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文档简介

血球计数板使用及相关计算

计数培养液中酵母菌种群数量的要点:1.每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7天。2.从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几下,这样使酵母菌分布均匀,求得的培养液中的酵母菌数量误差小。3.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养液进行稀释。具体方法是:摇匀试管,取1mL酵母菌培养液,加入成倍的无菌水稀释,稀释n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。4.活酵母有出芽生殖现象,若芽体达到母细胞大小的一半时,即可作为两个菌体计数,若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。5.对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数,一般可采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则处理,另两边不计数。6.计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算,对每个样品可计数三次,再取其平均值。例1、有关“探究培养液中酵母菌数量动态变化”的实验,正确的叙述是A.改变培养液的pH值不影响K值(环境容纳量)大小B.用样方法调查玻璃容器中酵母菌数量的变化C.取适量培养液滴于普通载玻片后对酵母菌准确计数D.营养条件并非影响酵母菌种群数量变化的唯一因素(参考答案:D)

例2、为探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,某同学进行了如下操作。其中操作正确的有▲(填下列操作的序号)。①将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的锥形瓶中,在适宜条件下培养②静置一段时间后,用吸管从锥形瓶中吸取培养液③在血球计数板中央滴一滴培养液,盖上盖玻片④用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液⑤将计数板放在载物台中央,待酵母菌沉降到计数室底部,在显微镜下观察、计数参考答案:①④⑤推导:1mm×1mm方格的计数

1mm×1mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm,所以计数室的总体积为0.1mm3。

1.16×25型的计数公式:

酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/100×400×10000×稀释倍数

2.25×16型的计数公式:

酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/80×400×10000×稀释倍数

假设:计数室内酵母菌为a个,稀释倍数为b,则10mL培养液中酵母菌总数为:a×105×b

例4、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先▲后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有▲个。(参考答案:稀释;2×108)5×400×10000×10=2×108。例6、在用血球计数板(2mm×2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16个,据此估算10mL培养液中有酵母菌

▲个。(参考答案:2×107)

总结:2mm×2mm方格的计数

2mm×2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3。

计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,另一种是25×16型。

假设:计数室内酵母菌为a个,稀释倍数为b,则10mL培养液中酵母菌总数为:a/4×105×b1.16×25型的计数公式为:

酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/100×100×10000×稀释倍数

2.25×16型的计数公式为:

酵母细胞个数/1mL

=80个小方格细胞总数/80×100×10000×稀释倍数

例7、跳虫、甲螨和线虫是土壤中的主要动物类群,对动植物的分解起重要作用。请回答:(1)由于跳虫和甲螨活动能力

,身体

,不适合用手直接捕捉,常采用吸虫器等进行采集。(2)现要采集大量的跳虫用于实验室培养,最好选择下图中的吸虫器

,理由是

。若要采集大量的甲螨作为标本保存,最好选择吸虫器

,理由是

。(3)现在一培养罐内同时培养跳虫、甲螨和线虫三个种群,若他们均仅以罐内已有的酵母菌为食,则跳虫与甲螨之间的关系是

,线虫与酵母菌之间的关系是

。若跳虫种群所含能量增长nKJ,则跳虫消耗的酵母菌所储存的能量至少为

KJ。解析:从例5来看,是按照血球计数板的原理进行设

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