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文档简介
实验八减数分裂压片标本制备与观察实验目的1.了解高等植物减数分裂过程及染色体的动态变化。2.掌握制备植物细胞减数分裂玻片标本的技术和方法。减数分裂的特点减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂,仅在配子形成过程中发生。减数分裂的特点是:连续进行两次分裂,而染色体只复制一次,结果形成4个子核,每个子核只含单倍体的染色体,即染色体数减少一半,所以叫做减少分裂。另外一个特点是前期特别长,而且形态和行为变化复杂,包括同源染色体的配对、交换与分离等。植物花粉形成过程在植物花粉形成过程中,花药内的一些细胞分化成小孢子母细胞(2n),每个小孢子母细胞进行2次连续的细胞分裂(第一次减数分裂和第二次减数分裂)。每一个小孢子母细胞产生4个子细胞,每个子细胞就是1个小孢子。小孢子内的染色体数目是体细胞的一半(图2-1)。图2-1减数分裂染色体行为示意图动物的有性生殖过程中,也有一个由双倍体到单倍体的减数过程,动物的精巢分化出精母细胞,精母细胞减数分裂形成单倍体的精子(图2-2)动物减数分裂的细胞行为示意图(图2-2)玉米花粉母细胞减数分裂过程如图2-4蝗虫精巢性母细胞减数分裂过程主要时期的染色体行为特征如图2-4
1.细线期;2.偶线期;3.早粗线期;4.粗线期;5.晚粗线期;6.双线期;7.终变期;8.中期I(侧面图);9.中期I(极面图);10.早后期I;11.后期I;12.末期I;13.前期II;14.中期II;15.后期II;16.末期II;17.精细胞;18.精子第一次减数分裂(减数分裂I,包括染色体的复制)玉米减数分裂前期I细线期:第一次分裂开始,染色体很细很长,呈细线状在核内交织成网。每一染色体已经复制为两个染色单体,但在显微镜下看不出染色体的双重性。(1)偶线期:染色体形态与细线期差别不大,染色体比细线期粗,同源染色体开始配对,形成二价体,每个二价体有一个着丝点。(2)双线期:染色体进一步螺旋化,比粗线期变得更为粗短,更为清晰,二价体中的两条同源染色体相互分开出现交叉现象,出现交叉末端化,呈“X”、“V”、“O”、“∞”等形状。终变期:染色体高度浓缩,染色体均匀地分散在核膜的附近,此时是检查染色体数的最佳时期,这时核内有多少个二价体就说明有多少对同源染色体。中期I核仁、核膜消失,二价体均匀排列在赤道板上,纺锤体形成。从侧面看,一个个二价体就象一列横队排列在细胞中;从极面看,一个个二价体分散在细胞质中,这也是染色体计数的好时期。后期I
二价体的两个同源染色体分开(没有着丝点的分开),由纺锤丝拉向两极,染色体又变成了染色丝。
末期I
同源染色体分别到达细胞两级,染色体变成了染色质状,核膜、核仁重新出现,形成两个子核,每个子核染色体数目减半为n,同时细胞质分开形成两个子细胞,叫二分体。中期II染色体排列在赤道板,每条染色体由两个染色单体,共用一个着丝点。后期II每个染色体从着丝点处分裂为二,分别移向两极。末期II移到两级的染色体解螺旋,再次出现核仁、核膜,形成单倍的子核,此时减数分裂I形成的两个单倍核形成4个单倍核,最后形成4个子细胞,叫四分体。理想的植物细胞减数分裂玻片标本在显微镜下可以观察到减数分裂各个时期的典型细胞。实验步骤
1.取材在一朵花的减数分裂的全过程中能观察染色体的时间是很短的,一般在终变期、中期I、后期I。因此,适时取材是是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤,不同材料、不同地区或季节的取材适期略有差异。玉米雄穗北方的玉米5月份取材,时间为上午8:30为好,夏玉米一般在7月份取材,以上午7:00-8:00为好,在玉米雌穗未抽出前的7-10d手摸上部(喇叭口下部)有松软感觉,表明雄花序即将抽出。用刀在顶叶近喇叭口处纵向划一刀,切开长10-15cm,剥出雄花序,顶端花药长3-5mm,花药尚未变黄时取材为适期。将采集的雄穗浸入卡诺氏固定液中固定12-24h后,用95%酒精清洗净醋酸气味后,保存于70%酒精中置冰箱保存备用。2.制片取1-3枚花药放在洁净的载玻片上,用清洁刀片压在花药上向一端抹去,涂成薄层,然后滴1滴1%醋酸洋红染色液(或苏木精染色液),也可在花药上滴上染色液。然后用镊子把花药镊碎,去掉肉眼见得到的残渣,数分钟后盖上盖玻片,包被吸水纸,用大姆指匀力压片,或用铅笔的橡皮头垂直轻敲。为了加深染色,可把载玻片平放在酒精灯火焰上来回摆动几次,使之略作加热。实验报告
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