第7章植物快速繁殖和脱毒

第七章

植物快速繁殖和脱毒概念：植物的快速繁殖是应用组织培养技术，快速繁殖名优特新品种，使其在较短时间内繁衍较多的植株；快速繁衍珍稀濒危植物，使物种得以保存。

意义：1.能够有效地保持优良品种的特性；

2.生产无病毒种苗，防止品种退化；

3.快速繁殖新品种，使优良品种迅速应用；

4.繁衍珍稀濒危植物，使物种得以保存；

5.节约耕地，提高农产品的商品率；

6.便于运输。

优点：繁殖系数高，繁殖过程不受季节和环境条件的限制，不存在种子繁殖中存在的世代问题。

第一节植物快速繁殖的途径和方法器官型器官发生型胚状体发生型原球茎型球茎芽型块茎型鳞茎型孢子型根茎型微枝扦插型第二节继代培养继代培养subcultute：由最初的外植体切下增殖的组织转入到新的培养基培养的过程。驯化acclimation:外植体在含植物生长调节剂的培养基继代培养后，在含少量甚至没有生长调节剂的培养基仍能继续生长的现象。

衰退recession:外植体在继代培养中出现丧失形态发生的能力（生长发育不良，再生能力弱，繁殖力下降等）的现象。

衰退的原因：

1.植物材料：

继代繁殖能力：草本>木本，被子植物>裸子植物，年幼材料>老年材料，胚>营养体，芽>胚状体>愈伤组织

2.培养基和培养条件：

常改变培养基和培养条件来保持继代培养

3.继代培养的次数：

继代培养对繁殖率的影响因培养材料而异

4.季节

如百合鳞片分化能力：春季>秋季>夏季>冬季第三节快速繁殖中茎尖培养脱毒目前受病毒危害严重影响生产的有：大田作物：马铃薯、甘薯、甘蔗、烟草。蔬菜：白菜、大蒜、葱、番茄、萝卜。果树：柑橘、苹果、草莓、香蕉。花卉：香石竹、各种菊花、天竹葵、紫罗兰等病毒与真菌和细菌不同,不能用化学药剂防治,20世纪50年代,人们发现通过组织培养途径可以除去植物体内病毒。脱毒苗（无病毒苗）：不含有该种植物的主要危害病毒，即经过检测主要病毒在植物体内的存在表现为阴性反应的苗木。准确地说应称为“检定苗”。脱毒苗具备以下特点：1、产量提高2、品质提高3、抗病性增强一.病毒在植物体内的分布病毒入侵植物的一般路径入侵表皮或表层细胞——细胞间扩散——韧皮部——维管束——其它部分慢速转移（几微米/小时）快速转移茎尖生长点细胞病毒极少甚至无病毒的原因：茎尖分生组织无维管束，病毒在分生组织只能通过胞间连丝传递，其传递速度比不上分生组织的分裂和生长速度，因此，茎尖生长点细胞病毒极少甚至无病毒。

茎尖培养可去病毒外，还可除去细菌、真菌等其它病原体。茎尖大小与脱毒干净程度成反比，与茎尖成活成正比。二.无病毒苗的获取1、材料培养和灭菌2、茎尖剥离（切取带1~2个叶原基的茎尖）越快越好）3、茎尖培养4、提高脱毒效果1）高温处理（温热疗法）：温汤浸渍处理（50℃）和热风处理（35℃~40℃）2）低温处理（冷疗法）：低温处理数月才取茎尖3）化学处理（化学疗法）：如嘌呤和嘧啶类似物、氨基酸、抗生素和三氮唑核苷第四节其它途径脱毒愈伤组织脱毒原理：愈伤组织增殖速度比病毒复制速度快或产生抗病毒变异。此法外植体选择面广，脱毒苗变异率较高，生产上较少使用。珠心胚培养脱毒原理：珠心组织与维管系统无直接联系，又保持着母体植株的遗传特性，由它形成的珠心胚可作为外植体培育脱毒苗。多用于多胚性的植物，如柑橘、芒果等。茎尖微体嫁接脱毒：原理：多数病毒不经种子传播，所以用种子繁殖的实生苗不带病毒;茎尖培养能够脱毒。因此将微茎尖嫁接在幼嫩的无菌砧木上培养，从而获得无菌苗。注意事项：1.微体嫁接操作要精细；2.砧木必须是幼嫩材料，要求茎尖与砧木嫁接密合度高；3.嫁接成活率与接穗大小成正比，脱毒效果与茎尖大小成反比；4.多用于生根较困难的木本植物脱毒培养培育抗病毒栽培种这是最有效的脱毒方法，可以一劳永逸。可采用导入抗病毒的原生质体融合技术，得到抗病毒的杂交种。第五节脱毒苗的鉴定脱毒苗的鉴定包括两个方面：一是脱毒效果的鉴定；二是农艺性状的鉴定。一、脱毒效果的鉴定1.直接测定法：直接观察植株茎叶有无某种病毒引起的可见症状。缺点是不能快速鉴定；不能用于潜隐病毒鉴定。2.指示植物法：是指利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的标准，又称枯斑法。这些对病毒敏感并能产生专一性枯斑症状的植物称为指示植物，也叫鉴别寄主。

指示植物分为：1.接种病毒后产生系统性症状，病毒可扩展到植株非接种部位，通常没有局部病斑的植物。2.只产生局部病斑，常为坏死、褪绿或环状病斑的植物。

对指示植物的要求：1.根据病毒的种类不同，选择合适的指示植物。2.一年四季都能栽培和容易接种。3.能够较长时期内保持对病毒的敏感性。4.在较广范围内具有同样的反应。3.抗血清鉴定法4.酶联免疫吸附法5.电子显微镜检查法6.免疫吸附电镜法无病毒苗的隔离保存无毒苗再感染的途径昆虫传染病毒土壤传染病毒接触传染病毒相应措施建隔离网室（300目）及时打药，土壤消毒，灭真菌、线虫等对可能接触的工具物品等进行消毒。无病毒苗的长期保存保存方法在培养基中加生长延缓剂、在5-25℃培养且隔2个月以上继代一次。低温（4℃）