薄层色谱标准操作规程

文件薄层色谱标准操作规程编版号本SOP•09•10152 页码1/4编制日期替代∕审定日期颁发质量保障部批发准放质保中心日期生效120GMP》与药品生产质量检验的要求范围：各种检验中薄层鉴别的操作，成一均匀薄层，经点样、开放与显示以后，再与适宜的比照物质按同法所得的色谱图作比照,用于进展药品的鉴别，杂质检查或含量测定的方法。仪器与材料,并有严密的盖子、底部平坦。必要时在开放槽盖处可涂抹少量凡士林增加密闭性，但需留意勿沾污薄层板或溶入开放剂。玻璃板：除另有规定外,用5cm×20cm、10cm×20cm或20cm×20cm的规格。也可用载玻片进展预试验。各种薄层板要求光滑、平坦，洗净后不附水珠，晾干。玻璃板的质量有肯定要求，厚度为2mm或3~4mm，预制板一般使用1mm的玻璃板。应有良好的平面性，可用镜面玻璃或浮法玻璃，还应有肯定的耐热性，以使在烘烤时不致破裂。(用于定量分析),均应能使吸附剂或载体在玻璃板上涂开层符合厚度要求的均匀薄层.点样器：玻璃毛细管GGF254.HHF254，其次有硅藻土、硅GF254等。其颗粒大小，一般要求为600m2/g。3．薄层板的制备薄层板分为无粘合剂(软板)和有粘合剂(硬板)两种.前者系将吸附剂直接放在洗净枯燥的玻璃板一端,置涂布器上并调整好肯定的涂布厚度,一般为0.25～0.5mm(供分析用).由于使用中易被分散,现多承受含有粘合剂的薄层板。吸附剂(硅胶G)匀浆的制备除另有规定外,将1份吸附剂和3较严密,分别效果好.硅胶CMC板是取羧甲基纤维素钠粉(一般0.25%～0.75%)适量,加热煮沸溶解,放冷,备用.铺板时取其上清液使用。铺板倾注法取适量调制的吸附剂浆,倒入预备好的玻璃板上,用洗净玻棒涂铺成一均匀的薄层再稍加振动,使整板薄层均匀.本法简便,但板面全都性差。平铺法在水平台面上，依次放置适量的玻璃板，另在玻璃板两边加上玻璃条做成框边〔框边的厚度稍高于中间玻璃板约0.25～1mm〕,然后将吸附剂匀浆倒入中间玻璃板上,用有机玻璃板或玻璃棒向肯定方向均匀地将吸附剂刮平,再逐片轻轻振动,使整板薄层均匀.本法可以一次平铺多块薄层板,简便易行,缺点同上,上述两种方法制成的薄层板,只适用一般定性分别。涂铺器法取适量调制的吸附剂匀浆,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器进展涂布(厚度为0.2～0.3mm),取下涂好薄层的玻璃板于室温下,置水平台上晾干,即得。用涂布器制备薄层时涂布器移动的速度会影响薄层的厚度.移动快薄层就薄,反之则厚。因此操作者需要娴熟把握移动的速度.此外,薄层的厚度与水的比例、匀浆稠度等有关。本法可一次铺成几块薄层板，且分别效果和重现性好，可用于定量分别。薄层的枯燥(活化)110℃0.5h.马上置有枯燥剂的枯燥箱中,备用.使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。,否则外表易产生凹点.烘干的温度和时间对薄层板的活度有关，应严格掌握.烘好的薄层板保持时间不宜太长，最好随用随制。检定方法点样用点样器(一般用平头微量注射器)点样于薄层板上,速度应平稳,点样原点的大小对最终,2~4mm的范“超载“或使开放时产生“绕行“现象,会使斑点样时必需留意勿损伤薄层外表。开放,可在室中参加足够量的开放剂,并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入开放剂中，密封开放室的盖，使系统平衡。由于对饱和的要求不同,如有的需用开放剂将开放室饱和,有的需将薄层板置开放,有的需先用一种溶剂饱和后,再用开放剂开放,有的可不必饱和等,故需按各品种要求操作,避开产生“边缘效应“。,浸入开放剂的深度为距薄层板底边0.5～1.0cm(切勿将样点浸入开放剂中),密封室盖,待开放至规定距离(一般为10～15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。,此外,也可使用下行开放法,径向开放法、单向屡次开放法、双向开放法等。显色开放后的薄层板须将溶剂挥尽后,按各品种项下规定条件显色.但本法可承受具腐蚀性.无粘合剂薄层板,宜承受湿态显色等.所用喷雾器应不为试液