第二节杀虫剂在昆虫体内的代谢

第二节杀虫剂在昆虫体内的代谢第1页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁一、初级代谢氧化代谢：微粒体多功能氧化酶（microsomalmixedfunctionoxidase,MFO）还原代谢：水解：酯酶（esterases）脱卤化代谢：第2页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁微粒体多功能氧化酶（microsomalmixedfunctionoxidase,MFO）:是分布于动物某些细胞的光滑内质网上的一种氧化酶系，在还原型辅酶Ⅱ及分子氧的参与下，催化各种各样的外源物和内源物氧化。

氧化代谢分布：脊椎动物中主要分布于肝、肺、肾、肠等器官中，在昆虫体内则主要分布于中肠、脂肪体、马氏管等器官中。组成：多功能氧化酶的主要组分包括二种类型的细胞色素(细胞色素P450和细胞色素b5)、二种黄素蛋白(NADPH―细胞色素P450还原酶和NADH－细胞色素b5还原酶)及磷酯等。第3页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁催化机制：单氧加氧酶

RH+NADPH+O2NADP++ROH+H2OMFO催化的反应类型：羟基化反应、脱烷基反应、硫醚氧化及酯氧化反应、环氧化反应微粒体多功能氧化酶MFO第4页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁农药在动物体内进行还原形式的代谢较多地发生于那些含硝基苯核或含卤原子的化合物中。它们经细菌或酶的作用，被转化为相应的氨基化合物及脱卤的代谢物。不过农药结构上卤原子的脱除，还原并非是唯一的途径。还原第5页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁在农药的初级代谢中，以微粒体多功能氧化酶最为重要，但也有一部分农药的初级代谢是水解作用。特别是有机磷农药中有许多种是以水解为主的，其他如氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类杀虫剂的代谢也涉及水解。下面将根据化合物的类别及相关酶系分别加以叙述。酯酶(esterases)是催化水解代谢的主要酶系，但酯酶的分类比较混乱。有时所用的术语仅描述某些反应。如“磷酸酯酶”水解P-O-C键，“酰胺酶”水解酰胺键，“羧酸酯酶”水解羧酯键等。水解

第6页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁很多农药都是含卤素的化合物，在动物体内脱卤素反应的解毒代谢非常普遍。例如已证明在昆虫体内DDT由脱氯化氢酶的作用而变成DDE，而在哺乳动物体内则变成DDD和DDA。又如林丹，在昆虫体内，先在谷胱甘肽转移酶作用下和谷胱甘肽作用，然后再脱去HCl而生成苯硫酚。而在哺乳动物体内则逐步脱氯化氢形成三氯苯，再羟基化成三氯苯酚。脱卤化代谢第7页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁二、次级代谢动物体内的初级代谢产物往往仍没有足够的水溶性，尚需经过次级代谢，生成完全溶于水的轭合物，通过排泄系统排出体外。轭合作用是一种生物合成过程，具有下述几个特点:（1）与轭合作用有关的酶系分布广泛，因此，轭合作用在胞液、线粒体或内质网中都可发生。（2）轭合作用是合成反应，要消耗能量，需要ATP、乙酰辅酶A等的供应。（3）一般被轭合的化合物都含有－OH，－NH2，－COOH等基团。不带这些基团的化合物需先经氧化、水解、还原等初级反应后才能被轭合。动物体内主要的轭合作用有：葡萄糖醛酸轭合、葡葡糖轭合、硫酸盐轭合、谷胱甘肽轭合及氨基酸轭合等。第8页，共33页，2023年，2月20日，星期一谷胱甘肽(GSH)轭合是农药在动物中解毒代谢的重要途径，与前述4种轭合作用不同的是，谷胱甘肽并非一定要和强极性的初级代谢产物反应，而是可以直接参与农药的初级代谢，和亲脂性强的农药直接轭合，尤其在有机磷酸酯农药的解毒代谢中，在谷胱甘肽-S-转移酶的作用下脱烷基反应。一般来说，脱去甲基比较容易，脱去乙基、丙基就比较困难，而且往往只脱去1个甲基，2个甲基同时脱去就十分困难。谷胱甘肽轭合过程如下：首先是底物（RX）与谷胱甘肽在谷胱甘肽－S－转移酶的作用下轭合形成一个轭合物。这个轭合物由谷氨酰转移酶作用转变为半胱氨酸轭合物，半胱氨酸轭合物再依次经半胱氨酰转移酶和乙酰转移酶作用，最后形成硫醚氨酸。谷胱甘肽轭合作用中关键酶称为谷胱甘肽－S－转移酶（glutathioneS-transferase，简称GST）。在哺乳动物中，GST主要分布在肝细胞中。在昆虫中，GST主要分布在脂肪体中。GST实际上是一酶系，按其底物特异性可分成：（1）谷胱甘肽－S-烷基转移酶该酶转移的烷基包括硝基烷烃、卤代烷或烯烃、烷基有机磷化合物。例如甲氧基有机磷农药转化为去甲基有机磷。（2）谷胱甘肽－S－芳基转移酶该酶转移的芳基包括简单的、复杂的芳环、硝基呋喃、三嗪等。如二嗪农的代谢。第9页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节杀虫剂的作用方式与作用机理概述作用方式：指杀虫剂进入昆虫体内并到达作用部位的途径和方法。作用机理：指杀虫剂进入虫体后与靶标的作用，即对昆虫的酶系、受体及其他物质的作用，及由此对虫体产生的影响和后效应。第10页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁一、杀虫剂的作用方式触杀作用胃毒作用熏蒸作用内吸作用常规杀虫剂特异性杀虫剂拒食作用忌避作用引诱作用不育作用生长发育调节作用第11页，共33页，2023年，2月20日，星期一第二章昆虫的体壁二、杀虫剂的作用机理杀虫剂

神经毒剂呼吸毒剂消化毒剂：

B.t等生长调节剂

生殖毒剂：喜树碱等行为干扰剂轴突毒剂：

DDT、除虫菊酯类前突触膜毒剂：环戊二烯类胆碱酯酶抑制剂：有机磷类、氨基甲酸酯类乙酰胆碱受体毒剂：烟碱类、沙蚕毒素类GABA受体毒剂：锐劲特、Avermectin、环戊二烯类章鱼胺受体毒剂：杀虫脒类其它外呼吸毒剂：矿物油、砷素剂等内呼吸毒剂：磷化氢、鱼藤酮等保幼激素类似物：双氧威、灭幼宝等抗保幼激素类似物：早熟素等几丁质合成抑制剂：磺酰脲类、噻嗪酮蜕皮激素类似物：虫酰肼等信息素：性信息素、聚集信息素等拒食剂：印楝素忌避剂：某些植物源物质拒产卵剂：某些植物源物质其它其它类：吡蚜酮等第12页，共33页，2023年，2月20日，星期一第四节昆虫的神经生理作用方式：指杀虫剂进入昆虫体内并到达作用部位的途径和方法。作用机理：指杀虫剂进入虫体后与靶标的作用，即对昆虫的酶系、受体及其他物质的作用，及由此对虫体产生的影响和后效应。第13页，共33页，2023年，2月20日，星期一第五节神经毒剂杀虫药剂中绝大部分是神经毒剂，均是阻断神经传导，而不是直接杀死神经细胞。张宗炳按照神经毒剂的毒理机制分为六大类：（1）影响轴突传导的药剂，如DDT及除虫菊酯类化合物；（2）影响突触的乙酰胆碱传导的药剂，又可分为四类：（a）引起乙酰胆碱过度释放的，如六六六、狄氏剂等；（b）抑制胆碱酯酶的，如有机磷及氨基甲酸酯类等；（c）抑制胆碱乙酰化酶导致乙酰胆碱消耗尽的药物；（d）占领乙酰胆碱受体的药物，如烟碱、沙蚕毒素等；（3）影响突触其他神经传导体的，可能还涉及到膜的敏感性的药物，如杀虫脒等。第14页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制

——静息电位

离子在神经细胞膜内、外分布的不均一性和神经细胞膜对离子通透的选择性，使神经细胞膜在无外来刺激时，处于外正内负的极化状态，膜内外这时的电位差叫静息电位（restpotential）。

——动作电位

当神经细胞接受到传入信号刺激后，膜对离子的通透性发生改变，产生去极化，从而引发了瞬时的内正外负的动作电位（actionpotential）。

神经活动的基础是神经细胞的跨膜电位，刺激使膜的通透性发生变化，引起动作电位的发生。神经传导包括轴突传导和突触传导。神经生理轴突传导

第15页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－－－－－－－－－－－－－动作电流去极化区极化区轴突膜轴浆K+膜极化（董南平衡）静息电位Na+膜去极化动作电位刺激——动作电位的产生与传导第16页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制——突触结构

突触（synapses）是神经元间、神经与肌肉间、神经与腺体间的连接点，是神经传导的联络区。由突触前膜、突触后膜和突触间隙3部分组成。1个神经元细胞通常与多个神经细胞形成输入和输出突触。——突触类型

分化学突触和电突触两类。电突触——间隙很窄（3.5nm），靠直接电偶合即可传递信息，且速度很快，但在昆虫中很少存在。化学突触——间隙较宽（20～25nm），靠化学递质传递神经活动信息，速度较慢，在昆虫中普遍存在。突触传导第17页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制电突触电突触电源前突触膜后突触膜间隙连接蛋白复合体电流通过间隙汇合处突触传导第18页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制——化学突触树-树突触刺激脉冲化学突触轴-体突触兴奋性突触电流抑制性突触电流抑制性轴突兴奋性前突触轴突神经-肌肉突触肌肉兴奋性神经元前突触上神经末梢抑制性神经元肌纤维上神经末梢突触传导第19页，共33页，2023年，2月20日，星期一——化学突触及其传导

化学突触的前膜膨大成突触小结（synapticknob），小结中含有许多内含神经递质的突触小泡。在以乙酰胆碱（acetycholine，Ach）为递质的突触中，每个小泡内含数万个Ach分子。动作电位传导到突触前膜时，引起膜上对电压敏感的Ca2+通道打开，使膜外的Ca2+进入膜内，促使突触小泡与突触膜融合成“Ω”状，Ach从开口处释放到突触间隙。

突触后膜略膨大，膜上有与Ach特异性结合的受体蛋白。Ach到达后膜便与之结合，引起受体分子构象发生改变，离子通道随之打开，使Na+

、K+的通透性改变，导致膜去极化，产生突触后电位，将冲动传递到下一个神经元。第三节神经的传导机制突触传导第20页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制——昆虫神经元突触间Ach传导示意图

在突触间隙存在有乙酰胆碱酯酶（AchE），可将Ach及时水解成乙酸（Ac）和胆碱（Ch）；二者又被突触前膜吸收，在胆碱乙酰化酶作用下，合成Ach备用。CH3CH3CH3CH3乙酰胆碱酯酶胆碱乙酰化酶（乙酰胆碱）（乙酸）（胆碱）CH3COOCH2CH2-N-CH3+H2OCH3COOH+HOCH2CH2-N-CH3突触间隙突触前膜（半胆碱）突触小泡突触前端丛递质释放点轴丘树突端丛EPSP递减传布突触前电位峰ChHC-3Ac+Ch—AchAchAchAchAchAchCa2+AchRAc+ChAchE突触后膜突触传导第21页，共33页，2023年，2月20日，星期一神经突触结构和突触传导第三节神经的传导机制突触传导第22页，共33页，2023年，2月20日，星期一第三节神经的传导机制

——昆虫神经递质与脊椎动物的不同脊椎动物昆虫乙酰胆碱谷氨酸谷氨酸乙酰胆碱中枢神经系统神经-肌肉系统中枢神经系统神经-肌肉系统突触传导第23页，共33页，2023年，2月20日，星期一拟除虫菊酯类杀虫剂，主要作用于轴突膜上的离子通道（主要是Na+通道），通过延迟钠离子通道的关闭，使负后电位上升到去极化的阈值，导致重复后放，破坏神经传导引起中毒。第四节杀虫剂对神经系统的影响4.1对轴突传导的影响4.2对乙酰胆碱酯酶的影响

有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂，都是乙酰胆碱酯酶的抑制剂，进入突触间隙后，能象Ach那样与AchE结合，且结合后很难水解，结果使酶的正常作用受阻，造成突触部位的Ach大量积累，致使昆虫过度兴奋，行动失调，最后麻痹死亡。第24页，共33页，2023年，2月20日，星期一4.3对突触后膜的影响

——沙蚕毒素和吡虫啉等氯化烟酰类化合物，主要作用于神经突触后膜上的乙酰胆碱受体，前者抑制突触后膜的兴奋性，使昆虫瘫痪死亡，后者则增加突触后膜的兴奋性，使昆虫不断出现神经冲动，产生颤抖症状，随之发生痉挛，最后麻痹而死。

——阿维菌素类杀虫剂的作用靶标是神经—肌肉接点的突触后膜，阻断神经与肌肉间的联系，破坏肌肉的兴奋收缩功能，是昆虫中毒死亡。

第四节杀虫剂对神经系统的影响第25页，共33页，2023年，2月20日，星期一一、轴突毒剂

药剂对轴突传导的抑制主要是通过改变膜的离子通透性，从而影响正常膜的电位差，使电冲动的发生与传导失常。而离子通透性的改变主要与离子通道（ionchannel）有关。离子通道使钠、钾、钙等离子顺电化学梯度扩散，通过双分子膜。离子通道必须能够开放和关闭，才能实现其产生和传导电信号的生理功能。根据通道开关的调控机制又称门控机制的不同，离子通道可分为：(1)配体门控离子通道或称受体控制性通道，Ach受体、GABA受体等都是配体门控通道，将化学信息转变为电信号；(2)电压门控离子通道，或称电压依赖性通道，其开、关一方面由膜电位决定，另一方面与电位变化的时间有关(时间依赖性)，这类通道在维持可兴奋性细胞的动作电位方面起相当重要的作用，钠通道、钾通道等都是电压门控的离子通道；(3)环核苷酸门控(CNG)通道，这类通道在视觉和嗅觉方面的信号传导中相当重要。(4)机械力敏感的离子通道，即当细胞受各种各样的机械力刺激时开启的离子通道。第26页，共33页，2023年，2月20日，星期一钠离子通道

滴滴涕、除虫菊酯类拟除虫菊酯类杀虫剂，主要作用于轴突膜上的离子通道（主要是Na+通道），通过延迟钠离子通道的关闭，使负后电位上升到去极化的阈值，导致重复后放，破坏神经传导引起中毒。第27页，共33页，2023年，2月20日，星期一二、前突触毒剂

六六六和环戊二烯类杀虫剂主要对中枢神经系统中的突触部位起作用，刺激前突触膜大量释放乙酰胆碱，造成乙酰胆碱在前后两个神经元的间隙中大量积累，因而阻碍了神经元之间的神经传导。近年来，随着毒理学研究手段的改进，特别是放射性标记的配体结合技术和膜片钳技术的引入，发现此类杀虫剂能抑制GABA诱导的氯离子流，并能抑制二氢苦毒宁（DXPTX）与受体的结合，认为该类药剂为GABA受体抑制剂。至于GABA受体和突触前膜，这两个靶标中，哪个是初始靶标，哪种机理是致毒机理，到目前为止尚未见报道。

第28页，共33页，2023年，2月20日，星期一三、胆碱酯酶抑制剂乙酰胆碱的释放是化学传递所必需，但是，它必须迅速地被除去，否则连续的刺激会引起乙酰胆碱的积累，而积累过多反而引起神经传递的阻断。因此，乙酰胆碱酯酶是十分重要的，抑制了这种酶就会引起神经传导的阻断(有一个先期的兴奋)。分解后产生的胆碱重新被突触前膜所吸收，乙酸被一般细胞均能吸收。它们与辅酶A结合，形成乙酰辅酶A，然后，运送到前突触中，在胆碱乙酰转移酶的作用下重新合成乙酰胆碱。有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂，都是乙酰胆碱酯酶的抑制剂，进入突触间隙后，能象Ach那样与AchE结合，且结合后很难水解，结果使酶的正常作用受阻，造成突触部位的Ach大量积累，致使昆虫过度兴奋，行动失调，最后麻痹死亡。第29页，共33页，2023年，2月20日，星期一四、乙酰胆碱受体毒剂以昆虫神经系统的受体为作用靶标的一类药剂称为受体毒剂。昆虫体内作为杀虫靶标的有乙酰胆碱受体、GABA受体、章鱼胺受体这三类主要的神经受体，另外还有多巴胺受体、5-羟色胺受体、谷氨酸受体等。乙酰胆碱受体AcetylcholineReceptor——沙蚕毒素和吡虫啉等氯化烟酰类化合物，主要作用于神经突触后膜上的乙酰胆碱受体，前者抑制突触后膜的兴奋性，使昆虫瘫痪死亡，后者则增加突触后膜的兴奋性，使昆虫不断出现神经冲动，产生颤抖症状，随之发生痉挛，最后麻痹而死。

——阿维菌素类杀虫剂的作用靶标是神经—肌肉接点的突触后膜，阻断神经与肌肉间的联系，破坏肌肉的兴奋收缩功能，是昆虫中毒死亡。第30页，共33页，2023年，2月20日，星期一乙酰胆碱受体AcetylcholineReceptor以昆虫神经系统的受体为作用靶标的一类药剂称为受体毒剂。昆虫体内作为杀虫靶标的有乙酰胆碱受体、GABA受体、章鱼胺受体这三类主要的神经受体，另外还有多巴胺受