兽医寄生虫疫苗研究现状与展望

兽医寄生虫疫苗研究现状与展望

南京农业大学动物医学院院长李祥瑞教授1疫苗研究必要性抗药虫株药物研制费用升高公共卫生和食品安全生物学技术高度发展2已商品化的兽医寄生虫疫苗3Eimeria强毒苗

Coccivac

SeheringPloughAnimalHealth

含8种球虫

Immucox

Vetech

含4种柔嫩、毒害、巨型、堆型4Eimeria弱毒苗鸡胚传代致弱：始于英国、美国。现在很少用

理化致弱：加热、冷冻、辐射处理、化学诱导等

早熟株选育:

ParacoxSeheringPloughAnimalHealth

含7种主要球虫

LivecoxBiopharm(CzechRepulic)

含鸡胚致弱柔嫩株和堆型、巨型早熟株5Eimeria商品名致弱耐药虫种使用方法免疫对象生产商CoccivacD不不A、T、M、N、B、P、H、Miv饮水蛋/种鸡Scheringplough,美国CoccivacB不不A、T、M、Miv饮水/喷雾肉仔鸡Scheringplough,美国ImmucoxC1不不A、T、M、N饮水/硬胶肉仔鸡VetechLabs,加拿大ImmucoxC2不不A、T、M、N、B、Mi、P饮水蛋/种鸡VetechLabs,加拿大Paracox是不A、T、M2、N、B、Mi、P饮水蛋/种鸡Scheringplough,美国Paracox5是不A、T、M2、Mi喷饲肉仔鸡Scheringplough,美国LivacoxQ是不A、T、M、N饮水蛋/种鸡Biopharm,捷克LivacoxT是不A、T、M饮水肉仔鸡Biopharm,捷克NobilisCoxATM不是A、T、M2饮水/喷雾肉仔鸡Intervet,荷兰Eimeriavax是不A、T、M、N滴眼肉仔/种BioProperties,澳大利亚6Eimeria配子抗原亚单位苗(Wallach,1995)

Eimeriamaxima

母源免疫7Toxoplasmagondii

Toxovax

Intervet

用于羊致弱苗生活史不完整不形成组织包囊减少流产8Neosporacaninum

灭活速殖子牛减少流产9Babesia

Babesiacanis

体外培养上清中抗原犬减低发病10BabesiaBabesiabovis/bigemina

传代致弱苗牛本地工厂化生产应用11Theileria

Theileriaannulata

体外培养致弱牛本地工厂化生产应用12Theileria

Theileriaparva

非致弱苗牛本地工厂化生产应用13GiardiaGiardiaduodenalis

(Giardiafelis)GiardiaVaxFortDodge

速殖子犬、猫减少包囊排出、预防临床症状美国商品化14TaeniaTaeniaovis

基因工程疫苗

45W-GST(45W)（Johnson，1989）

绵羊带绦虫的六钩蚴抗原

E.coli中的表达产物。可以保护绵羊不受绵羊囊尾蚴的感染实验感染保护率达94%

TheUniversityofMelbournePitmanMooreNewZealandLtd.NewZealandMinistryofAgricultureandFisheries

第一个成功有效的抗寄生虫基因工程疫苗15EchinococcusEchinococcusgranulosus

抗细粒棘球蚴基因工程疫苗

EG95(Lightowlers1996)

六钩蚴抗原，天然抗原分子量为24.5kDacDNA表达产物为153个氨基酸分子量16.5kDa

表达系统E.coli

产物为谷胱甘肽转硫酶(GST)融合蛋白16Echinococcus细粒棘球绦虫来源 活棘球蚴包囊数/平均（范围）对照组免疫组保护率新西兰156.6(70-270)5.8(0-16)96新西兰256.0(32-445)7.5(0-44)97新西兰36.8(0-85)0.0(0)100澳大利亚4.7(0-16)0.2(0-1)96阿根廷23.1(2-64)0.1(0-1)99中国15.4(6-40)0.4(0-2)92EG95预防棘球蚴感染免疫试验结果17DictyocaulusDictyocaulusvivparus(牛胎生网尾线虫）

Huskvac

Intervet

Dictol

ScheringPloughAnimalHealth

辐射致弱三期幼虫牛仅在欧洲使用18辐照幼虫疫苗一次免疫所需剂量

虫体剂量胎生网尾线虫Dictyocaulusviviparus1000丝状网尾线虫Dictyocaulusfilaria1000犬钩口线虫Ancylostomacaninum1000捻转血矛线虫Haemonchuscontortus10000蛇形毛圆线虫Trichostrongyluscolubriformis40000-160000Dictyocaulus19BoophilusBoophilusmicroplus基因工程苗

Bm86

TickGardTM;TickGardPlusTMBiotechAustralia

E.coli表达产物

GavacT

HeberBiotecS.A.,Havana,Cuba

酵母表达产物重组蜱肠上皮抗原仅在澳大利亚古巴中南美国家用牛20Boophilus

疫苗诱导的抗体破坏蜱肠上皮细胞，使之裂解，进而影响蜱的采食。但不对蜱产生立刻影响蜱的出没可以减少20-0%

蜱的不同代之间数目可以减少70-90%

主要益处是产生生态效益，减少抗蜱化学药物的使用。但随着蜱的适应和变异，疫苗的效果可能会下降。需要不断改进21HypodermaHypodermalineatum纹皮蝇

一种抗纹皮蝇幼虫蛋白酶的基因工程疫苗已经在加拿大获得了证书22兽医寄生虫疫苗的获得手段通过特殊动物传代或在体外培养

使毒力降低，如牛巴贝斯致弱苗就是通过在切除脾脏牛体内反复传代获得筛选缺少某一生活阶段的虫株

如刚地弓形虫S48株就不能形成包囊筛选生活周期缩短的的虫株如早熟艾美尔球虫苗辐射致弱23兽医寄生虫疫苗存在的问题安全性问题目前的寄生虫疫苗主要为活苗，虽然可以产生一定的免疫保护，但毕竟是活的虫体，在特定的情况下，仍有致病的可能免疫保护效果有些寄生虫可以感染多重动物，其疫苗往往对某种动物保护效果较好，对另种动物效果较差，或者对不同年龄的动物保护效果不一致经济效益尽管有些疫苗免疫保护性好，但生产成本高、免疫方法复杂、与抗寄生虫药的广谱性相比具有较窄的保护范围均限制了疫苗在生产中的应用24兽医寄生虫疫苗展望－DNA疫苗

一DNA疫苗的概念

DNA疫苗（DNAvaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）裸DNA疫苗（nakedDNAvaccine）

DNA免疫（DNAimmunization）核酸免疫（Nucleicacidimmunization）基因免疫（geneimmunization）

遗传免疫（geneticimmunization25兽医寄生虫疫苗展望－DNA疫苗

将含有编码外源蛋白基因的质粒DNA，直接导入动物组织，外源基因在体细胞中表达后，表达产物被递呈，与MHC分子结合，刺激机体产生相应的抗体和细胞毒性T淋巴细胞，分别介导体液免疫和细胞免疫应答。这种外源基因是抗原的来源，具有疫苗的功能26兽医寄生虫疫苗展望－DNA疫苗二DNA疫苗的优点

1诱导平衡的体液免疫和细胞免疫

2可以构建多价疫苗

3免疫时间长

4成本低、稳定、便于储存和运输

5安全

6对免疫功能低下者效果较好

7可以激发特定的Th1或Th2免疫应答27兽医寄生虫疫苗展望－DNA疫苗28兽医寄生虫疫苗展望－DNA疫苗寄生虫方面的探索

日本分体吸虫绦虫疟原虫利什曼原虫隐孢子虫弓形虫锥虫球虫贾第虫疟疾DNA疫苗已获准生产2930兽医寄生虫疫苗展望

－细胞因子佐剂

细胞因子

细胞因子是机体免疫细胞或非免疫细胞产生的一组具有广泛生物学活性的异质性肽类调节因子，在体内能激活和调节免疫活性细胞，对免疫应答的产生和调节具有重要作用

31兽医寄生虫疫苗展望

－细胞因子佐剂细胞因子佐剂

IL-2IL-12IL-18GM-CSFIFN-γ32兽医寄生虫疫苗展望

－细胞因子佐剂细胞因子使用方式重组蛋白单独构建DNA疫苗与抗原基因串联构建DNA疫苗3334兽医寄生虫疫苗展望

－特异性抗体亚型刺激性抗原特异性抗体亚型刺激性抗原

在一些寄生虫病中，起主要保护性作用的往往是某一亚型的抗体，因此，通过筛选能够刺激这一亚型抗体的抗原，可以研究高效的疫苗疟疾

抗感染作用以IgG1和IgG3型抗体及其介导的细胞免疫为主，通过体外培养从疟疾病人分离的B淋巴细胞，筛选能够刺激产生特异性亚型抗体（IgG1、IgG3）的蛋白分子作为疫苗侯选抗原，对研究抗疟原虫疫苗具有重要意义35兽医寄生虫疫苗展望

－T细胞刺激性抗原T细胞刺激性抗原

能够刺激T细胞增值或活化T细胞的抗原

Breed等以抗原对T细胞的激发能力为标准来筛选鸡球虫抗原，取得了良好的效果36兽医寄生虫疫苗展望

－T细胞刺激性抗原37兽医寄生虫疫苗展望

－T细胞刺激性抗原38兽医寄生虫疫苗展望

－T细胞刺激性抗原抗原粗提液、3.0蛋白、3.2蛋白免疫保护试验。A.盲肠病变计分指标；B.增重指