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文档简介

第九章灭菌及无菌操作

教师:罗国平

2012.09第九章灭菌法灭菌法:(Sterilization)指杀死或除去所有微生物的方法。微生物包括:细菌、真菌、病毒等。细菌的芽胞具有较强的抗热能力,因此灭菌效果,常以杀灭芽胞为准。消毒(Disinfection):是指用物理和化学方法将病原微生物杀死。防腐(Antisepsis):是指低温或化学药品防止和抑制微生物生长繁殖。一、物理灭菌法(一)干热灭菌法1、火焰灭菌法——火焰上加热20秒以上。灼烧是最迅速、可靠、简便的灭菌方法,适用耐火焰材质的物品、金属制品(药刀)、玻璃器皿(玻璃棒)以及瓷器等用具的灭菌。(二)湿热灭菌法——是在饱和蒸气或沸水或流通蒸气中进行灭菌的方法。由于蒸气潜热大,穿透力强,容易使蛋白质变性或凝固,所以灭菌效率比干热灭菌法高。特点:温度低,时间短,可靠,最常用。蒸气性质:饱和蒸气>湿饱和蒸气、过热蒸气、不饱和蒸气(2)使用热压灭菌器注意事项①必须采用饱和蒸气,在灭菌前加入足量的水,以防产生过热蒸气;②必须将灭菌器内的空气排尽;③灭菌时间必须从全部内容物均已达到规定温度时开始计算;④避免压力骤然下降或遇冷,防止容器炸裂;如:放气时不能过快;放完气后先将锅门打开10cm,使冷空气逐渐进入冷却,再逐渐开大;灭菌后喷淋冷却水快速降温也会有危险;⑤压力表和温度表应灵敏、准确,两表数值应相互对应;不同海拔高度,不应使用同一表压;⑥及时清扫异物,防止疏水器和排水管堵塞。5、低温间歇灭菌法80℃加热1小时→20-25℃保持24小时(让芽胞变为增殖体)→再加热,放置,反复三次,直至消灭芽胞为止。本法适用于不耐高温的制剂的灭菌。(三)紫外线灭菌法——254nm灭菌力最强(200-300nm)适用于:室内空气或表面灭菌。注:紫外线对人体照射过久,能产生结合膜炎、红斑及皮肤灼伤等。所以应对工作者的皮肤及眼睛作适当防护。(五)辐射灭菌γ射线(60Co)——不升温,穿透性强,特别适于已经包装好的产品。缺点:设备费用高,对某些药品可能产生药效降低、产生毒性物质或发热物质,同时还要注意安全防护。中药材以及中成药中的应用。(六)微波灭菌,高速热风灭菌二、化学灭菌法(一)气体灭菌法1、环氧乙烷机理:为烷化剂,与菌体蛋白质中的-COOH,-NH2,-SH,-OH基结合,使之产生不可逆性破坏。适用于:一次性注射器、输液器、注射针头、敷料,对热敏感固体药物等。2、臭氧:空间清毒,原水消毒。3、甲醛、丙二醇、乳酸熏蒸——室内空间的灭菌。(二)化学杀菌剂——物体表面灭菌。1、0.1%-0.2%新洁尔灭2、2%苯酚或甲酚皂溶液3、75%乙醇4、2%碱性戊二醛无菌检查:参照《中国药典》,对所有注射剂均要做此项目方法:1、直接接种法:取一定量供试品,以无菌操作将该供试品分别接种于需气菌、厌气菌培养基培养数日,在培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。2、薄膜滤

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