微生物和微生物学检验培训专家讲座

《微生物和微生物学检验》主讲人邵蕾微生物和微生物学检验培训第1页第一篇绪论微生物和微生物学检验培训第2页一、微生物

二、微生物学(microbiology)三、医学微生物学发展简史四、临床微生物学任务五、临微学习方法微生物和微生物学检验培训第3页一、微生物（microorganisms）：概念：一群肉眼看不见微小生物，包含：细菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、放线菌（原核）、病毒（非细胞）、真菌（真核）。原核与真核细胞区分：细胞核区分微生物和微生物学检验培训第4页最新生物进化分类法：

古细菌：(Archaeobacteria)

嵌合进化或共生进化真细菌：真核生物：微生物和微生物学检验培训第5页微生物与人类关系：（1）大多数不致病，甚至是对人、动、植物有益和必需，如：固氮菌；酿酒、制醋、抗生素、肠道正常菌群。（2）病原微生物:pathogenicmicroorganisms微生物和微生物学检验培训第6页二、微生物学(microbiology)：微生物进化分类、生命活动规律及与动植物、人类、自然相互关系。按研究对象分：细菌、病毒、真菌学按应用领域分：工业、农业、医学、兽医按研究方向分：基础微生物、分子微生物学、微生态学等微生物和微生物学检验培训第7页医学微生物学(medicalmicrobiology)：与医学相关病原微生物生物性状、致病机理、免疫性及相关技术和理论应用。临床微生物学(clinicalmicrobiology)：测重研究感染性疾病诊疗方法，提供诊疗依据和指导用药。微生物和微生物学检验培训第8页三、医学微生物学发展简史1、微生物学经验时期：（１）酿酒、制醋、腌腊等食品生产、保留；（２）师道南《天愚集》：清乾隆年间，“东死鼠，西死鼠，人见死鼠如见虎。鼠死未几日，人死如圻堵”；“三人行未十步路，忽死两人横截路”（３）人痘接种法：免疫最早概念。微生物和微生物学检验培训第9页2．试验微生物课时期（17世纪始）：

显微镜＋培养基（１）微生物发觉：列文虎克、巴斯德（发觉微生物作用，创建巴氏消毒法）、李斯特、郭霍氏（固体培养、染色技术）郭霍氏法则：①、②、③、④。逐步被淘汰。新病原确定方法：核酸确定法

（２）免疫学兴起、分离：牛痘、巴斯德（霍乱、炭疽、狂犬疫苗）、白喉抗毒素动物血清治愈白喉。（３）抗生素发觉：当前碰到问题：滥用造成耐药性增高微生物和微生物学检验培训第10页3．当代微生物课时期：近二、三十年（1）新病原微生物发觉a．传统病原卷土重来；b．新型病原。（2）致病机理深入研究a．采取新技术；b.各种致病原因分子机理及调控。微生物和微生物学检验培训第11页（3）诊疗技术发展：三大标识技术各种分子生物学技术：核酸杂交，PCR，微量化，自动化。（4）各种新型疫苗研制传统疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗、DNA疫苗。（5）免疫学独立远远超越感染免疫范围。微生物和微生物学检验培训第12页思索：（１）预测微生物学发展下一阶段；（２）当前科学界研究热点？微生物和微生物学检验培训第13页4．基因组微生物学（１）微生物在基因组前时代在生物学研究中地位；（２）结构简单，可做为模型，模式生物；（３）在基因组时代，作为急先锋；（４）微生物基因组研究成功，必定极大地改变微生物学科现实状况。所以，微生物学研究正面临前所未有地机遇和挑战。从上看出，医学微生物学发展，也是各种技术方法发展，也是临床微生物学发展历史。

微生物和微生物学检验培训第14页四、临床微生物学任务１．研究感染性疾病病原体特征：传统病原微生物条件致病菌２．提供快速、准确病原学诊疗；３．指导合理使用抗生素；当前检验科主要任务。４．对医院感染进行监控。微生物和微生物学检验培训第15页五、临微学习方法：主要性：与毕业后工作紧密相关。（１）平时注意预习、复习；（２）对内容上，紧紧围绕诊疗，诊疗又是由各种经典特征建立方法来进行

抓特征、去共性（３）注意新动向。微生物和微生物学检验培训第16页第二篇微生物学

细菌学总论微生物和微生物学检验培训第17页一、细菌(bacterium)形态与结构二、细菌繁殖与新陈代谢三、消毒与灭菌四、微生物遗传变异五、微生物致病性与感染微生物和微生物学检验培训第18页一、细菌(bacterium)形态与结构（一）形态：个体微小、形态各异球菌（coccus）杆菌(Bacillus)弧菌与弯曲菌螺旋菌及螺旋体不规则形。微生物和微生物学检验培训第19页（二）结构：

微生物和微生物学检验培训第20页１．基本结构：包含胞壁、胞膜、胞浆及核质细胞壁：主要成份――肽聚糖。微生物和微生物学检验培训第21页

Ｎ－乙酰胞壁酸

聚糖骨架

β－１.4糖苷键

Ｇ－

Ｎ－乙酰葡糖胺四肽侧链Ｇ＋

五肽桥（苷氨酸）Ｇ＋菌肽聚糖厚、层数多、立体状坚固。

微生物和微生物学检验培训第22页图金黄色葡萄球糖细胞细胞壁肽聚糖结构图大肠杆菌细胞壁肽聚糖结构微生物和微生物学检验培训第23页

膜磷壁酸Ｇ＋菌细胞壁壁磷壁酸特殊结构表面蛋白：SPA、M蛋白Ｇ－菌细胞壁磷脂特殊结构脂蛋白

类脂Ａ：毒性部分(外膜)脂多糖（LPS，内毒素）：

关键多糖：属和组特异特异多糖：种和型特异微生物和微生物学检验培训第24页Ｇ＋和Ｇ－菌细胞壁差异：特征革兰氏阳性菌

革兰氏阴性菌

强度较坚韧较疏松厚度厚，20～80nm薄，5～10nm肽聚糖层数多，可达50层少，1～3层肽聚糖含量多，可占胞壁干重50～80%少，占胞壁干重10～20%磷壁酸+-外膜-+结构三维空间（立体结构）二维空间（平面结构）微生物和微生物学检验培训第25页Ｌ型细菌：细胞壁缺点型细菌。高渗培养基中：油煎蛋样菌落。在临床上注意Ｌ型带来漏诊。微生物和微生物学检验培训第26页2.特殊结构荚膜(capsule)：（１）保护作用；（２）致病作用：侵袭力；（３）免疫原性；（４）判别与分型。微生物和微生物学检验培训第27页鞭毛(flagellum)：运动器官，Ｈ抗原。微生物和微生物学检验培训第28页菌毛(Pilus)：（１）普通菌毛：粘附素；（２）性菌毛：１－４根，长而粗，Ｆ＋菌转移Ｆ质粒，耐药及毒力质粒。微生物和微生物学检验培训第29页芽胞(Spore)：不利环境中一个抵抗形式，是休眠体而非繁殖体。微生物和微生物学检验培训第30页二、细菌繁殖与新陈代谢：掌握几个概念：１．自养菌、异养菌；２．需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微需氧菌。微生物和微生物学检验培训第31页专性厌氧菌有氧不生长，原因有二：①厌氧菌缺乏细胞色素与细胞色素氧化酶，所以不能氧化那些氧化还原电势较高氧化型物质。②厌氧菌缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能去除有氧环境下所产生超氧离子（O2-）和过氧化氢（H2O2），因而难以存活。微生物和微生物学检验培训第32页３．群体细菌生长繁殖曲线：迟缓期、对数期、稳定时、衰退期微生物和微生物学检验培训第33页三、消毒与灭菌掌握几个概念：消毒（Disinfection）：杀灭病原微生物方法。灭菌（Sterilization）：杀灭物体上全部微生物（包含病原体和非病原体繁殖体和芽胞）方法。无菌（Asepsis）：物体上或容器内无活菌存在意思。防腐（Antisepsis）：预防或抑制微生物生长繁殖方法。微生物和微生物学检验培训第34页四、微生物遗传变异（一）遗传变异物质基础染色体

质粒（plasmid）：细菌存在于染色体外少部分（约1～2%）DNA，可决定细菌一些生物学特征。转位因子：插入次序、转座子、转座噬菌体微生物和微生物学检验培训第35页

质粒生物学性质：1．质粒并非细菌生存所必不可少遗传物质。

2．质粒传递（转移）是细菌遗传物质转移一个主要方式。

3．质粒可自行失去或经人工处理而消失。

4．质粒能够独立复制。

5．可有几个质粒同时共存在于一个细菌内。微生物和微生物学检验培训第36页（二）细菌变异现象形态与结构变异培养特征变异毒力变异耐药性变异微生物和微生物学检验培训第37页（三）细菌变异机制突变基因转移和重组转化（transformation）是受体菌直接摄取供体菌游离DNA片段，经过与染色体重组，取得了供体菌部分遗传特征。转导(transduction)是噬菌体为媒介，把供细菌基因转移到受体菌内，造成后者基因改变过程。接合(conjugation)是两个经过直接接触，在暂时沟通中进行基因转移过程。微生物和微生物学检验培训第38页微生物和微生物学检验培训第39页(四)遗传变异研究实际意义在细菌分类上应用在诊疗中应用在预防中应用在治疗中应用检验致癌物质作用在遗传工程方面应用微生物和微生物学检验培训第40页五、微生物致病性与感染（一）微生物与宿主关系

常居菌

正常菌群过路菌（１）抵抗力下降；（２）长久化疗、放疗、

条件致病菌：免疫抑制剂患者；（３）外伤；

（４）菌群失调：菌群失调症。微生物和微生物学检验培训第41页正常菌群生理意义：（１）生物拮抗；（２）促进机体免疫；（３）与衰老相关：双歧杆菌；（４）合成维生素和细菌素。微生物和微生物学检验培训第42页（二）细菌致病物质及作用：１．细菌表面成份：参加粘附、定植和侵入；２．毒素及毒性蛋白和酶：外毒素：内毒素：微生物和微生物学检验培训第43页细菌外毒素举例细菌种类革兰氏染色引发疾病毒素名称毒素作用方式白喉杆菌+白喉白喉毒素坏死性霍乱弧菌-霍乱肠毒素引发小肠过分分泌液体鼠疫杆菌-鼠疫鼠疫毒素可能坏死性破伤风杆菌+破伤风破伤风溶血毒素溶血性心脏毒素破伤风痉挛毒素引发骨骼肌痉挛产生荚膜杆菌+

气性坏疽α-毒素溶血性卵磷脂酶，坏死性β-毒素溶血性心脏毒素λ-毒素溶蛋白性微生物和微生物学检验培训第44页

外毒素与内毒素主要区分区分关键点