蛋白质化学-蛋白质的三维结构课件

第5章蛋白质的三维结构一、研究蛋白质构象的方法p197二、蛋白质的二级结构三、蛋白质的三级结构四、蛋白质的四级结构五、稳定蛋白质三维结构的作用力一、研究蛋白质构象的方法

p197（一）测定晶体蛋白质的分子构象的方法

X射线衍射法：（二）研究溶液中蛋白质构象的光谱方法1、紫外差光谱2、荧光和荧光偏振3、圆二色性4、核磁共振（一）测定晶体蛋白质的分子构象的方法X射线衍射法：迄今为止，完整而精细的晶态蛋白质分子三维结构的测定，几乎完全依赖于Ｘ射线晶体衍射分析法。可以提供多肽链上除氢原子外所有原子的空间排布信息。不能测定溶液中蛋白质分子的三维结构。二、蛋白质二级结构

Secondarystructruesofproteines(一)蛋白质的结构层次(二)蛋白质的二级结构(三)二级结构的基本类型(四)二级结构类型的代表性蛋白(五)超二级结构(六)结构域

（一）蛋白质的结构层次多肽链在三维空间上特定的走向与排布就是蛋白质的高级结构，也叫做空间结构、三维结构、立体结构，或叫做三维构象。

一级结构指蛋白质分子中的氨基酸的排列顺序。

二级结构指蛋白质多肽链的主链骨架中的若干肽段的构象、排列。所有蛋白质的主链结构相同，长短不同。三级结构指多肽链在二级结构的基础上，各原子的空间排布，包括侧链基团的取向，是二级结构的基础上范围更广的盘旋和折叠。四级结构是指多条肽链组成一个蛋白质分子时，各亚单位在寡聚蛋白质中空间排布及亚单位间的相互作用。（二）蛋白质的二级结构1、肽单位(Thepeptidegroup)p204构成肽链主链的基本单元，叫做肽单位——主链骨架重复单位，它包括两个α-碳原子及其中间的一个肽键，Cα-CO-NH-Cα，肽单位又叫肽平面

两面角决定了两个肽平面的相对位置，因此就决定了肽链主链的位置与构象。

当Φ(Ψ)旋转键两侧的主链呈顺式时，规定Φ(Ψ)=0°从Cα沿键轴方向看，顺时针旋转的Φ(Ψ)角为正值，反之为负值。3、可允许的Φ和Ψ值p205

——拉氏构象图(Ramachandrandiagram)

Ramachandran根据蛋白质中非键合原子间的最小接触距离，确定了哪些成对二面角（Φ、Ψ）所规定的两个相邻肽单位的构象是允许的，哪些是不允许的，并且以Φ为横坐标，以Ψ为纵坐标，在坐标图上标出，该坐标图称拉氏构象图。1、α-螺旋（α-helix)2、β-折叠（β-pleatedsheet)3、β-转角4、无规卷曲（RandomCoil)(三)蛋白质二级结构的基本类型（1)α-螺旋构象的结构特点

1950年Pauling提出

1、α-螺旋（α-helix)p207α-Helix:

（1）右手螺旋（Righthanded）呈圆筒状，且有偶极性（2）每3.6氨基酸绕一圈，每圈0.54nm高（螺距），每个残基绕轴旋转100°，沿轴上升0.15nm（3）氨基酸残基侧链向外（4）肽键上C=O氧与它后面（C端）第四个残基上的N-H氢间形成氢键，氢键封闭的环是13元环。氢键的取向几乎与中心轴平行

α-螺旋结构是一种不对称的分子结构：（1）α碳原子的不对称性（2）构象本身的不对称性

天然α—螺旋能引起偏振光右旋α-螺旋的比旋不等于构成其本身的氨基酸比旋的加和，而无规卷曲的肽链比旋则等于所有氨基酸比旋的加和。（2）α-螺旋结构的旋光性

（3）R侧链对α—螺旋的影响

①多肽链上连续出现带同种电荷基团的氨基酸残基,(如Lys，或Asp，或Glu)，不能形成稳定的α—螺旋。如多聚Lys、多聚Glu。②Gly在肽中连续存在时，不易形成α—螺旋。③R基大（如Ile）不易形成α—螺旋④Pro、羟脯氨酸中止α—螺旋⑤R基较小，且不带电荷的氨基酸利于α—螺旋的形成。如多聚丙氨酸在pH7的水溶液中自发卷曲成α—螺旋。（4）pH对α—螺旋的影响

4、无规卷曲（RandomCoil)

在一些蛋白，特别是在球蛋白中，一部分多肽链的主链骨架，即非螺旋构象，也非β-折迭构象，这些无规则肽链的构象就是无规卷曲。无规卷曲也是二级结构的一种结构单元，在这种结构单元的存在下，才使得蛋白质形成球形，这一部分的存在往往与蛋白的活性有关。

无规卷曲与其他二级结构一样是明确而稳定的结构。

(六)结构域

一些相对较大的蛋白质分子中，在空间折叠时往往先分别折叠成几个相对独立的区域，再组装成更复杂的球状结构，这种在二级或超二级结构基础上形成的特定区域称为结构域。它的结构层次介于超二级结构和三级结构之间。

结构域是球状蛋白的折叠单位较小的蛋白质分子或亚基往往是单结构域的。结构域一般有100－200氨基酸残基。结构域之间常常有一段柔性的肽段相连，形成所谓的铰链区，使结构域之间可以发生相对移动。结构域承担一定的生物学功能，几个结构域协同作用，可体现出蛋白质的总体功能。例如，脱氢酶类的多肽主链有两个结构域，一个为NAD结合结构域，一个是起催化作用的结构域，两者组合成脱氢酶的脱氢功能区。结构域间的裂缝，常是酶的活性部位，也是反应物的出入口三、蛋白质三级结构(一).三级结构的特点(二).肌红蛋白(Mb)的构象(三).一级结构与三级结构的关系(四).维持三级结构的作用力(一)三级结构的特点

一条多肽链中所有原子在三维空间的整体排布，称为三级结构，是包括主、侧链在内的空间排列。大多数蛋白质的三级结构为球状或近似球状。在三级结构中，大多数的亲水的R侧基分布于球形结构的表面，而疏水的R侧基分布于球形结构的内部，形成疏水的核心。蛋白质三维结构特征1、球状蛋白含有丰富的二级结构元件，而纤维状蛋白通常只含一种二级结构单元。2、球状蛋白具有明显的折叠层次（一级二级超二级结构域三级、亚基四级）。3、分子呈现球状或椭球状。4、疏水侧链埋藏在分子内部，亲水侧链暴露在外5、表面常常有空穴，配体结合部位（活性中心）(二)肌红蛋白(Mb)的构象三级结构形成后，生物学活性必需基团靠近，形成活性中心或部位，即蛋白质分子表面形成了某些发挥生物学功能的特定区域。

（三）一

级

结

构

与

三

级

结

构的

关

系四、寡聚蛋白的四级结构(一)寡聚蛋白的概念(二)亚基的聚合(三)亚基的空间排布(四)血红蛋白（Hb)的构象(一)寡聚蛋白的概念二个或二个以上具有独立的三级结构的多肽链(亚基)，彼此借次级键相连，形成一定的空间结构，称为四级结构。具有独立三级结构的多肽链单位，称为亚基或亚单位(subunit)，亚基可以相同，亦可以不同。四级结构的实质是亚基在空间排列的方式。

(二)亚基的缔合

血红蛋白（Hb)是四个亚基缔合而成，聚合动力：疏水作用（主要），二硫键，离子键，氢键等。亚单位即是结构单位，又是一个功能单位，但只有聚合在一起时，才真正地起生物学功能

(三)亚基的空间排布

（四）四级缔合在结构和功能上的优越性

1、降低比表面积，增加蛋白质结构的稳定性2、提高遗传经济性和效率3、使酶的催化基团汇集，提高催化效率4、具有协同效应和别构效应，实现对酶活性的调节（五）寡聚蛋白与别构效应

别构蛋白：除了有活性部位（结合底物）外，还有别构部位（结合调节物）。有时活性部位和别构部位分属不同的亚基（活性亚基和调节亚基），活性部位之间以及活性部位和调节部位之间通过蛋白质构象的变化而相互作用。

别构效应：别构蛋白的别构部位与效应物的结合改变了蛋白质的构象，从而对活性部位产生的影响。

同促效应（同位效应）：一种配体的的结合对于其它部位结合同种配体的能力的影响，包括（正）协同效应和负协同效应。同位效应一般是指活性部位之间的效应。同位效应是别构效应的基础，别构效应可以看成`是对同位效应的一种修饰

异促效应（异位效应）：就是别构效应，别