新药安全药理学研究及进展

新药安全药理学研究及进展第1页/共68页内容CFDA安全药理研究要求1ICH安全药理研究要求2安全药理研究趋势展望3第2页/共68页安全药理学：研究药物治疗范围内或治疗范围以上的剂量时，潜在不期望出现的对生理功能的不良影响次要药效学：主要研究药物非期望的、与治疗目的不相关的效应和作用机制概念CFDA要求第3页/共68页核心组合试验(CoreBattery)中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统研究追加的安全药理学研究（Follow-up）对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统进行深入的研究补充的安全药理学研究（Supplemental）研究药物对三大系统以外器官(如泌尿系统、自主神经系统、胃肠道系统和其它器官组织)功能的影响概念CFDA要求第4页/共68页确定药物可能存在的非期望药效作用评价药物在毒理学和/或临床研究中所观察到的药物不良反应和/或病理生理作用研究所观察到的和/或推测的药物不良反应机制目的CFDA要求第5页/共68页有助于了解新药的药理作用特点和机制有助于发现新药理作用，一药多用，药尽其用为毒理学研究打下基础，是各种毒性实验的必要补充目的CFDA要求第6页/共68页贯穿在新药研究全过程中，可分阶段进行在药物进入临床试验前，应完成CoreBatteryStudies追加和/或补充的安全药理学研究可在申报生产前进行阶段性CFDA要求第7页/共68页内容要求CFDA要求神经系统运动功能、行为改变、协调功能、感觉运动反射和体温等的变化(小鼠)心血管系统

给药前后血压（包括收缩压、舒张压和平均压）、心电图（包括QT间期、PR间期、ST段和QRS波等）和心率等变化(Beagle犬)呼吸系统呼吸频率和呼吸幅度(Beagle犬)根据情况增加其它系统或指标第8页/共68页1.动物选择可采用不同类型动物(正常或模型，清醒或麻醉)。一般多用正常动物2.剂量途径产生主要药效作用及以上的3个剂量，临床给药途径3.观察时间

药效学和药代动力学特性、受试动物、临床研究方案等因素选择观察时间点和观察时间CFDA要求有关问题第9页/共68页4.系统指标中枢神经系统心血管系统呼吸系统根据情况增加其它系统或指标5.体外研究

应确定受试物的浓度-效应关系。无明显影响作用时，应说明浓度选择范围CFDA要求有关问题第10页/共68页中枢神经系统：对行为、学习记忆、神经生化、视觉、听觉和电生理等的影响心血管系统：对心输出量、心肌收缩作用、血管阻力等指标的检测呼吸系统：对气道阻力、肺动脉压力、血气分析等指标的检测CFDA要求追加安全药理学第11页/共68页泌尿系统：对肾功能的影响，如对尿量、比重、渗透压、pH、电解质平衡、蛋白质、细胞和血生化（如尿素氮、肌酐、蛋白质）等指标的检测自主神经系统：有关受体的结合、体内或体外对激动剂或拮抗剂的功能反应、对自主神经的直接刺激作用和对心血管反应、压力反射和心率等指标的检测CFDA要求补充安全药理学第12页/共68页胃肠系统：观察药物对胃肠系统的影响，如胃液分泌量和pH、胃肠损伤、胆汁分泌、离体回肠收缩、胃液pH等指标的测定其它研究：潜在的依赖性、骨骼肌、免疫和内分泌功能等的影响CFDA要求补充安全药理学第13页/共68页体内血药浓度低，或其它组织器官分布很少的局部用药（如皮肤、眼科用药）只用于治疗晚期癌症病人的细胞毒类药物，在首次用于临床前可不做一般药理学研究，但不包括具有新作用机制的此类药物CFDA要求免做安全药理学第14页/共68页内容CFDA安全药理研究要求1ICH安全药理研究要求2安全药理研究趋势展望3第15页/共68页 “Safetypharmacologyincludestheassessmentofeffectsonvitalfunctions,suchascardiovascular,centralnervoussystemandrespiratorysystems,andtheseshouldbeevaluatedpriortohumanexposure.”

ICHM3:Nonclinicalsafetystudiesfortheconductofhuman

clinicaltrialsforpharmaceuticals.(July1997)

ValueofsafetypharmacologyacknowledgedbyregulatorsandsponsorsICH要求ICHGuidelineM3,1997第16页/共68页 “[Safetypharmacologystudies]..investigatethepotentialforundesirablepharmacologicalactivityinappropriateanimalmodelsand,wherenecessary,toincorporateparticularmonitoringfortheseactivitiesinthetoxicitystudiesand/orclinicalstudies.” “..thesestudiesmayallowforamechanistically-basedexplanationofspecificorgantoxicities,whichshouldbeconsideredcarefullywithrespecttohumanuseandindication(s).”

ICHS6“PreclinicalSafetyEvaluationofBiotechnology-Derived

Pharmaceuticals”(July1997)PharmacologicalactivityinanimalsshouldbeconsideredintoxicologyandclinicalstudiesMechanism-basedunderstandingoftoxicities(orpharmacologicalactivities)shouldbecarefullyconsideredintheriskassessmentICH要求ICHGuidelineS6,1997第17页/共68页 “Thisguidancewasdevelopedtohelpprotectclinicaltrialparticipantsandpatientsreceivingmarketedproductsfrompotentialadverseeffectsofpharmaceuticals,whileavoidingunnecessaryuseofanimalsandotherresources.”

ICHS7A“SafetyPharmacologyStudiesforHuman

Pharmaceuticals”(July2001)SafetypharmacologystudieshavethepotentialtoreduceuseofanimalsandotherresourcesICH要求ICHGuidelineS7A,2001第18页/共68页清醒动物----遥测系统检测清醒状态下、自由活动动物的安全药理学指标节省动物符合动物福利要求适合不同给药方式连续动态、长时间检测指标ICH要求第19页/共68页AnimalIDCompound/DosePeriodDosePeriod1Day1DosePeriod2Day4DosePeriod3Day8DosePeriod4Day11No.1LHCMNo.2HMLCNo.3CLMHNo.4MCHL4x4拉丁方实验设计ICH要求第20页/共68页AnimalIDCompound/DosePeriodDosePeriod1Day1DosePeriod2Day4DosePeriod3Day8DosePeriod4Day11No.1LHCMNo.2HMLCNo.3CLMHNo.4MCHLNo.5LHCMNo.6HMLCNo.7CLMHNo.8MCHL4x8拉丁方实验设计ICH要求第21页/共68页Drugtoincreasegastrointestinal(GI)motilityOver5.4millionprescriptionsin1996(US)34patientsTdP,23longQT(1993-1996)CardiotoxicityreportedwhenusedwithKetoconazoleand/orErythromycinCasereportof8-yearoldgirl–intensivecareICH要求CisaprideStory第22页/共68页ICH要求DrugInteractionsLeadingtoQT第23页/共68页Drugtoincreasegastrointestinal(GI)motilityOver5.4millionprescriptionsin1996(US)34patientsTdP,23longQT1993-1996CardiotoxicityreportedwhenusedwithKetoconazoleand/orErythromycinCasereportof8-yearoldgirl–intensivecare4deathsand16resuscitatedfrom1993to1996DrugwithdrawnfromUSmarket–July,2000ICH要求CisaprideStory第24页/共68页FDArecommendedremovalofTerfenadinecontainingproductsfromthemarketin01/1997FDAissuedwarninglettertoDoctorsaboutcardiacsafetyofCisapridePost-marketingsurveillancebecamemoreimportant–MedwatchreportingsystemSafetypharmacologyguidanceswereapprovedtolookatcardiovascular,respiratoryandCNSside-effectsofdrugcandidates–ICHS7AandS7BScreeningforQTprolongationisnowanintegralpartofdrugdevelopment(leadoptimizationtoclinical)ICH要求RegulatoryResponse第25页/共68页 “Thestudyresultscanbeusedtoelucidatethemechanismofactionand,whenconsideredwithotherinformation,estimateriskfordelayedventricularrepolarizationandQTintervalprolongationinhumans.”

ICHS7B:NonclinicalEvaluationofthePotentialforDelayedVentricular

Repolarization(QTIntervalProlongation)byHumanPharmaceuticals

(October2005)MechanismofactioncanbeagoalofstudiesUsedatawithotherdatatoestimateriskforQTprolongationinhumansICH要求ICHGuidelineS7B,2005第26页/共68页QTc(msec)Male FemaleNormal<430<450Borderline 431-450451-470Prolonged>450>470Bazett:QTc=QT/RR0.5

Fridericia:QTc=QT/RR0.33ICH要求QTcInterval第27页/共68页ICH要求QTcInterval心率年龄性别种属HR/RR公式第28页/共68页心肌动作电位时的离子通道ICH要求IKr:快速延迟整流K+电流第29页/共68页心肌动作电位时的离子通道ICH要求hERG(人类Ether-a-go-go相关基因)(KCNH2)编码Kv11.1钾离子通道，使心脏动作电位Ikr流复极化第30页/共68页QT/QTcProlongation

IKr

InhibitionDelayedVentricularRepolarizationArrhythmia

ADDITIONALRISKFACTORSIKrinhibitorypotency:canhelppredictriskofQT/QTcprolongationisabiomarkerforincreasedriskofVentricularArrhythmiasisnotabiomarkerforTorsadedePointesICH要求IKr&TdP第31页/共68页ICH要求Earlyafter-depolarization（早后去极化）TdP第32页/共68页

Drug

Class

DateWithdrawn Terfenadine Antihistamine Feb

1998

Sertindole Antipsychotic Dec

1998 Astemizole Antihistamine Jun1999 Grepafloxacin

Antibiotic Nov1999 Cisapride GIProkinetic July2000ICH要求DrugsWithdrawnforTdPrisk第33页/共68页采用离体动物或人体心脏细胞、培养心脏细胞系或克隆人离子通道的异种表达体系测定离子流在离体心脏标本进行动作电位参数测定，或在麻醉动物中进行能体现动作电位周期的特异性电生理参数检测测定清醒或麻醉动物的ECG参数在离体心脏标本或动物进行致心律失常作用测定QT间期延长非临床研究方法ICH要求第34页/共68页QT间期延长非临床研究方法ICH要求Langendorff系统第35页/共68页QT间期延长非临床研究方法ICH要求ECGPR间期,QRS时间,QT间期等心脏功能左心室压变力性,松弛性,变时性变更神经传导性A-V传导单级动作电位APD30

APD50

APD90第36页/共68页QT间期延长非临床研究方法ICH要求第37页/共68页QT间期延长非临床研究方法ICH要求一般来说，临床上易诱发Tdp的药物的hERGIC50和有效游离治疗血浆浓度ETPCunbound之间的比值大多小于30，因此药物对hERG作用的IC50是Cmax的30倍时，认为是可以接受的安全程度，出现假阳性结果的可能性也很低安全窗应该考虑疾病的严重性和治疗的需要对于如果不给予治疗就会死亡的疾病，如肿瘤，AIDS，一些感染性疾病等，IC50是Cmax的10倍可认为是安全的对于较为严重的疾病，如中风、帕金森病、精神分裂症、癫痫症、哮喘症、关节炎等，30倍可以认为是安全的对于较轻的疾病，如雷诺病、季节性鼻炎、湿疹等，100倍甚至更高的倍数才可认为是安全的第38页/共68页内容CFDA安全药理研究要求1ICH安全药理研究要求2安全药理研究趋势展望3第39页/共68页2009趋势展望安全药理学政策法规不断完善第40页/共68页趋势展望QT间期研究策略第41页/共68页体外电生理IKr研究采用原代或表达的IKr通道蛋白(如由hERG编码的蛋白)评价药物对离子电流的影响体内对QT的研究从体内测定心室复极化，如QT间期检测结果进行评价化学/药理的分类可诱导人QT间期延长作用的药物如抗精神病类药物，组胺H1受体拮抗剂、氟喹酮类QT间期研究策略趋势展望第42页/共68页追加试验离体心脏麻醉动物重复给药试验动物种属和性别的选择用代谢性诱导剂或用拮抗剂用阳性药和参比化合物其他通道的抑制作用在多个时间点测定电生理参数模拟病理状况和心律失常综合风险评估QT间期研究策略趋势展望第43页/共68页QT间期延长的问题在很大程度上已得到解决药物对血压的影响非常重要药物对心脏功能（收缩能力）的影响非常重要很多化合物，通过重复给药的毒理实验来获得心血管系统的安全药理实验数据，而不需要再单独进行安全药理实验特别是生物类药品如单克隆抗体等大多采用此法通过设计周全的安全药理实验和毒理实验，大大提高了整体动物模型的心血管系统药理实验的研究水平和数据质量QT间期研究策略第44页/共68页为什么血压检测很重要？降低高血压患者的血压可以降低死亡率微小血压的变化的重要性：“哪怕只是降低2mmHg的系统血压，中风死亡率就会降低10%，中年IHD患者和其他血管疾病患者的死亡率会减少7%第45页/共68页为什么心肌耗氧很重要？心肌全靠有氧代谢，不能生成乳酸，不能负担超氧负荷因此，心肌细胞耗氧量能提供非常准确的，实时的能量消耗状况心肌耗氧量也是判断冠状血流的一个重要指标第46页/共68页心肌耗氧的三大决定因素心脏收缩期室壁张力（压力）心率收缩力心肌收缩VS心肌变力状态正性肌力类药物可以增加心肌收缩负性肌力作用类药物则可以降低心肌收缩第47页/共68页改变心肌收缩力的结果心肌收缩减弱意味着心脏做功能力降低心肌收缩力的显著降低，临床体现可为急性或慢性心衰心肌收缩力增强可增加心脏的做功量，通常来说是在身体需求增加时的正常生理反应但是心肌收缩力增强的同时会急剧增加心肌耗氧量第48页/共68页心肌耗氧升高三大因素收缩期室壁张力（血压）哪怕平均血压只是微小地缓慢上升都会引起死亡率的明显升高心率心率的微小缓慢上升也会引起死亡率明显升高心肌收缩心肌收缩力的长期缓慢增强会导致什么结果呢？第49页/共68页HESI心肌收缩力评价项目综合策略：收集实验数据和提出建议，以改善非临床心血管数据的预提示能力（从动物到人类，从短期到长期用药）心肌收缩力被选定为一个重点研究项目目的：用已知药效的药物，评估犬类和大鼠整体动物模型在检测药物正性和负性肌力作用应用上的灵敏度该研究同时也对比了啮齿类模型和犬类模型在此类应用中的相对灵敏度实验研究将由美国和欧洲的HESI成员来完成健康和环境科学研究所（HESI）第50页/共68页心肌收缩能力实验设计比格犬双4X4拉丁方交叉设计(N=8)正性&负性肌力药物

空白溶剂&3个剂量

测试药物和剂量选择植入式遥测DSI&ITS系统LVP,AoP,ECG,TempdP/dtmaxdP/dt40,dP/dtmin,QASD或者Wistar大鼠双4X4拉丁方交叉设计(N=8)正性&负性肌力药物空白溶剂&3个剂量测试药物和剂量选择植入式遥测DSIHD-S21系统LVP,AoP,ECG,TempdP/dtmaxdP/dt40,dP/dtmin,QA第51页/共68页计算机模拟(insilico)干细胞定向分化为心肌细胞下丘脑病理切片HERG通道体外筛选新方法荧光筛选(测量膜电位)结合试验(标记的HERG通道阻滞剂，HTS)斑马鱼HTS结合药代/药效，研究毒理学生物标志，预测临床安全药理学研究新技术新方法趋势展望第52页/共68页计算机模拟(insilico)干细胞定向分化为心肌细胞下丘脑病理切片HERG通道体外筛选新方法荧光筛选(测量膜电位)结合试验(标记的HERG通道阻滞剂，HTS)斑马鱼HTS结合药代/药效，研究毒理学生物标志，预测临床安全药理学研究新技术新方法趋势展望PARTIMUTAGENESISANDMUTANTSHighlyEfficientENUMutagenesisinZebrafishProductionofPseudotypedRetrovirusandtheGenerationofProviralTransgenicZebrafishUndertakingaSuccessfulGynogeneticHaploidScreeninZebrafishCryopreservationandInVitroFertilizationattheZebrafishInternationalResourceCenter第53页/共68页计算机模拟(insilico)干细胞定向分化为心肌细胞下丘脑病理切片HERG通道体外筛选新方法荧光筛选(测量膜电位)结合试验(标记的HERG通道阻滞剂，HTS)斑马鱼HTS结合药代/药效，研究毒理学生物标志，预测临床安全药理学研究新技术新方法趋势展望PARTIITRANSGENESISTransientandStableTransgenesisUsingTol2TransposonVectorsAnalysisofGenesandGenomebytheTol2-MediatedGeneandEnhancerTrapMethodsBacterialArtificialChromosomeTransgenesisforZebrafishSimpleandEfficientTransgenesiswithMeganucleaseConstructsinZebrafish第54页/共68页计算机模拟(insilico)干细胞定向分化为心肌细胞下丘脑病理切片HERG通道体外筛选新方法荧光筛选(测量膜电位)结合试验(标记的HERG通道阻滞剂，HTS)斑马鱼HTS结合药代/药效，研究毒理学生物标志，预测临床安全药理学研究新技术新方法趋势展望PARTIIITISSUE-SPECIFICMANIPULATIONSNitroreductase-MediatedCellAblationinTransgenicZebrafishEmbryosFocalElectroporationinZebrafishEmbryosandLarvaeTissueMicromanipulationinZebrafishEmbryos第55页/共68页计算机模拟(insilico)干细胞定向分化为心肌细胞下丘脑病理切片HERG通道体外筛选新方法荧光筛选(测量膜电位)结合试验(标记的HERG通道阻滞剂，HTS)斑马鱼HTS结合药代/药效，研究毒理学生物标志，预测临床安全药理学研究新技术新方法趋势展望PARTIVANALYZINGGENEEXPRESSIONZebrafishSpotted-MicroarrayforGenome-WideExpressionProfilingExperiments.PartI:ArrayPrintingandHybridizationPartII:DataAcquisitionandAnalysisValidatingmicroRNATargetTranscriptsUsingZebrafishAssays第56页/共68页计算机模拟(insilico)干细胞定向分化为心肌细胞下丘脑病理切片HERG通