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#哥伦比亚琼脂培养基哥伦比亚琼脂培养基(ColumbiaAgarBase)用途:用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》2010年版)。原理:酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、肉胃酶消化物、酵母浸出粉、可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子;羊血是细菌生长繁殖的良好营养物质。在45~50弋的基础培养基中加入血液可以保存血液中某些不耐热的生长因子,同时血球不被破坏。庆大霉素能抑制肠杆菌科和铜绿假单胞菌的生长。配方(每升):酪蛋白胰酶消化物10.0g心胰酶消化物3.0g玉米淀粉1.0g肉胃酶消化物5.0g酵母浸出粉5.0g氯化钠5.0g琼脂15.0g最终pH7.3±0.2使用方法:1称取本品44.0g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121°C高压灭菌15min,在45~50°C,每100.0毫升培养基加入5.0~10.0ml无菌脱纤维羊血,可配成血琼脂如检测梭菌每100ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0160)(33.3mg/L硫酸庆大霉素),均匀,倾注平板。2、接种菌株至平板上划线,35~37C厌氧培养18~24小时;(药品)取培养物0.2ml涂抹于平板30~35C厌氧培养48~72h。3、观察结果。质量控制:下列质控菌株接种至本培养中于35~37C培养24h结果如下:(添加血)菌名菌号生长状况培养特征单核细胞增生李斯特氏菌CMCC(B)54002良好窄小P溶血环金黄色葡萄球菌ATCC6538良好P溶血环乙型溶血性链球菌CMCC(B)32210良好P溶血环肺炎链球菌CMCC(B)31001良好a溶血环下列质控菌株接种至本培养中于30~35°C培养48~72h结果如下:(添加庆大霉素)菌名菌号生长状况培养特征产气荚膜梭菌ATCC13124良好灰白色铜绿假单胞菌CMCC(B)10104抑制--大肠埃希氏菌CMCC(B)44102抑制--贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。规
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