新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求专家讲座

新生儿遗传代谢病筛查

采血技术试验技术规范化要求四川省南充市妇幼保健院四川省新生儿疾病筛查南充分中心陈生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第1页2新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第2页筛查标本到达试验室时间（平均）3新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第3页年筛查量分布筛查数量筛查中心百分比（%）<1万1813.641-<3万3123.48>=3-<10万6952.27>=10-20万139.85>20万10.764新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第4页5新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第5页6新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第6页7新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第7页8新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第8页9新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第9页新生儿遗传代谢病筛查血片

采集技术规范血片采集是新生儿遗传代谢病筛查技术流程中最主要步骤。血片质量直接影响试验室检测结果，开展新生儿遗传代谢病血片采集及送检医疗机构应该按本技术规范要求完成血片采集工作。10新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第10页一、基本要求（一）采血机构设置。设有产科或儿科诊疗科目标医疗机构均应该开展新生儿遗传代谢病筛查血片采集。（二）采血人员要求。1.含有与医学相关中专以上学历，从事医学临床工作2年以上。2.接收过新生儿遗传代谢病筛查相关知识和技能培训并取得技术合格证书。培训内容包含：新生儿遗传代谢病筛查目标、标准、方法及网络运行；滤纸干血片采集、保留、递送相关知识；新生儿遗传代谢病筛查相关信息和档案管理。11新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第11页二、采血机构和人员职责（一）主动开展新生儿遗传代谢病筛查宣传教育工作。（二）加强对本机构血片采集人员管理和培训。（三）负担本机构新生儿遗传代谢病筛查相关信息搜集、统计、分析和上报工作。（四）血片采集人员在实施血片采集前，应该将新生儿遗传代谢病筛查目标、意义、筛查疾病病种、条件、方式、灵敏度和费用等情况如实通知新生儿监护人，并取得书面同意。（五）认真填写采血卡片，做到字迹清楚、登记完整。卡片内容包含：采血单位、母亲姓名、住院号、居住地址、联络电话、新生儿性别、孕周、出生体重、出生日期、采血日期和采血者等。12新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第12页二、采血机构和人员职责

（六）严格按照新生儿遗传代谢病筛查血片采集步骤采集足跟血，制成滤纸干血片，并在要求时间内递送至新生儿遗传代谢病筛查试验室检验。（七）因特殊情况未按期采血或不合格标本退回需要重新采血者，应该及时预约或追踪采集血片。（八）对可疑阳性病例应该帮助新生儿遗传代谢病筛查中心，及时通知复查，方便确诊或采取干预办法。（九）做好资料登记和存档保管工作，包含掌握活产数、筛查数、新生儿采血登记信息、反馈检测结果及确诊病例等资料，保留时间最少10年。13新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第13页三、血片采集步骤（一）血片采集人员清洗双手并佩戴无菌、无滑石粉手套。（二）按摩或热敷新生儿足跟，并用75%乙醇消毒皮肤。（三）待乙醇完全挥发后，使用一次性采血针刺足跟内侧或外侧，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，从第2滴血开始取样。（四）将滤纸片接触血滴，切勿触及足跟皮肤，使血液自然渗透至滤纸后面，防止重复滴血，最少采集3个血斑。（五）手持消毒干棉球轻压采血部位止血。（六）将血片悬空平置，自然晾干呈深褐色。防止阳光及紫外线照射、烘烤、挥发性化学物质等污染。（七）及时将检验合格滤纸干血片置于密封袋内，密闭保留在2～8℃冰箱中，有条件者可0℃以下保留。（八）全部血片应该按照血源性传染病标本对待，对特殊传染病标本，如艾滋病等应该作标识并单独包装。14新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第14页四、采血工作质量控制（一）血片采集滤纸应该与试剂盒标准品、质控品血片所用滤纸一致。（二）采血针必须一人一针。（三）正常采血时间为出生72小时后，7天之内，并充分哺乳；对于各种原因（早产儿、低体重儿、正在治疗疾病新生儿、提前出院者等）未采血者，采血时间普通不超出出生后20天。（四）合格滤纸干血片应该为：1.最少3个血斑，且每个血斑直径大于8毫米。2.血滴自然渗透，滤纸正反面血斑一致。3.血斑无污染。4.血斑无渗血环。（五）滤纸干血片应该在采集后及时递送，最迟不宜超出5个工作日。（六）有完整血片采集信息统计。15新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第15页新生儿遗传代谢病筛查滤纸血片采集（CLSI)16新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第16页注意事项当采集血标本时应恪守注意事项。病人标本可能感染了人类免疫缺点病毒（HIV）或乙型肝炎病毒（HBV）。应恪守恰当血样采集技术来尽可能降低试验室人员危险性，而且要戴手套。17新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第17页1.2 标本可接收性

本标准并不是解释假如没有完全按照标准采集全部血斑标本定为不可接收（即是不能进行检测）。只是证实拒绝分析标本及表明其是不可接收，假如进行检测话对于特定分析物会产生不可靠、误解或临床上不准确结果。既然，因为这一定义，不可接收标本产生无用信息，就不应分析检测这么标本，并应通知负责采集血样人员尽快地重新采集可接收标本。假如检测了标本，实际上，试验室认可标本适当性，以及负担负责分析结果可靠性。18新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第18页2.1 足（后）跟（Heel）新生儿筛查时，推荐使用足跟采血，应从足跟掌侧中间或侧面采集。“中间”是指尽可能地靠近人体中线，“侧面”是指尽可能地远离人体中线。“掌侧”是指足部行走侧。不能使用以前使用穿刺部位或足跟曲面侧。19新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第19页3.滤纸血样采集技术

3.1脚跟穿刺3.1.1准备步骤3.1.2预防办法3.1.3位置准备3.1.4采血部位消毒3.1.5穿刺3.1.6直接应用3.1.6.1挤压3.1.6.2多层3.1.7采集血样3.1.8干燥3.1.9堆积3.1.10运输3.1.11保留20新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第20页3.1.8 干燥

应防止接触或污染血斑。血标本应放置在室温(15oCto22oC)并防止阳光直照（非直接室内光线通常不会有害），周围无吸附物质水平支架上最少三个小时。滤纸上血斑不应加热、堆积在一起、或在干燥过程中接触到其它表面。21新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第21页3.1.9 堆积在一起

当不可防止地将暴露干血斑成批地堆积在一起时，应采取以下程序。在将标本放置在运输容器中之前，除非标本有其它物理屏障隔开，如隔纸，玻璃纸，不然，应将采样卡片上干血斑旋转180o后再放置。22新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第22页3.1.10运输（邮寄）

除非筛查试验室有别指导，应在采集标本后24小时内将采集血样卡片运输到或邮寄到试验室，并保留适当跟踪统计文件。应防止在采集血样场所耽搁，相对于可能耽搁其运输环境应结构化来最大程度地提升运输效率。23新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第23页3.1.11保留

假如试验室要保留剩下干血斑标本到更长时间，必须保管好它们确保保留后其状态未受到损害。一个方法是将标本保留在含有干燥剂和湿度指示卡不漏气、可封口塑料袋中。湿度应维持在低于30%。假如可能话，阳性和阴性血斑质控品应与剩下标本放置在一起，这么，当从保留环境中取出标本时能够经过检测质控品情况来检验标本完整性。24新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第24页4.4 运输和包装预防办法标本不应放置在密封不透气容器中（塑料或橡皮信封）。必须恪守邮递和地方运输法规[17]。假如地方法规要求用防水容器包装用于运输，则必须包含足够量包装好干燥剂和湿度指示卡来确保干血片未暴露在过量湿气中。湿度和湿气对干血斑标本稳定性和分析物回收是有害。含有生物危险标本在运输中应含有特殊防护办法。25新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第25页4.4.2 包装

包装不应造成滤纸受压。在血斑标本运输中在同一容器中不应放置化学或其它类型标本。26新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第26页4.4.3 堆积放置

因为标本之间滤取（交叉污染）可能发生，标本与标本之间接触是不恰当。假如堆积放置不可防止话，可有几个方法：(1) 对采集血样表格加上遮盖纸片。(2) 将暴露干血斑旋转180度。(3) 标本之间放置玻璃纸。27新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第27页4.4.4 运输时间

标本应在采集24小时内送或邮寄到筛查试验室。28新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第28页5.1 最少预先打印信息

下面列出是到达筛查目标要求最少所需信息。为了满足其特殊要求，依据筛查计划可包含一些额外信息。(1) 新生儿姓名,母亲姓名,病人识别号(选择:地址和电话号码)。(2) 出生日期。(3) 出生体重。(4) 性别。(5) 喂奶情况。(6) 标本采集时间和新生儿年纪（小时）。(7) 提供血样单位和地址。(8) 医生姓名和电话号码。(9) 筛查计划或试验室和地址。(10)填写分析试验结果位置。(11)含有一定数量1/2寸（13mm）内径在滤纸一侧印有破折或点状线圈(选择：在两侧印好圈)。75uL血液可填满标本采集圈，而100uL血液会稍微超出印好圈。(12)在滤纸部分标出滤纸厂家和批号。29新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第29页5.2.3 标本卡片编号

每一标本采集卡片连续编号应预先打印在卡片每一信息部分，假如血斑部分从卡片上分开。应考虑标本识别号连续唯一性。为了到达这一识别及干血片标本与新生儿资料表联络，条形码是一适当方法。30新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第30页怎样采集可接收血片标本

A1 准备A1.1洗手A1.2戴消毒无滑粉手套以及不一样新生儿要更换手套A1.3确认新生儿身份A2 采样技术戴手套31新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第31页

A2.1用70%酒精消毒新生儿足跟A2.2让足跟自然干燥32新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第32页

A2.3针刺部位应在如上图所表示阴影区域

33新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第33页

A2.4用推荐长度柳叶刀 进行如图所表示针刺（深度小于2.0m）

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A2.5用消毒棉球轻轻地拭去第一滴血（第一滴血含有组织液可能会稀释样本）A2.6等候形成大血滴A2.7可用拇指进行温柔挤压及间断性地放松易于形成血滴

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A2.8轻轻地将滤纸卡片接触血滴，用每一滴血滴在每一预先定好圈内。观察每一圈血流透过滤纸情况。 A2.9全部使用过用具均应放置在适当生物危害容器中。36新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第36页37新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第37页

A2.10采集完标本后，应将新生儿足抬高，使用消毒棉球压着针刺位置。但不要使用胶粘带。 A2.11让血标本完全自然干燥，放置在水平支架上，如塑料试管架，在室温中放置最少3小时（不能堆积在一起或加热）。A2.12标本干燥后，放置在同意运输容器中38新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第38页

A3 易犯错误A3.1残留酒精未能自然干燥可能稀释标本，影响到试验结果。A3.2在后弯曲足后跟进行穿刺将使得血液从穿刺部位流出，使得正常血斑难以形成。不能使用以前穿刺部位。A3.3挤压穿刺部位可能造成溶血，使得组织液混合到标本中去。39新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第39页

A3.4不能在目标血斑上连续滴上几滴血（比如A）。假如血流降低以至不能完全地填满圈，则需要重复采血技术A2.1到A2.11步骤。注意血样B因为不足血液所至低质量标本。A3.5防止接触在采血前圈子区域或采集完血样后血斑。不能让水、牛奶、消毒液、手套上粉状物或其它物质接触标本卡片。A3.6在标本干燥之前不要将标本放置在运输容器之中。A3.7如血斑未能完全干燥将会影响到试验结果40新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第40页附录E血片采集及干燥设备41新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第41页利器损伤42新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第42页锐器刺伤引发职业感染

接触各种病原体及传染病，进行各种侵入性操作时接触血液、体液，被各种锐器刺伤等。而种种污染针头刺伤是医院内传染乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）及人类免疫缺点病毒（HIV）等主要路径。据世界卫生组织报道:被HIV阳性病人针刺伤后取得HIV可能性是0.2%～0.4%；受针刺伤感染HCV可能性是0.2%～6.0%；受刺伤感染HBV可能性是19%～40%。据国内几家医院调查资料显示:大约有78.4%～81.9%医务人员工作中有被锐器刺伤历史，针刺伤5次以上者达17.9%。43新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第43页血液传输主要病原菌：HBV，HCV，HDV，HIV1994年美国CDC报道职业传输HIV，17例确定，15例可能，主要原因是针刺引发感染。尚无证据证实HIV可经过气溶胶传输。10个临床和研究试验室进行HBV表面抗原调查，从3个试验室11个工作台检测到31个阳性/800个环境标本。44新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第44页新生儿遗传代谢病筛查

试验室检测技术规范本规范适合用于负担新生儿苯丙酮尿症和先天性甲状腺功效减低症等新生儿遗传代谢病筛查试验室检测医疗机构。45新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第45页一、基本要求（一）机构设置。省、自治区、直辖市人民政府卫生行政部门按照本区域规划指定含有能力医疗机构为新生儿遗传代谢病筛查中心,其试验室年筛查检测量应该达3万人次以上。（二）人员要求。1.试验室责任人：与医学相关本科以上学历，高级职称，含有儿科或临床检验工作经验，从事新生儿遗传代谢病筛查工作5年以上，掌握新生儿遗传代谢病筛查网络运作和管理。2.试验室技术人员：中专以上学历，从事检验工作2年以上，含有技师以上职称，接收过省级以上卫生行政部门组织新生儿遗传代谢病筛查相关知识和技能培训并取得技术合格证。3.文案人员46新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第46页一、基本要求（三）设备要求。（四）房屋要求。1.试验室用房2间，使用面积最少40平方米以上。2.综适用房2间，最少20平方米以上，用于滤纸干血片验收、计算机录入和资料登记保留。3.血片储备室或冷库1间，用于滤纸干血片长久保留。4.房屋面积应该依据筛查量及筛查病种适当增加。47新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第47页二、实施标准与职责（一）必须符合《新生儿疾病筛查管理方法》及《医疗机构临床试验室管理方法》。（二）收到标本应该在24小时内登记，不符合要求标本应该马上退回重新采集。（三）采取国家要求试验方法，且含有国家同意文号试剂和设备进行检测。（四）必须接收卫生部临床检验中心质量监测和检验。（五）检测结果及时反馈，发觉漏检病例，须寻找原因。48新生儿遗传代谢病筛查采血技术实验技术规范化要求第48页二、实施标准与职责（六）必须建立以下试验室规章制度：1.人员分工责任制度。2.各种技术操作程序。3.质量控制管理制度。4.仪器管理及校准制度。5.试剂材料管理制度。6.标本登记保留制度。7