免疫器官的观察与免疫细胞的分离

免疫器官的观察与免疫细胞的分离免疫器官的观察与免疫细胞的分离第1页第二讲

免疫器官观察与

免疫细胞分离免疫器官的观察与免疫细胞的分离第2页试验目标掌握小白鼠捉拿与处死方法掌握免疫细胞分离方法及其效果判断熟悉血细胞计数板结构及使用方法免疫器官的观察与免疫细胞的分离第3页免疫器官观察免疫器官的观察与免疫细胞的分离第4页免疫细胞种类免疫器官的观察与免疫细胞的分离第5页免疫细胞分离技术

密度梯度离心法免疫吸附分离法荧光激活细胞分选仪分离法磁珠分离法抗原肽-MHC分子四聚体技术花环沉降法免疫器官的观察与免疫细胞的分离第6页外周血单核细胞分离离心前离心后稀释抗凝血淋巴细胞分离液血浆单个核细胞粒细胞红细胞密度梯度离心法免疫器官的观察与免疫细胞的分离第7页淋巴细胞及其亚群分离免疫器官的观察与免疫细胞的分离第8页抗原肽-MHC分子四聚体技术

T免疫器官的观察与免疫细胞的分离第9页小白鼠抓取和固定通常见右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，翻转后将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。免疫器官的观察与免疫细胞的分离第10页小白鼠抓取和固定免疫器官的观察与免疫细胞的分离第11页小白鼠抓取和固定免疫器官的观察与免疫细胞的分离第12页小白鼠处死方法颈椎脱臼法：用拇指和食指用力往下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾，用力稍向后上方一拉，使之颈椎脱臼，造成脊髓与脑髓断离，动物马上死亡。免疫器官的观察与免疫细胞的分离第13页小白鼠处死法（颈椎脱臼法）

免疫器官的观察与免疫细胞的分离第14页倒T字开腹

免疫器官的观察与免疫细胞的分离第15页小白鼠脾脏免疫器官的观察与免疫细胞的分离第16页小白鼠脾脏免疫器官的观察与免疫细胞的分离第17页小白鼠脾脏

免疫器官的观察与免疫细胞的分离第18页小白鼠胸腺免疫器官的观察与免疫细胞的分离第19页小白鼠胸腺免疫器官的观察与免疫细胞的分离第20页【试验器材】

小白鼠手术器械，解剖台,血细胞计数板,显微镜0.2％台盼蓝染液免疫器官的观察与免疫细胞的分离第21页【试验步骤】颈椎脱臼法处死小白鼠，取其脾脏将脾脏放入适量（约15ml）生理盐水中，除去筋膜取绿豆大小脾脏，用玻片研磨制成10ml细胞悬液取１ml细胞悬液于试管中，加入１滴台盼蓝染液混匀后静置3分钟，低倍镜观察免疫器官的观察与免疫细胞的分离第22页【台盼兰拒染法原理】

通透性着色颜色体积

死细胞

高

易蓝大

活细胞

低

难无色小活细胞死细胞免疫器官的观察与免疫细胞的分离第23页注意事项脾脏去净筋膜，弃边缘，取其中间个别研磨时不可用力过大，时间不宜过长染色时间不宜过长或过短血细胞计数板使用方法（10倍镜、暗视野）免疫器官的观察与免疫细胞的分离第24页血细胞记数板

细胞计数池免疫器官的观察与免疫细胞的分离第25页血细胞计数池结构

白细胞计数区：

红细胞计数区：无效计数区免疫器官的观察与免疫细胞的分离第26页【计数标准】

1、2、“”形随机计数S计左不计右，计上不计下√

×√√免疫器官的观察与免疫细胞的分离第27页【试验结果】

细胞计数随机计数100个细胞，并数出其中活细胞数结果计算细胞活力＝活细胞数／细胞总数×100%免疫器官的观察与免疫细胞的分离第28页试验操作录像免疫器官的观察与免疫细胞的