(68)-16.1概述及常用体内样品的制备与贮存

PharmaceuticalAnalysis

PharmaceuticalAnalysis体内药物分析

概述

体内药物分析（biopharmaceuticalanalysis）：是药物分析的重要组成部分，是生物样品（生物体液、器官或组织）中药物及其代谢物和内源性物质的定性、定量分析。概述

主要任务探讨药物进入人体内的“命运”，了解药物在体内数量和质量的变化，获得各种药物代谢动力学参数。体内样品的特点采样量少，待测物质浓度低，干扰物质多。常用测定方法色谱分析法，免疫分析法，生物学方法。常用体内样品的制备与储存

生物样品的种类生物样品脏器组织体液血液、尿液、唾液、毛发、乳汁、精液、脑脊液、泪液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、粪便等。常用体内样品的制备与储存

血液(血浆、血清)体现药物浓度和治疗作用之间的关系

——最常用的生物样本。尿液用于药物剂量回收、尿清除率、生物利用度、内源性活性物质、药物代谢分型及代谢物等的研究测定。唾液用于某些S/P较为恒定的药物的测定。常用体内样品的制备与储存

体内样品的采集与制备血液常用体内样品的制备与储存

血样的采集一般用注射器直接采集静脉血，每次1~5ml；动物实验时，采血量不宜超过动物总血量的十分之一。血样的制备测定血中药物的浓度，通常是指测定血浆或血清中的药物浓度，尤其是血浆，并非指全血。常用体内样品的制备与储存

采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中，混合后，以2500~3000r/min离心5~10min使与血球分离，所得淡黄色上清液即为血浆（plasma）。抗凝剂最常用的是肝素（heparin）。其它抗凝剂EDTA、枸橼酸盐、草酸盐等。血浆的制备01常用体内样品的制备与储存

采集的静脉血液置试管中，于37℃或室温放置30min-1h。血液凝固后，用细竹棒或玻璃棒轻轻剥去试管壁上的血饼，再在2500-3000r/min离心5-10min，上层淡黄色液体即为血清（serum）。血清的制备02常用体内样品的制备与储存

血清比血浆只是少一种纤维蛋白原C血浆=C血清血浆比血清的分离快，而且制取量约为全血的50%-60%（血清为全血的20%-40%），多数用血浆进行分析。若血浆中含有的抗凝剂对药物浓度测定有影响时，则应使用血清样品。血清与血浆的区别常用体内样品的制备与储存

全血的制备03将采集的血液置含有抗凝剂的试管中，但不经离心操作，保持血浆和血细胞均相状态，即为“全血”（wholeblood）。常用体内样品的制备与储存

全血的制备03某些情况血浆内药物浓度波动大，或血浆浓度低，可用全血（全血净化较血浆和血清麻烦）。例如三环类降压药在个别病人体内血浆和红血球中的分配比不是一个常数，故宜采用全血样品进行药物动力学的研究。常用体内样品的制备与储存

尿液(urine)尿液用于药物剂量回收、药物尿清除率、生物利用度的研究，预测药物代谢过程、类型。体内药物清除主要是通过尿液排出，药物以原型、Ⅰ相及Ⅱ相代谢物等多种形式排出。常用体内样品的制备与储存

尿液的采集样本来源自然排尿，成人一日排尿量为1~5L（随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿及时间尿）。样本采集一般采集时间尿（规定时间内）采集尿液体积和排入尿中的药物总量。常用体内样品的制备与储存

唾液（saliva）唾液—无损伤取样，易收集；一些药物的唾液药浓(S)与血浆游离药浓(P)密切相关，因此：TDM中利用对S的测定代替对P的监测药代动力学的研究常用体内样品的制备与储存

唾液采集在潄口后15min，安静状态下采集口腔内自然流出的唾液；也可在刺激下快速采样(需注意干扰)。常用体内样品的制备与储存

物理法01口嚼石腊片、聚四氟乙烯块或纱布球等。常用体内样品的制备与储存

化学法02将柠檬酸或维生素C等置于舌尖，弃去初始部分后采集。化学法的优点缩短采样时间减小唾液pH波（pH≈7.0），S/P个体差异小。常用体内样品的制备与储存

唾液样品的制备唾液样品采集后，应立即测量其除去泡沫部分的体积，以3000rpm离心10min，取上清液直接测定或冷冻保存。常用体内样品的制备与储存

唾液样品的特点非伤害性方法，病人易接受。采集不受时间、地点限制，易收集。非灵敏度较高的血药浓度测定方法可以直接或稍加改进使用。一些药物的唾液药物浓度(S)与血浆游离药物浓度(P)密切相关，可使用唾液样品。常用体内样品的制备与储存

生物样品的贮存与处理冷藏冰箱(4℃)中短期保存(1-2d)。冷冻冷柜(-20℃)或低温冷柜(-80℃)中长期保存。冷藏或冷冻时限经稳定性考察后确定常用体内样品的制备与储存

生物样品的贮存血样采集后及时分离血浆和血清（≤2h），分离后再贮存。——若不予先分离，血凝后冰冻保存，则因冰冻有时易引起细胞溶解，会阻碍血浆或血清的分离。——置硬质玻璃试管中完全密塞后保存。常用体内样品的制备与储存

尿样采集后应立即测定，若不能立即测定，加入防腐剂后保存。常用防腐剂：甲苯、二甲苯、氯仿、醋酸、浓盐酸等。甲苯在尿液表面形成薄膜。醋酸改变尿液酸碱性抑制细菌的生长。保存时间为24~36h(4℃)或长期(-20℃)常用体内样品的制备与储存

唾液为阻止酶催化生成粘蛋白，应在4℃以下保存——保存过程中放出二氧化碳而使pH升高，测定唾液pH时应在取样的当时为好。——冷冻保存唾液时，解冻后有必要将容器内唾液充分搅匀后再用，否则测