如何开展生物等效性试验

第1页，共62页，2023年，2月20日，星期六参考指南WHOWorkingDocumentMultisource(Generic)PharmaceuticalProducts:GuidelinesonRegistrationRequirementstoEstablishInterchangeability November2005EU“NoteforGuidanceontheInvestigationof BioavailabilityandBioequivalence” CPMP/EWP/QWP/1401/98andrelatedguidancesanddocuments(/pdfs/human/ewp)FDA-GuidanceforIndustry:“BioavailabilityandBioequivalenceStudiesforOrallyAdministeredDrugProducts–GeneralConsiderations”(Oct.2000)CanadianGuidanceforIndustry:“ConductandAnalysisofBioavailabilityandBioequivalenceStudies–PartA:OralDosageFormulationsusedforsystemiceffects.”(1992)……….anrelated/others第2页，共62页，2023年，2月20日，星期六背景知识通用技术文件CTD5.3临床研究报告5.3.1生物药剂学研究报告（生物利用度和生物等效性：“制剂对药物产生什么影响”）5.3.2.+5.3.3人体药代动力学研究报告（在患处和体内：“机体对药物产生了什么影响”）5.3.4人体药效学研究报告5.3.5有效性和安全性研究报告第3页，共62页，2023年，2月20日，星期六背景知识药物常通过各种剂型来摄取。剂型可以影响药物的生物利用度。药物制剂存在的差异可以导致不同的生物利用度。制剂差异的效果特别特别适用于口服剂型，这种效果可以通过吸收过程的所有阶段验证。体外试验能提供有价值的信息，但是这对于药品的生物利用度或临床试验不一定是一份可靠的指南。不能假设相似的剂型是具有治疗等效性，除非治疗等效性（生物等效性）已经在人身上得到验证。治疗等效性不能简单假设因为还没有治疗非等效的报道。

(nachD.N.Wadeaus‚DrugTreatment‘,GraemeS.Avery,1980,AdisPress,Sydney)第4页，共62页，2023年，2月20日，星期六定义生物利用度－活性成分从制剂中释放和扩散，逐渐被循环系统所利用（药品的特性）生物等效性－在规定的接受范围内具有相等的生物利用度。药剂等效性

生物等效性生物等效性

治疗等效值第5页，共62页，2023年，2月20日，星期六定义♦“如果两种药品具有药剂等效性或者药物替代性，以及在相同摩尔剂量给药之后两种药品的生物利用度达到相同的疗效，那么它们是生物等效药品。在有效性和安全性方面，本质上是相同的。”

（EU中BA和BE指南2.4节）Possiblesurrogateforfullclinical/toxicologicaldocumentation第6页，共62页，2023年，2月20日，星期六定义生物等效性是指：药学等效制剂或可替换药物在一个特定的试验中、相同条件下、相同摩尔剂量给药，其活性成分或者活性组成在药物作用部位吸收和扩散程度无显著性差异。FDAGuidanceforIndustryBioavailabilityandBioequivalenceStudiesfororallyadministeredDrugProducts-GeneralConsiderationsMarch2003FDA工业指南：口服制剂的生物利用度和生物等效性研究的总则2003年3月第7页，共62页，2023年，2月20日，星期六定义生物等效性主要是指制剂中活性成分具有相同的释放速度，以及接下来在体循环中具有同样的吸收。WHOWorkingDocumentMultisource(Generic)PharmaceuticalProducts:GuidelinesonRegistrationRequirementstoEstablishInterchangeabilityNovember2005WHO关于多来源（仿制）药品资料：如何建立可互换性的注册要求指导原则2005年11月第8页，共62页，2023年，2月20日，星期六定义如果药品吸收的部分剂量相同，人体就会对所吸收的化合物有相同的反应。即使在疾病期间，这一观点仍然是一个有效的依据。[Faassenetal.ClinPharmacokinet43(2004)1117]药物制剂会对药物成分产生什么影响？第9页，共62页，2023年，2月20日，星期六如何计划一个生物等效性试验生物等效性试验志愿者的体内比较作为“体内溶出度模型”生物质量控制比较药品特性，以确保治疗等效性第10页，共62页，2023年，2月20日，星期六伦理问题IEC/IRB:ICH的定义医学、科学及非科学领域成员组成的独立机构职责是确保试验中受试者的权利、安全及福利得到保障。除了其他的事情之外，要对试验方案、修改方案以及受试者获得及证明的知情同意书中涉及的试验方法和资料进行评价、批准、并提供持续评估。独立的“风险－收益”评估第11页，共62页，2023年，2月20日，星期六伦理问题ICHGCP的组成要求至少有5名成员至少有一名成员的主要研究领域是非科学领域至少有一名成员和试验无关成员之间没有利益冲突只有那些独立于研究者和申办者之外的成员可以对试验相关问题进行评估第12页，共62页，2023年，2月20日，星期六伦理问题例：美国FDA关于IRB组成的附加要求：多元化背景（种族、性别、文化、资历）不是同一种性别可以征用特别专家的意见，但是他们没有投票权第13页，共62页，2023年，2月20日，星期六伦理问题所需的文件方案（至少需要主要研究者签署）患者知情同意书研究者手册受试者招募过程（例如广告）第14页，共62页，2023年，2月20日，星期六伦理问题研究者批准通知作为试验报告的一部分及时书面批准试验确认（标题、方案号、版本、研究者、研究地点）明确所有要评估的项目评估的日期和地点试验/试验的相关决定修改和异议的原因至少提供的信息会议日期评估文件（版本和日期）成员名单第15页，共62页，2023年，2月20日，星期六试验方案第16页，共62页，2023年，2月20日，星期六试验方案描述试验目的、设计类型、研究方法、数据统计分析以及组织试验的文件通常能给出试验的背景和原理。

参考文献：ICHGCP指南第17页，共62页，2023年，2月20日，星期六试验方案总说明/标题页题目方案号版本号/日期试验委托人详细信息姓名、地址、电话监查员/医疗人员职责！第18页，共62页，2023年，2月20日，星期六试验方案总说明/标题页研究者详细信息主要研究人、医学管理人员其他实验室/试验机构详细资料职责！第19页，共62页，2023年，2月20日，星期六试验方案方案的制定研究职责的定义组织、地点、人员和质量管理规范（QMS）临床阶段（是否保证数据的及时传输？）生物分析阶段（是否保证数据的及时传输？）数据统计和汇报（是否保证数据的及时传输？）存档第20页，共62页，2023年，2月20日，星期六制定方案原料药/制剂基本特征如：药物动力学(半衰期，药峰浓度，药峰时间，药物代谢，差异性等?…)粗略预计的治疗期和清洗期的可行性(是否可以交叉设计实验?)第21页，共62页，2023年，2月20日，星期六制定方案原料药/制剂基本特征如：重要的副作用(可为健康志愿者接受，伴随用药的必要性，可接受的有关反应

(例如：呕吐)，是否可为怀孕女性接受？）第22页，共62页，2023年，2月20日，星期六制定方案原料药/制剂基本特征如：生物学分析方法的概念？足够的、可以计量的血浆浓度（最低检测限LOQ）？例如：必要或可能的情况下，服用一倍剂量以上的药品。第23页，共62页，2023年，2月20日，星期六制定方案制剂有效性证明性文件成分体外溶出度依据GMP要求准备每个志愿者服用的研究用药品协议中制剂具体细节的修改是必须的(例如：药品标签)第24页，共62页，2023年，2月20日，星期六制定方案制剂批次数量实验用批量?商业用批量?不能少于100000单位或一次工业生产批量的10%(高于上述任何一个都可以)第25页，共62页，2023年，2月20日，星期六制定方案制剂分析接近标签上所述关于研究用药品的成分上的差异(受试制剂和参比制剂)最好不要大于5%第26页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的选择健康志愿者的加入(“体内模型”)合理的入选和排除标准(方案和病例报告表CRFs)全部的口头和书面的信息以及知情同意书志愿者保险赔偿第27页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的选择男性或者女性或者男女不限?“…主办者可能希望既包括男性也包括女性…”(WHO)第28页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的选择女性要安全避孕(cave:是否能排除避孕药物对试验用药品的干扰？)志愿者的表现型(cave:可能的副作用，例如“弱代谢型”会导致退出试验;变异性降低/注释;强代谢型和弱代谢型均按照平行组设计分布)第29页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的选择志愿者的说明;吸烟者,素食者,表型….志愿者健康状况的检查(例如：心电图,临床血液化学，血压…)志愿者的数量取决于变异性;至少12名(EU:健康,18-55岁;FDA:男性或女性,>18岁)随机性

受试者:为检测药品的差异性必须使个体差异最小！第30页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的数目通过有效的研究文献和初步的研究结果得出的个体差异，决定了受试者需要的数目“低”差异性:~12–20名志愿者“高”差异性:~24–26名志愿者第31页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的数目受试者的数目取决于试验配方和参照配方预期的平均差；受试者数量的计算见文献(EurJDrugMetabPharmacokinet30(2005)41;JBiopharmStat13(2003)529;StatMed18(1999)93…)受试者可能退出试验的考虑因素第32页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的数目受试者的数目取决于期望的效果和能力水平受试者数量的计算见文献(EurJDrugMetabPharmacokinet30(2005)41;JBiopharmStat13(2003)529;StatMed18(1999)93…)第33页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的数目“参与到研究中受试者的人数，必须依据已经通过的标准来评估，依据对应的方法来计算(…)。新受试者人数也必须通过研究草案中的受试者人数计算方法证明有效。受试者最少12人。 WHO–workingdocumentonmultisource(generic)pharmaceuticalproducts(QAS/04.093)第34页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者退出受试者必须遵守试验的要求…但是

…受试者在任何阶段退出受试!在协议中对受试退出详细说明(包括原因,补偿政策,数据管理,后期的随访…)伴随治疗的药物报告第35页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者受试者的退出受试者必须遵守试验的要求但是

…依据药物成分的药动学确定出呕吐的时间限，例如：如果志愿者在服药后4小时内呕吐就必须退出。“提前确定!!”第36页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者交叉设计中的随机化

“拉丁方”

/平衡的/随机的同体对比!平行组设计重复设计志愿者第一阶段第二阶段1AB2BA………第37页，共62页，2023年，2月20日，星期六受试者其他例如.,平行组设计重复设计第38页，共62页，2023年，2月20日，星期六标准化操作药物摄取的过程服药的时间(断食期或进食阶段)口服液体的体积服药的可追溯性cave:例如：颗粒机、干混悬剂等剂型!(见‘方法页’)第39页，共62页，2023年，2月20日，星期六标准化操作禁食状态，例如.给药前至少10小时要限制受试者饮食最近一次进食~服药前10小时不能服用食物和水~服药前2小时给药期间~服用例如150-200ml水少量的标准化食物~服药4h后第40页，共62页，2023年，2月20日，星期六标准化操作服用标准化的食物和以液体(时间，组成，摄取量)严禁饮酒严禁花黄素的摄入(咖啡*,茶,可乐,巧克力,口香糖,柚子….)标准化的摄入方式限制体力活动…*cave:停止服用可能会引起头痛。第41页，共62页，2023年，2月20日，星期六标准化操作饮食情况规定服药和用餐时间(服用标准餐前30分钟服药，餐前服用，餐后服用)高脂肪饮食会严重影响研究结果第42页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品取样样品数量取样次数(药峰浓度!)取样时间(推断AUCmax.20%)洗脱期（不少于5个半衰期）必须对此药物成分的基础药代特征有一定了解目标，阐述药物的吸收。(seee.g.sect.3.1oftheEUguidance1401/98)第43页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品采样次数采样3-4次，描述药品的吸收药锋浓度附近取样3次采样3-4次，描述药物的排泄最小值！第44页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品采样次数采样数足以覆盖至少全部药时曲线(AUC)面积的80%.通常12-18个样本(至少)

第45页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品第46页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品第47页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品维拉帕米;生物等效性研究;Govi-Verlag1989第48页，共62页，2023年，2月20日，星期六特殊情况在截尾筛选方案里，最大血药浓度受到取样点的影响。基于异烟肼和吡嗪酰胺的高溶解性、高渗透性的分子，他们能够很快被吸收。最高血药浓度需要仔细的计算。药时曲线下面积是不受取样点影响的重要参数。[Panchagnulaetal.,PharmacolRes48(2003)383]第49页，共62页，2023年，2月20日，星期六特殊情况Panchagnulaetal.,PharmacolRes48(2003)383第50页，共62页，2023年，2月20日，星期六特殊情况Panchagnulaetal.,PharmacolRes48(2003)383第51页，共62页，2023年，2月20日，星期六特殊情况使用斯皮尔曼相关分析方法分析Cmax,AUCtandAUCinf这些药物动力学参数…结果显示11个采样点，分别在0,0.25,0.5,1,1.5,2,2.5,3,4,6,and8h,足够证明异烟肼，利福平，等药物的相对生物利用度和生物等效性，但是列表中的6个点，用来检测抗结核药固定剂量复合剂的生物利用度和生物等效性是不够可靠的。 [Gabrielsetal.,IntJTubercLungDis11(2007)181]

第52页，共62页，2023年，2月20日，星期六研究用样品洗脱期时间必须足够长以避免残药物残留与定量限紧密关系可能要考虑到代谢产物第53页，共62页，2023年，2月20日，星期六取样抽血