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文档简介

基因工程的基本操作程序获取目的基因从基因文库PCR化学方法人工合成构建基因表达载体目的基因、启动子、终止子、标记基因将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理法目的基因的检测与鉴定检测:是否插入、转录、翻译鉴定:个体生物学水平的鉴定基因工程的应用1.植物基因工程硕果累累①抗虫转基因植物方法:目的基因:从某些生物中分离出具有杀虫活性的基因,将其导入作物中,使其具有抗虫性Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等成果:转基因抗虫棉;转基因抗虫水稻等。目的基因:病毒外壳蛋白基因(CP基因)病毒的复制酶基因成果:抗烟草花叶病毒的转基因烟草抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等。1.植物基因工程硕果累累②抗病转基因植物抗病毒基因:几丁质酶基因抗毒素合成基因抗真菌基因:引起植物生病的病原微生物有:病毒、真菌和细菌1.植物基因工程硕果累累③抗逆转基因植物成果:A.利用调节细胞渗透压的基因,提高作物抗旱和抗盐碱能力;B.将鱼的抗冻蛋白基因转入番茄,提高番茄的抗冻能力。C.将抗除草剂基因导入农作物中,在喷洒除草剂时,杀死杂草而不杀死农作物。1.植物基因工程硕果累累④利用转基因改良农作物品质成果:A.将富含赖氨酸的蛋白质的编码基因导入玉米,获得的转基因玉米赖氨酸含量提高30%。B.将控制番茄成熟的基因带入番茄,获得转基因延熟番茄,储存期可以达2个月。C.将与植物花青素有关的基因导入矮牵牛中,转基因矮牵牛出现颜色变异。2.动物基因工程前景广阔①用于提高动物生长速度目的基因?举例说明②用于改善畜产品品质举例说明③用转基因动物生产药物如何操作?生产出哪些药物?④用转基因动物做器官移植的供体如何操作?2.动物基因工程前景广阔药用蛋白基因③用转基因动物生产药物(生物反应器或乳腺生物反应器)目的基因:过程:获取目的基因(药用蛋白基因)构建基因表达载体(药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组)显微注射(哺乳动物受精卵中)形成胚胎将胚胎送入母体动物发育成转基因动物(只有在产下的雌性动物个体中,转入的基因才能表达)动物进入泌乳期(分泌的乳汁中包含所需要的药物)为什么乳腺能成为基因药物最理想(1)乳腺是一个外分泌腺器官,乳汁不进入体内循环,不会影响基因动物本身的生理代谢反应(2)从乳汁中获取目的基因产物,产量高,易提纯,表达的蛋白质已经过充分的修饰加工,具有稳定的生物活性(3)从乳汁中源源不断获得目的基因的产物的同时,转基因动物又可大量繁殖2.动物基因工程前景广阔④用转基因动物做器官移植的供体供体动物:猪存在难题:解决方法:将供体基因组导入某种基因调节因子,以抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。免疫排斥3.基因工程药物在传统的药品生产中,某些药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。如胰岛素从生物胰腺中提取,干扰素从血液中提取。传统生产方法的缺点由于受原料来源的限制,数量少且价格十分昂贵。可利用什么方法来解决上述问题?

利用基因工程方法制造“工程菌”,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。基因工程药品——胰岛素3.基因工程药物

治疗侏儒症的唯一方法,是注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前,要获得生长激素需解剖尸体,从大脑的底部摘取垂体,并从中提取生长激素。现利用基因工程方法,将人的生长激素基因导入大肠杆菌中,使其生产生长激素。人们从450L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于6万具尸体的全部产量。基因工程药品——生长激素3.基因工程药物目前我国生产的基因工程药物有白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等。4.基因治疗基因治疗:基因治疗是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。这是治疗遗传病的最有效的手段。18体外基因治疗:从病人体内获取某种细胞进行培养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩大培养,最后重新输入患者体内。4.基因治疗治疗方法:利用修饰的腺病毒作为载体,将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者的肺部组织中。体内基因治疗:直接向人体细胞中转移基因基因芯片

环境监测:基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来基因诊断:基因诊断是用反射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针,利用DNA分子杂交原理,鉴定被检测标本上的遗传信息从正常人的基因组中分离出DNA与基因芯片杂交就可以得出标准图谱。从病人的基因组中分离出DNA与基因芯片杂交就可以得出病变图谱通过比较、分析两种图谱,就可以得出病变的DNA信息。基因工程中的关键词

目的基因受体细胞限制酶黏性末端磷酸二酯键DNA连接酶运载体质粒标记基因基因组文库cDNA文库

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