大孔吸附树脂法课件

FractionationMerhodsofNaturalDrugs天然药物分离方法（2）大孔树脂吸附法概述中药有效成分的不断阐明中药现代化的要求当前用于中药纯化的主要技术：

溶剂法：沉淀法：

色谱法：大孔吸附树脂、离子交换树脂、聚酰胺、葡聚糖凝胶等

超临界流体萃取法：超滤法：结晶法：一、树脂简介1、常用树脂的类型凝胶树脂大孔树脂离子交换树脂离子交换树脂的种类种类活性基团1强酸性磺酸基(SO3H)2弱酸性磷酸基(PO3H2)、羧酸基(COOH)3强碱性Ⅰ型：三甲基胺(-N+(CH3)3)Ⅱ型：二甲基乙醇胺(N+(CH3)2C2H4OH4弱碱性伯氨基(-NH2)、仲氨基(-NHR)、叔氨基(-NR2)5两性强碱＋弱酸弱碱＋弱酸3、大孔吸附树脂目前国产树脂的主要类型致孔剂：甲苯、石蜡、溶剂汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等三菱化学的大孔吸附树脂聚苯乙烯系列合成树脂：Diaion:HP20,HP21Sepabeads:SP825,SP850Sepabeads:SP70,SP700修饰的聚苯乙烯系列合成树脂:Sepabeads:SP207异丁烯系列合成树脂:Diaion:HP2MG大孔吸附树脂的主要理化性质颜色：白色、乳白色至微黄物理化学性质稳定，不溶于任何酸、碱及有机溶剂，加热不溶，可在150℃以下使用含水量：60～80％堆积密度：0.6～0.9影响树脂性能的主要因素及国产树脂存在的主要问题交联度比表面积吸附容量粒度分布强度1、树脂预处理的方法回流提取法渗漉法水蒸气蒸馏法2、树脂预处理的溶剂乙醇丙酮异丙醇2～5％盐酸2～5％氢氧化钠3、渗漉法纯化树脂色谱柱：不锈钢柱；径高比为1:3～1:7装柱：湿法装柱洗脱溶剂：①乙醇→2～5％盐酸→2～5％NaOH→水②甲醇→2～5％盐酸→2～5％NaOH→水③混合溶剂→2～5％盐酸→2～5％NaOH→水洗脱方法：①乙醇法：乙醇浸泡12h→2BV洗脱→浸泡3～5h→2BV洗脱→浸泡3～5h→3～5BV洗脱→浸泡3～5h→3～5BV洗脱→2～3BV盐酸浸泡2～4h→洗脱→水洗脱→2～3BVNaOH浸泡2～4h→洗脱→水洗脱②混合溶剂法：混合溶剂浸泡12h→2BV洗脱→浸泡3～5h→2BV洗脱→浸泡3～5h→3～5BV洗脱→2～3BV盐酸浸泡2～4h→洗脱→水洗脱→2～3BVNaOH浸泡2～4h→洗脱→水洗脱③新方法：乙醇浸泡3～5h→3～5BV乙醇洗脱→2～3BV盐酸浸泡2～4h→洗脱→水洗脱→2～3BVNaOH浸泡2～4h→洗脱→水洗脱四、大孔吸附树脂在新药研究中的应用1、适用的新药类型中药有效成分的粗分和精制单味中药有效部位的制备中药复方有效部位的制备注意：①性质相似成分可混煎后一起制备②各味药所含成分性质差别较大的复方应单独提取后，再制备③单味药有效成分性质差别较大的应分别制备2、成分的类型与树脂的选择脂溶性成分包括甾体类、二萜、三萜、黄酮、木脂素、香豆素、生物碱等：应选择非极性或弱极性的树脂，如D101、AB-8、HPD100等皂苷和生物碱苷类成分：应选择弱极性或极性树脂，如D201、D301、HPD300、HPD600、AB-8、NKA-9等黄酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等：应选择合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的树脂，如D201、D301、HPD600、NKA-9等环烯醚萜苷类成分：应选择极性树脂，如D301、HPD600、NKA-9等4、树脂分离条件的正交试验表头的设计

因素药材－树脂色谱柱洗脱流速收集洗脱水平比例径高比BV/h液量11:11:31321:21:52531:31:737实例一：某中药中苯乙醇苷类成分的分离、精制该中药所含的成分：苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类、多元醇、水溶性生物碱、单糖、双糖、氨基酸等1、树脂型号的考察3、洗脱液乙醇浓度的考察

乙醇浓度20％40％60％80％洗脱量9倍5倍4倍3倍检出杂质脂溶性脂溶性成分成分4、收集洗脱液量的考察第一次洗脱第二次洗脱洗脱溶剂水洗脱40％乙醇洗脱收集量45TLC检测未检出糖难检出苯乙醇苷洗脱溶剂水洗脱40％乙醇洗脱收集量34TLC检测未检出糖难检出苯乙醇苷5、成品中有机残留物的限量检查检查方法：气相色谱法检查成分：应根据树脂合成中所接触的有机成分确定检查成分测定方法：顶空进样或溶剂法含量限度：苯：2ppm；其它：20ppm方法学考察：①溶剂的气相色谱检测②基线噪音和最低检测限的测定③对照品的测定④供试品的测定标准的书写格式①色谱条件和系统适用性试验②对照品溶液的制备③供试品溶液的制备④测定法⑤起草说明五、大孔吸附树脂在中药及植物提取物生产中的应用1、槐花米中黄酮苷类成分的分离、纯化槐花花穗9.9kgMeOH提取36LHP20吸附MeOH溶解50％-10L+100%-10LLH-20吸附MeOH溶解CHP20P吸附50%EtOH流份ODS层析分离45%MeOH洗脱3`,4`,5`,7`-四羟基黄酮