号是国食健字G0362。

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第7页我国含有保肝作用功效食品分类

依据主要功效成份和保健作用,大致分为以下四类。1.由中草药或其提取物研制而成。如灵芝、大豆、枸杞、茶、黄芪、芦笋、当归、山楂、银杏、香菇等。这类植物含有活血化瘀、清肝解毒、强肝益肝作用,从有效成份来看,这些保健食品中含有多糖、黄酮类、甙类及萜类化合物,如大豆皂甙、银杏黄酮类、香菇多糖、黄芪多糖等,含有提升免疫能力、抗脂质过氧化、抗肿瘤、抗衰老等生物功效。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第8页

2.当前公认含有抗氧化、促进细胞增

殖、提升免疫能力营养物质

如牛磺酸、硒、维生素E、维生素C等;维生素E和硒都是自由基去除剂,大剂量Vc能减轻细胞脂肪性病变,促进肝细胞再生及肝糖元合成,增强肝脏解毒功效。所以,对肝炎或肝性昏迷者,大剂量Vc确有治疗作用。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第9页3.由一些特殊动物如牡蛎、毛虫甘苦参、甲鱼、蚂蚁等研制而成。4.一些特殊生物因子如胎盘因子、多肽等。谷胱甘肽(GSH)能与进入体内有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合,并促其排出体外,起到中和解毒作用。GSH还可抑制乙醇侵害肝脏产生脂肪肝。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第10页名称功效成份同意日期同意文号占熺牌克瑞地森胶囊银杏叶黄酮、红景天苷-02-17国食健字G0139合辉牌和泰粉葛根素-09-18国食健字G0362九都圣方牌景天归芪颗粒粗多糖、红景天苷-03-29国食健字G0204亚和信牌和信茶总皂苷、茶多酚-03-14国食健字G0159瑞养牌源生胶囊多糖、总黄酮-01-06国食健字G五峰慧果牌沙棘油软胶囊总黄酮、维生素E-01-06国食健字G林洋牌石斛葛根杜仲叶胶囊粗多糖、葛根素、绿原酸-01-13国食健字G2010合辉牌灵芝松花粉粗多糖-08-28国食健字G0336对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第11页名称功效成份同意日期同意文号健安丰牌椇杞丹参片粗多糖、总黄酮-03-07国食健字G0154俊客小子牌苦丁茶胶囊苦丁茶总苷-05-14国食健字G0271和治牌爱康九亨口服液甘草酸-06-01国食健字G0292合辉牌葛根西洋参颗粒（葡萄味）红景天甙、葛根素-01-20国食健字G合辉牌灵芝松花粉片（草莓味）粗多糖-01-20国食健字G合辉牌灵芝松花粉片（葡萄味）粗多糖-01-13国食健字G合辉牌灵芝松花粉片（香橙味）粗多糖-01-13国食健字G博众牌清新胶囊葛根素、总皂苷、总黄酮-01-13国食健字G对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第12页对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第13页酒前酒后舒肝片【功效成份及含量】:粗多糖190mg，栀子甙461.54mg【主要原料】枸杞子、栀子、茯苓、丹参【适宜人群】有化学性肝损伤危险者【不宜人群】少年儿童【【卫生许可证】GD.FDA健证字[]第5100S0267号对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第14页【品名】同仁堂牌警醒片【主要原料】L-谷氨酰胺、牛磺酸、维生素C、;-肉碱酒石酸盐、葡萄糖酸锌、碳酸镁、维生素B1、葡萄糖、硬脂酸镁【标志性成份及含量】每100g含：牛磺酸20.1g、维生素C6.86g、L-肉碱4.58g【保健功效】对化学性肝损伤有辅助保护作用【适宜人群】有化学性肝损伤危险者对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第15页产品成份牛磺酸---保护肝细胞、降低血清转氨酶；L-谷氨酰胺---降低和反抗自由基对肝脏损害；L-肉碱酒石酸盐(BT)---补充酒精影响肝脏后合成不足，并修复损伤肝细胞；维生素B1--预防酒精性脑病；碳酸镁---能改进酒精引发精神障碍；维生素----C抗氧化、参加肉碱生物合成保护肝细胞；葡萄糖酸锌---拮抗肝细胞凋亡；葡萄糖---加紧体内酒精分解速度，防止造成酒精中毒。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第16页对化学性肝损伤有辅助保护功效食品评价试验项目、试验标准及结果判定1.试验项目动物试验分为方案一（四氯化碳肝损伤模型）和方案二（酒精肝损伤模型）两种。方案一（四氯化碳肝损伤模型）体重谷丙转氨酶（ALT）谷草转氨酶（AST）肝组织病理学检验

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第17页

方案二（酒精肝损伤模型）体重

丙二醛（MDA）

还原型谷胱甘肽（GSH）

甘油三酯（TG）

肝组织病理学检验对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第18页2.试验标准（1）所列指标均为必做项目。（2）依据受试样品作用原理不一样，方案一和方案二任选其一进行动物试验。

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第19页3.结果判定方案一（四氯化碳肝损伤模型）:病理结果阳性，谷丙转氨酶和谷草转氨酶二指标中任一项指标阳性，可判定该受试样品含有对化学性肝损伤有辅助保护功效作用。方案二（酒精肝损伤模型）:①肝脏MDA、GSH、TG三项指标结果阳性，可判定该受试样品对乙醇引发肝损伤有辅助保护功效，②肝脏MDA、GSH、TG三指标中任二项指标阳性，且肝脏病理结果阳性，可判定该受试样品含有对乙醇引发肝损伤有辅助保护功效作用。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第20页对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法方案一：四氯化碳肝损伤模型1.原理

四氯化碳(CCl4)受到肝微粒体酶活化成为三氯甲烷自由基(CCl3•)与蛋白质共价结合造成蛋白合成障碍、脂质分解代谢紊乱，引发肝细胞内甘油三酯(TG)蓄积。CCl3•也能快速与O2结合转化为过氧化三氯甲烷自由基(CCl3O2•)造成脂质过氧化，从而引发细胞膜变性损伤,致使酶渗漏以及各种类型细胞病变，甚至坏死。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第21页

2.试验动物

成年大鼠或小鼠，单一性别，大鼠（180－220克），每组8-12只，小鼠（18－22克），每组10-15只。3.试验方法和步骤3.1剂量分组及受试样品给予时间试验设三个剂量组和一个空白对照组和一个模型对照组，以人体推荐量10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中一个剂量组，另设二个剂量组。用CCl4（分析纯）造成肝损伤模型，造模方式能够灌胃或腹腔注射。小鼠CCl4灌胃浓度为1％，以食用植物油稀释，灌胃量5mL/kgBW(折合CCl4剂量为80mg/kgBW)，大鼠CCl4灌胃浓度为2－3%，灌胃量5mL/kgBW(折合CCl4剂量为160－240mg/kgBW)。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第22页

灌胃量5mL/kgBW(折合CCl4剂量为80mg/kgBW)，大鼠CCl4灌胃浓度为2－3%，灌胃量5mL/kgBW(折合CCl4剂量为160－240mg/kgBW).必要时设阳性对照组和溶剂对照组。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天.3.2给予受试样品路径经口灌胃给予受试样品，无法灌胃时将受试样品掺入饲料或饮水亦可，并统计每只动物饲料摄入量或饮水量。

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第23页3.3试验步骤每日经口灌胃给予受试样品，空白对照组和模型对照组给予蒸馏水。将动物每七天称重两次，以调整受试样品剂量。于试验第30天将各组动物隔夜禁食16小时，模型组及各样品组一次灌胃给予CCl4，空白对照组给植物油，受试组继续给予受试样品至试验结束（与CCl4灌胃间隔4小时以上）。给予CCl4后，依据实际情况于24或48小时处死动物，取血分离血清，测定ALT、AST，并取肝脏进行病理组织学检测。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第24页

3.4检测指标血清谷丙转氨酶（ALT），谷草转氨酶（AST），肝脏病理组织检验4.血清谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）测定4.1测定方法可选取全自动生化分析仪或赖氏法（试剂盒）测定。

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第25页

4.2数据处理和结果判定

采取方差分析，但需按方差分析程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个试验组和一个对照组间均数两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐数据进行适当变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后数据进行统计；若变量转换后仍未到达正态或方差齐目标，改用秩和检验进行统计。 受试样品组ALT、AST与模型对照组比较，差异有显著性，可分别判定ALT、AST结果阳性。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第26页

5.肝脏病理组织学改变、诊疗标准和结果判定5.1试验材料取大鼠肝脏左叶用10%福尔马林固定，从肝左叶中部做横切面取材，常规病理制片（石蜡包埋，H.E染色）。5.2镜检从肝脏一端视野开始统计细胞病理改变，用40倍物镜连续观察整个组织切片。可见小叶中心性肝细胞退行性病变和少数细胞坏死。主要病变类型有肝细胞气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、肝细胞水样变性和细胞坏死等。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第27页

5.3评分标准：

分别统计每个视野中各种病变所占视野面积，并累计所观察视野病变总分。

肝细胞气球样变,（细胞肿大,胞浆残留少许）

大致正常0分气球样变肝细胞占整个视野1/41分气球样变肝细胞占整个视野1/22分气球样变肝细胞占整个视野3/43分气球样变肝细胞占整个视野4分对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第28页

肝细胞脂肪变性：（肝细胞胞浆内出现界限清楚脂滴空泡）大致正常0分脂肪变性肝细胞占整个视野1/41分脂肪变性肝细胞占整个视野1/22分脂肪变性肝细胞占整个视野3/43分脂肪变性肝细胞占整个视野4分对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第29页胞浆凝聚：（胞浆嗜伊红增强）大致正常0分胞浆凝聚肝细胞占整个视野1/41分胞浆凝聚肝细胞占整个视野1/22分胞浆凝聚肝细胞占整个视野3/43分胞浆凝聚肝细胞占整个视野4分对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第30页水样变性：未见水样变性肝细胞0分水样变性肝细胞占整个视野1/41分水样变性肝细胞占整个视野1/22分水样变性肝细胞占整个视野3/43分水样变性肝细胞占整个视野4分对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第31页肝细胞坏死：（胞浆嗜伊红变，凝固性坏死）未见坏死细胞0分散在个别细胞占整个视野1/41分坏死细胞占整个视野2/42分坏死细胞占整个视野3/43分坏死细胞弥漫性存在占整个视野4分对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第32页

5.4数据处理和病理结果判定

采取方差分析，但需按方差分析程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个试验组和一个对照组间均数两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐数据进行适当变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后数据进行统计；若变量转换后仍未到达正态或方差齐目标，改用秩和检验进行统计。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第33页

（1）受试样品任何一个剂量组与模型对照组之间，气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、水样变性或肝细胞坏死等肝细胞病变中，肝细胞坏死程度减轻，差异有显著性，而其它病变类型与模型对照组比较显著减轻或无显著差异，可判断动物试验病理结果阳性。（2）受试样品任何一个剂量组与模型对照组之间，气球样变、脂肪变性、胞浆凝聚、水样变性这四种肝细胞病变类型加重和减轻同时存在，差异有显著性，且肝细胞坏死程度减轻，差异有显著性，则可将其各种病理改变得分相加，肝细胞坏死评分2倍计入，以总分进行统计分析，若差异有显著性，可判断动物试验病理结果阳性。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第34页

6结果判断

在模型成立前提下，ALT、AST两项血液生化指标果为中任何一项和病理结阳性，可判定受试样品对化学性肝损伤有辅助保护作用。

•方案二：酒精肝损伤模型1.原理机体大量摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶催化下大量脱氢氧化，使三羧循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，致使脂肪在肝细胞内沉积。同时乙醇能激活氧分子，产生氧自由基造成肝细胞膜脂质过氧化及体内还原型谷胱甘肽耗竭。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第35页

2.试验动物

成年小鼠或大鼠，单一性别，大鼠（180－220克），每组8-12只，小鼠（18－22克），每组10-15只。3.试验方法和步骤3.1剂量分组及受试样品给予时间试验设三个剂量组和一个空白对照组和一个模型对照组，以人体推荐量10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第36页用无水乙醇（分析纯）造成肝损伤模型，无水乙醇浓度为50％（以蒸馏水稀释），小鼠灌胃量12－14mL/kgBW(折合乙醇剂量为6000－7000mg/kgBW)。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。3.2给予受试样品路径 经口灌胃给予受试样品，无法灌胃时将受试样品掺入饲料或饮水亦可，并统计每只动物饲料摄入量或饮水量。3.3检测指标 肝组织中丙二醛（MDA）还原型谷胱甘肽（GSH）甘油三酯（TG）含量。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第37页

3.4试验步骤

每日经口灌胃给予受试样品，空白对照组和模型对照组给予蒸馏水。将动物每七天称重两次，以调整受试样品剂量。给予受试样品结束时将模型对照组及各样品组一次灌胃给予50%乙醇12mL/kgBW，空白对照组给蒸馏水，禁食16小时处死动物，进行各项指标检测及病理组织学检验。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第38页

4肝匀浆中过氧化脂质降解产物丙二醛（MDA）测

定方法4.1原理

MDA(malondiadehycle)是细胞膜脂质过氧化终产物之一，检测其含量可间接预计脂质过氧化程度。MDA与硫代巴比妥酸在酸性条件下共热，形成粉红色复合物，吸收峰在535nm,具此可测得MDA含量4.2仪器与试剂

仪器

721分光光度计、微量加样器、恒温水浴锅、普通离心机、混旋器、具塞离心管、组织匀浆器

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第39页

试剂

0.2M乙酸盐缓冲液PH3.5

0.2M乙酸溶液185mL

0.2M乙酸钠溶

15mL

1mmol/L四乙氧基丙烷（贮备液，4℃保留3个月），临用前用水稀释成40nmol/mL

8.1%十二烷基硫酸钠SDS 0.8%硫代巴比妥酸TBA

0.2M磷酸盐缓冲液PH7.4

0.2M磷酸氢二钠1920mL 0.2M磷酸二氢钾480mL

对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第40页

4.3试验步骤4.3.1样品制备

组织匀浆样品：取一定量所需脏器，生理盐水冲洗、拭干、称重、剪碎，置匀浆器中，加入0.2M磷酸盐缓冲液，以0r/min匀浆10s，间歇30s，重复进行3次，制成5％组织匀浆（W/V），3000r/min离心5～10min，取上清液待测。4.3.2样品测定(见下一页表)对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第41页试剂空白管样品管标准管5％组织匀浆0.1mL40nmol/mL四乙氧基丙烷0.1mL8.1%SDS0.2mL0.2mL0.2mL0.2M乙酸盐缓冲液1.5mL1.5mL1.5mL0.8%TBA1.5mL1.5mL1.5mLH2O0.8mL0.7mL0.7mL混匀，避光沸水浴60min，流水冷却，于532nm比色对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第42页4.3.3计算过氧化脂质含量（nmol/mg组织）=过氧化脂质含量(nmol/100mg蛋白质)=A:空白管吸光度 B：样品荧吸光度 F：四乙氧基丙烷吸光度 C：四乙氧基丙烷浓度(40nmol/mL) K：稀释倍数对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第43页

4.3.4数据处理及结果判定

数据采取方差分析，但需按方差分析程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个试验组和一个对照组间均数两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐数据进行适当变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后数据进行统计；若变量转换后仍未到达正态或方差齐目标，改用秩和检验进行统计。

结果判定

在模型成立前提下，受试样品组MDA含量与模型对照组比较，差异有显著性，判定该指标结果阳性。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第44页

5肝匀浆还原型谷胱甘肽（GSH）测定方法5.1原理GSH和5,5'-二硫对硝基甲酸（DTNB）反应在GSH-Px催化下可生成黄色5-硫代2-硝基甲酸阴离子，于423nm波长有最大吸收峰，测定该离子浓度，即可计算GSH含量。5.2试剂5.2.10.9％生理盐水5.2.24％磺基水杨酸溶液5.2.30.1mol/LPBS溶液(pH=8.0)： Na2HPO413.452g KH2PO40.722g 加蒸馏水至1000mL。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第45页

5.2.40.004％DTNB溶液：称取DTNB40mg溶于1000mL0.1mol/LPBS溶液(pH=8.0)中。5.2.5叠氮纳缓冲液NaN3 16.25mgEDTA-Na2 7.44mgNa2HPO4 1.732gNaH2PO4 1.076g加蒸馏水至1000mL，用少许HCl、NaOH调pH7.0，4℃保留。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第46页5.2.6标准溶液：

称取还原型GSH15.4mg，加叠氮纳缓冲液至50mL，终浓度为1mmol/L，临用前配制。5.3方法5.3.1样品测定：取肝脏0.5g加生理盐水5mL充分研磨成细浆（10%肝匀浆），混匀后取浆液0.5mL加4%磺基水杨酸0.5mL混匀，室温下3000rpm离心10分钟，取上清液即为样品。样品测定管中加4.5mLDTNB，空白管加0.5mL4%磺基水和4.5mLDTNB混匀，室温放置10分钟后，412nm处测定吸光度。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第47页5.3.2

标准曲线

1234561mmol/LGSH(mL)00.050.100.150.200.25生理盐水(mL)0.500.450.400.350.300.25DTNB(mL)4.504.504.504.504.504.50GSH量(mol/L)0100200300400500对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第48页

5.3.3计算

样品GSH含量(mol/g肝重)=对应曲线浓度值(mol/L)÷50g/L5.4数据处理和结果判定

数据采取方差分析，但需按方差分析程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个试验组和一个对照组间均数两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐数据进行适当变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后数据进行统计；若变量转换后仍未到达正态或方差齐目标，改用秩和检验进行统计。

结果判定

在模型成立前提下，受试样品组还原型GSH含量与模型对照组比较，差异有显著性，判定该指标结果阳性。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第49页

2.6肝匀浆中甘油三酯（TG）测定方法2.6.1测定方法：采取甘油三酯测定试剂盒（甘油磷酸氧化酶过氧化物酶法）测定10%肝匀浆中甘油三酯含量。与血清甘油三酯测定方法相同，以等量10%肝匀浆替换血清按操作说明书进行操作，测定结果以mmol/g肝重表示。2.6.2数据处理和结果判定 数据采取方差分析，但需按方差分析程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个试验组和一个对照组间均数两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐数据进行适当变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后数据进行统计；若变量转换后仍未到达正态或方差齐目标，改用秩和检验进行统计。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第50页

在模型成立前提下，受试样品组TG与模型对照组比较，差异有显著性，判定该指标结果阳性。7肝脏病理组织学改变、诊疗标准和结果判定7.1试验材料：从肝左叶中部做横切面取材，冰冻切片，苏丹Ⅲ染色，。7.2镜检：从肝脏一端视野开始统计细胞病理改变，用40倍物镜连续观察整个组织切片。主要观察脂滴在肝脏分布、范围和面积。对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第51页

7.3评分标准

肝细胞内脂滴散在，稀少。0分含脂滴肝细胞不超出1/41分含脂滴肝细胞不超出1/22分含脂滴肝细胞不超出3/43分肝组织几乎被脂滴代替4分对化学性肝损伤有辅助保护作用的保健品第52页

7.4数据处理和结果判定

采取方差分析，但需按方差分析程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值<F0.05,结