高考生物必备知识点DNA的粗提取与鉴定

2019年考必知DNA的提与鉴定查字典生物网的小编各位考生整理了2019年高考生物必备知识点的提取与鉴定望对大家有所帮助。更多的资讯请持续关查字典生物网。小编推荐：高考成绩理想，专科成绩也能上本科高考生物必备知识点的粗提取与鉴定一、实验原理DNA在氯化钠溶液中溶解度，是随着氧化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠物质的量浓度为2mol／时，DNA的溶解度最大，浓度．14mol时，DNA的溶解度最低用这一原理使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。DNA不溶于95%酒溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用一原理，可以进一步提取出含杂质较少的。DNA中含有脱氧核糖能与二苯胺（沸水浴）反应生成蓝色物质，因此，二苯胺以作为鉴定DNA试剂。高考生物必备知识点的粗提取与鉴定二、目的要求1.会DNA粗提和鉴定的方法。2.察提取出来的物质颜色和形状。材料用具材料：活鸡或鲜血鸡。仪器：离心机、恒温裕锅、载玻片，玻璃棒，滤纸，滴管，1页

量简（100mL，个杯100l个，mL、500mL各2个管（20mL，个斗试管夹，纱布。试剂酒精的体积分为的溶（验前置于冰箱内冷却24馏水，檬酸钠的质量浓度为0．1g／的溶液化钠的物质的浓度分别为2mol／和0015的溶液，二苯胺试剂高考生物必备知识点的粗提取与鉴定三、方法步骤实验前需要制备鸡血胞液（由教师完成制备的方法是：取柠檬酸钠的质量浓为1g／的溶液（抗凝剂）100mL置于500mL烧杯将宰杀活鸡流出的鸡（约180mL）注入烧杯中，同时用璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免凝血。后，将血液倒入离心管内，用1000r／的离心机离。此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时，用吸管除去。心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。1.提取鸡血细胞的细核物质将制备好的鸡血细胞mL注入到50烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20mL同时用玻璃棒充分搅拌min，使血细胞加速破裂。后，用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至。取其滤。2.溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量度为mol的液40mL入到滤液2页

中，并摇动烧杯，使混合均匀，这时DNA溶液中呈溶解状态。3.析出含的粘稠沿烧杯内壁缓缓加入馏水，同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌时烧杯中有丝物出现意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水，溶中出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加蒸馏水（这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于0.14molL4.滤取含的粘稠用放有多层纱布的漏过滤步骤3中溶液至500mL的烧杯中，含DNA的粘稠被留在纱布上。5.将的粘稠物再解取1个mL烧杯向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为2mol／L溶液20mL用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中，用璃择不停地搅拌，使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中。6.过滤含有DNA的氯钠溶液取1100mL烧杯用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液。取其滤液，溶滤液中。7.提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中入冷却的精的体积分数为95％的溶液50mL（使用却的酒精，对DNA的凝集效果较佳3页

并用玻璃棒搅拌，溶中会出现含杂质较少的丝状物。用玻璃棒将丝状物卷起，用滤纸吸取上面的水分。这种丝状物的主要成分就是。意观察丝状物是什么颜色的。8.DNA的鉴定取两支mL试管入化钠的物质的量浓度为0mol／L的溶液5mL，丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物解。然后，向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂混合匀后将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，观察且比较两支试管中溶液颜色的变化。将观察的结果填写在实验报告册》上。高考生物必备知识点的粗提取与鉴定1.DNA的粗提取与鉴实验原理(1)粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小当NaCl溶浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。(2)纯化原理DNA不于酒精但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。(3)鉴定DNA原理在沸浴条件下DNA遇二苯胺会被染成蓝色。2.实验材料的选择及理(1)不选择猪血等哺动物的血液，因为哺乳动物成熟的红4页

细胞无细胞核。(2)需要在鸡血中加抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。(3)需除去鸡血中的浆，因为血浆中无DNA。特别提醒：不同生物组织中DNA含不同在选取材料时，应本着DNA量高、料易得、便于提取的原则。3.生物实验过程步骤：提取细胞核物→溶解核内DNA→析出DNA粘稠物→滤取含DNA粘稠物DN粘稠物的再溶解→过滤含有DNA的氯化钠溶液→提取杂质较少的DNA→DNA鉴定。操作要点(1)2加馏水一次是在是为了使血细胞吸水膨胀破裂，加水后须充分搅拌使血细胞充分破裂第二次加蒸馏水是为了稀氯化钠溶液。(2)3次加氯化钠溶液第一次加氯化钠后必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解氯化钠溶液中第二次加氯化钠溶液也是为了的再溶，这时溶液中的蛋白质含量已很少;第三次加氯化钠溶液是为溶解DNA。(3)6次搅拌除最后次搅拌外前5次搅拌均朝一个方向:，并且在析出DNA、再溶和提取中，各步搅拌都要轻缓玻璃棒，不要直插烧底部防止DNA子断裂。(4)3次过滤：第一次滤，留滤;第二次过滤，留粘稠;5页

第三次过滤，留滤液注意这3次滤都用纱布，获得沉淀物或粘稠物的通常为层，获得滤液的纱布层数适当减少。特别提醒：若以植物实验材料，步骤上大致相同，在材料的处理上有几点不同一是增加研磨步骤，目的是破坏细胞壁二是加入洗涤剂目的是溶解细胞膜及核膜;三是加食盐，可加速细胞膜及膜的破裂。4.DNA的粗提取与鉴实验注意事项(1)用冷酒精浓缩和淀DNA时用的95%酒精须经过充分预冷后才能使用酒精与含DNA氯化钠溶液体积比是2：。如果用冷酒处理后，悬浮于溶液中的丝状物较少，可将混合液放于冰箱再冷却几分钟，然后再用玻璃棒卷起丝状物。(2)鸡血细胞破碎以释放的DNA容易被玻璃容器吸附由于细胞内的含量来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA