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文档简介
动物实验基础知识系列之一:剂量换算
关于剂量换算的问题
最近不少战友询问关于不同实验动物之间或者实验动物与人之间的剂量如何作“等效”换
算的问题。
这个问题对学习药理的战友来讲,可能是非常熟悉了。但对于非药理专业但又需做药理
实验的战友来说,仍然是令人困扰的问题。
下面我们分以下几点来探讨这个问题.
第一、等效剂量系数折算法换算
第二、体表面积法换算
第三、系数折算法与体表面积法的比较
第四、系数折算法的相对误差
第五、小孩与成人的剂量换算
第六、少常用实验动物剂量间的换算
第七、不同给药途径间的剂量换算
第八、LD50与药效学剂量间的换算
下面我来简单说一下这个问题。
我们在实验中估算一种药物或化合物的使用剂量的时候,差不多是来源于两条途径:
一是查文献,参考别人使用的剂量。有时有现成的,可直接用。有时没有我们所用动物
的剂量,但有其它实验动物的。也有的是有临床用量的,但没有实验动物的。这样,我
们就得进行换算。这是我们今天要谈的这种方法。
另一种方法就是根据自己或文献上有关急性毒性的数据来进行估算,以期采用合适的剂
量。一般参考数据是LD50。至于该选择LD50的多少分之一来作为参考剂量,众说纷纭。
这个我们再另题讨论。
下面我来说一说用第一种方法进行如何换算。
目前我们大多数人用的方法,是参考徐叔云教授主编的《药理实验方法学》。在其附录
中有一个表,列出了人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值。这个表,几乎被药理
专业的人们奉为经典,一直在科研中沿用。
表如下所示:
附表11-8人和动物间按体表面物f算的等疫眼比值
小限大依豚曜猫X狗人
(20g)(200g)(400^)(14电(201<)(401^)(in<)00应》
小心1.07.012.2S2-829.7M.1124.2却79
大尻014101.743.94.29.21*8S0
豚的00$05*102.252.45.210231.5
兔0040.250441.010$2.44.5142
猫0030.230410921.0,24.1B0
泰00160110.19042045101.961
狗00080060100220230521031
人000260018003100700-800603)(fi
请注意最后一行,这个就是我们通常用到的。把人的临床剂量转换为实验动物的剂
量。
试着换算一个。
如:人的临床剂量为Xmg/kg,换算成大鼠的剂量:
大鼠的剂量=Xmg/kgx70kgx0.018/200g-Xmg/kgx70kgx0.018/0.2kg=6.3Xmg/kg.
这也就是说,按单位体重的剂量来算,大鼠的等效剂量相当于人的6.3倍。
在这里,我们要看到每种动物的体重(包括人),在上表中以蓝色显示的。还要注意到
折算系数,也就是表中以红色所示的。将人的剂量转换成哪种动物的,就在相应的动物
那一列下找到与人的相交的地方的折算系数,将剂量乘以折算系数,再乘上人的体重与
那种动物体重的比值。注意体重的单位要化成一致。这个折算系数是以上表中蓝色所示
的标准体重计算得来的。
依此类推,我们可以算出小鼠、豚鼠等其它动物剂量与人的比值。
小鼠的剂量=Xmg/kgx70kgx0.0026/20g=Xmg/kgx70kgx0.0026/0.02kg=9.1X
mg/kg.
豚鼠的剂量=Xmg/kgx70kgx0.031/400g=Xmg/kgx70kgx0.031/0.4kg=5.42Xmg/kg.
兔的剂量=*mg/kgx70kgx0.07/1.5kg=3.27Xmg/kg.
猫的剂量=Xmg/kgx70kgx0.078/2.0kg=2.73Xmg/kg.
猴的剂量=Xmg/kgx70kgx0.06/4.0kg=1.05Xmg/kg.
狗的剂量=*mg/kgx70kgx0.32/12kg=1.87Xmg/kg.
注意,人的临床剂量常会以xxmg/d来表示,这时我们一定要把它转化成xxmg/kg
才能以上式来折算。
如:某药,成人每天服用50mg.计算大鼠的等效剂量。
大鼠的等效剂量=50mg/60kgx6.3=5.25mg/kg.
在这里,我们一般把成人的体重按60kg来算比较合理。尽管在这个表中,成人的标准体
重设为70kg。
根据上述结果,我们来编制这样一个简表,希望能给广大战友们提供一个方便。这样,
我们不必去翻阅厚重的药理实验参考书,也不必在初涉实验时茫然无措了。
见下表:
不同实验动物与人的等效剂量比值(注,制量按呻48鼻)
动物小成大殖豚鼠免猫*狗
剂量比值9.16.35.423.272.731•的/1.87
关于这个表,我说以下两点:
1.这个表虽然是以体重的比来计算剂量,但实际上计算的是体表面积。很多人误认为
这是按体重来算剂量,不准,提出要按体表面积来算。这是误解。这个折算系数实际上
就是已经把体重与体表面积的关系折算过来了的。不信,你可以用体表面积的公式来算,
结果是相差无几的。
如:一个70kg的人平均体表面积是1.73m2,一只200g大鼠的体表面积约305cm2.
我们来换算一下。按体表面积来算,那就是要算于它们单位体重所占的体表面积的比值,
也就相当于它们的剂量比。
人:1.73m2/70kg=0.02471大鼠:305cm2/200g=305x10-5/0.2=0.1525
大鼠剂量/人的剂量=大鼠比表面积/人比表面积=0.1525/0.02471=6.17
可以看出,与我们上述按折算系数算出来的结果几乎相同。
为什么说要按体表面积来算才是准确的呢?起初人们也以为是直接按体重比计算剂量就
可以了,后来发现不是那么回事。经研究才知,是与体表面积基本成正比的。这是根据
能量代谢的原理而得出的,认为人和动物向外界环境中放热的量与其体表面积成正比。
很多研究指出:基础代谢率、热卡、肝肾功能、血药浓度、血药浓度J1寸间曲线的曲线下
面积(AUC)、肌酎(Cr)、Cr清除率、血液循环等都与体表面积基本成正比,因此按
照动物体表面积计算药物剂量比体重更为合理。应该说,这是一种理想化的推论。在目
前没有更好的、也没有更方便的换算方法的前提下,我们可以把当前这种折算关系当作
一种重要的参考。
附:早在十九世纪末年,生理学家Voit氏等发现虽然不同种类的动物每kg体重单位时
间内的散热量相差悬殊,但都如折算成每m2体表面积的散热量,则基本一致。例如马、
猪、狗、大鼠和人的每m2体表面积每24小时的散热量都在1000kCal左右。药理学家
研究药物在体内的作用时则习惯于以mg/kg或g/kg等方式来计算药物的剂量。这种办法
行之于同种动物的不同个体时,问题似乎不大;但用于不同种类动物时,常常会出现严
重偏小或偏大,以致无法完成实验。1958年Pinkie氏报告6-MP等抗肿瘤药物在小鼠、
大鼠、狗和人身上的治疗剂量,按mg/kg计算时差距甚大,但如改为按mg/m2体表面积
计算,就都非常接近。此后,按体表面积计算剂量的概念逐渐为药理学家接受,被认为
尤其适用于不同动物之间剂量的换算。
以上所述,一方面是想说明按体表面积算剂量的准确性;另一方面,是想表明通过折算
系数后,以体重为参照,在一定范围内还是实用的,且方便。
2.这种换算关系的前提是:各种动物对某药的敏感程度是一样的。在上述的折算关系
中,我们是没有考虑到种属差异的。我们理想地认为,对任何药物,各种动物和人的敏
感程度是完全一样的。这是我们折算等效剂量的一个重要的前提。例如:犬无汗腺,对
发汗药不敏感,而对流涎药比较敏感;大鼠无胆囊,对利胆药及有明显肝肠循环的药物
与其他动物差别较大;鼠和兔对催吐药不敏感,而犬猫则较为敏感;吗啡对一般动物有
抑制作用,但却对猫引起兴奋。抗凝血药(毒鼠强等)对小鼠特别敏感,中毒剂量可以
其他动物小数百倍;抗胆碱类药物(阿托品,食着碱等),家兔有明显耐受性(黑色家
兔,特别不敏感,但新西兰家兔除外);同是啮齿类动物,家兔是草食动物,大鼠小鼠
是杂食动物,对一般药物在静注时剂量换算尚属可用,在口服用药时家兔往往起效较迟,
吸收较差,特别是对胃动力药及消化系统药差异更大。大鼠对血管阻力药敏感,却对强
心甘类不敏感,而猫对强心背类则很敏感;大鼠对缺乏维生素及氨基酸敏感,因能自行
合成维生素C,故对缺乏维生素C不敏感,而豚鼠对缺乏维生素C及变态反应特别敏感。
我们可以用常用的麻醉剂试试对不同动物的作用。如果机械地按等效剂量去算,可能难
以达到理想的效果。而实际上,我们都是一半参考等效剂量,一半靠自己的摸索。因此,
不能把这个所谓的等效剂量完全照搬。当然,我们同样反对毫无根据地乱设剂量。如:
有的人做实验相当然地自己随意地设置10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg.好像是方便自己
配药,而不是根据科学的道理来设置。这是我们所应当据弃的。
值得一提的是,这个换算方法只是一个重要参考而已。遇到有很大种属差异的药物或化
合物,上述换算关系就相差很大了。这一点要引起大家的关注。
下面我再介绍一下体型系数。
体型系数是人们根据不同动物的体重与体表面积之间的关系计算出来的。不同的动物有不同
的体型系数。不少动物(包括人)的体型系数在0.09〜0.1。
体表面积=体型系数x体重2/3
在此附上一些常用实验动物的体型系数表。
表3不同动物的体型系数
|动物小队大限静仪朱膂狗紊人—
|体型系数|08|0090099~|0095~|00S2~|0104~~|OJH~]010.11
下面我们来算一下,各种动物之间的体表面积比。
如:一个70kg的人与一只200g的大鼠的体表面积。
人的体表面积=0.1x(70)2/3=1.722
大鼠的体表面积=0.09x(0.2)2/3=0.0306
体表面积比(大鼠/人)=0.0306/1.722=0.0177~~=0.018
再算体重为20g的小鼠的。
小鼠的体表面积=0.06x(0.02)2/3=0.00436
体表面积比(小鼠/人)=0.00436/1.722=0.00254~~=0.0025
可以看出,这个计算结果与前面我们所说的那个表基本是一致。事实上,那个表就是根据体
型系数算出来的。这个按体型系数计算体表面积的公式被称为Meeh公式。于1879年发表。
这个公式的发表,可以说,对于科学界起到了一个很好的推动作用。也使得我们从事药理、
实验动物学的科研人员有了很好的借鉴。
从上述解析也可以看出,我们完全可以信任第一个表中所列出的折算系数,当然,也完全可
以信任后面我编制的那个简表。因为,这一切都是由体型公式计算得来的,也就是说,是按
体表面积来计算等效剂量的。
但是,我不得不说的是,按第一个表,或者是我编制的简表来计算实验动物的等效剂量,要
动物基本上在标准体重的区间内相差不大才会准确•也就是说,小鼠在20g左右,大鼠在
200g左右,豚鼠在400g左右等等,这样计算出来才会准确。如果实验动物的体重与此相差
比较大,按刚刚我们所讲的体型公式计算,与按折算系数计算的结果,就会有较大的偏差。
我们不妨以大鼠为例来算一算。
当大鼠的体重为180g,250g,300g,350g,400g时,那么它的剂量根据体型系数计算实际体表
面积应是多少?而按我们前面所说的折算系数算又是多少?它们之间相差有多大?当大鼠
体重在哪个范围内波动时,上述折算系数仍然基本准确呢?这个问题我们再进一步探讨。
为什么说,当实验动物体重不在上述标准体重的附近的话,按折算系数算出来的剂量就
不那么准了呢?
这是因为,我们用这个折算系数,只是一个点对点的关系。就是说,70kg的人对200g的大
鼠,那么这个剂量完全准确的。但如果大鼠不是200g,那么就会有偏差了。这个偏差来源于
体型系数的公式。
我们是应当按体表面积来计算剂量的。
体表面积=体型系数*(体重)2/3
注意,体表面积是与体重的2/3次方成正比的。
而我们按折算系数计算的时候,是直接按体重给药的。也就是说,剂量是与体重成正比的,
而不是与体重的2/3次方。这就是偏差的来源。
我们下面就来一一地算一算。
以大鼠为例。设人的剂量为Xmg/kg,体重70kg.
体重为150g时:
按折算系数算:
大鼠的剂量=6.3Xmg/kg,150g大鼠的总给药量为:0.15*6.3Xmg/kg=0.945Xmg/kg
按体表面积计算:
大鼠的体表面积=009*(0.15)2/3=0.02525
人的体表面积=1.722
体表面积比(大鼠/人)=0.02525/1.722=0.01466
180g大鼠的总给药量为:Xmg/kg*70*0.01466=1.0262Xmg/kg
体重为180g时:
按折算系数算:
大鼠的剂量=6.3Xmg/kg,180g大鼠的总给药量为:0.18*6.3Xmg/kg=1.134Xmg/kg
按体表面积计算:
大鼠的体表面积=009*(0.18)2/3=0.02853
人的体表面积=1.722
体表面积比(大鼠/人)=0.02853/1.722=0.0166
180g大鼠的总给药量为:Xmg/kg*70*0.0166=1.162Xmg/kg
体重为250g时:
按折算系数算:
大鼠的剂量=6.3Xmg/kg,250g大鼠的总给药量为:0.25*6.3Xmg/kg=1.575Xmg/kg
按体表面积计算:
大鼠的体表面积=0.09*(0.25)2/3=0.03555
人的体表面积=1.722
体表面积比(大鼠/人)=0.03555/1.722=0.02064
250g大鼠的总给药量为:Xmg/kg*70*0.02064=1.4445Xmg/kg
体重为300g时:
按折算系数算:
大鼠的剂量=6.3Xmg/kg,300g大鼠的总给药量为:0.3*6.3Xmg/kg=1.89Xmg/kg
按体表面积计算:
大鼠的体表面积=0.09*(0.3)2/3=0.04017
人的体表面积=1.722
体表面积比(大鼠/人)=0.04017/1.722=0.02333
250g大鼠的总给药量为:Xmg/kg*70*0.02333=1.6331Xmg/kg
体重为350g时:
按折算系数算:
大鼠的剂量=6.3Xmg/kg,350g大鼠的总给药量为:0.35*6.3Xmg/kg=2.205Xmg/kg
按体表面积计算:
大鼠的体表面积=0.09*(0.35)2/3=0.04454
人的体表面积=1.722
体表面积比(大鼠/人)=0.04454/1.722=0.02586
250g大鼠的总给药量为:Xmg/kg*70*0.02586=1.8102Xmg/kg
从上述计算我们是不是看出了一点规律?
那就是,当大鼠体重小于200g时,按折算系数算出来的结果比按体表面积的结果要偏小;而
大鼠体重大于200g时,按折算系数算出来的结果比按体表面积的结果要偏大。
推广一下,当实验动物体重小于标准体重时,按折算系数算出来的结果比按体表面积的结果
要偏小;而当实验动物体重大于标准体重时,按折算系数算出来的结果比按体表面积的结果
要偏大。
哪一种计算结果更准确呢?当然是按实际的体表面积来算。
哪一种计算方法更方便呢?当然是按折算系数来计算。尤其是对非药理、实验动物专业方面
的战友来说。
那么,二者的误差有多大?我们该怎么样调整?
下面我们就谈一谈两种计算等效剂量方法的误差问题。
从上面我们己经知道按折算系数计算会产生误差。这种误差应该说是属于系统误差。是由
于这个公式本身给我们的实验带来的误差。还有一种误差是我们在实验中实际给药时,由
于称体重、给药时的不准而产生的,那就不是我们在这里要探讨的问题了。
我们仍以大鼠为例来讨论这个误差问题。
设人的剂量为Umg/kg,体重为70kg。
设大鼠的体重为Xkg,
按折算系数计算得出的Xkg大鼠的用药量为Y1。
则:Y1=U*6.3*X=6.3UX
按实际体面表面计算得出的Xkg大鼠的用药量为丫2。
丫2=0.09*(X)2/3/1.722*U*70=3.66U(X)2/3
这样,我们就构筑了两个函数关系式。
函数Y1是一个正比例函数,其值是与X成直线相关的。
函数丫2是一个指数函数,其值是随X增大的,但不成直线。
这两个函数在什么时候相等呢?很显然,就是当X=0.2的时候。因为折算系数是当大
鼠体重为0.2kg时来计算的。
根据前面计算的结果,我们可以预测到:
当Xv0.2时,函数丫2在Y1的上方,
当X>0.2时,函数丫2在Y1的下方。
如下图所示:
我们知道,一般用于实验的大鼠,其体重大多在150〜350g之间。常常选用的是180〜220g
的大鼠。如下图矩形框所示。
3
.35
.OS
2
。
2
8
=f
L.5。
L
S
XL
;
.5
&
0.:03O.10.S
XAxisTitle
下面我们来计算误差。
这个误差应为相对误差。
令:按折算系数计算的剂量=人
按实际体表面积计算的剂量=B
相对误差=(A-B)/Bx100%=A/B-1
很显然,这个相对误差是有正负的。当X0.2时,误差为正。
因A=Y1=6.3X,
B=Y2=3.66(X)2/3
这样,我们就可以以X为自变量,以相对误差为因变量,再构筑一个函数丫3。
Y3=6.3X/3.66(X)2/3-1=1.72(X)1/3-1
现在我们得到了这样一个简单的函数关系式。
有什么用呢?
我们可以这个来估算按折算系数计算的剂量与实际相差多少。如果相差不大,我们认为是
可以接爱的。
从图上我们可以直观地看出,当大鼠体重在200〜300g时,误差不到20%.
在200g以下,是负的误差。
体重(kg)相对误差
0.1-0.201646721
0.11-0.175875785
0.12-0.151623046
0.13-0.128682913
0.14-0.106891014
0.15-0.086113631
0.16-0.06624034
0.17-0.04717878
0.18-0.028850818
0.19-0.011189702
0.20.005862102
0.210.022354576
0.220.038331447
0.230.053831216
0.240.068887982
0.250.083532103
0.260.097790739
0.270.1116883
0.280.125246811
0.290.138486223
0.30.151424674
0.310.164078706
0.320.176463451
0.330.188592796
0.340.200479512
0.350.212135382
0.360.223571297
0.370.234797349
0.380.245822908
0.390.256656695
0.40.267306836
0.410.277780921
0.420.288086051
0.430.298228878
0.440.308215647
0.450.318052224
0.460.327744132
0.470.337296577
0.480.346714469
0.490.356002448
0.50.365164905
从以上数据可知:
当大鼠体重在170〜230g范围内,按折算系数计算剂量的相对误差在5%以内;
当大鼠体重在150〜260g范围内,按折算系数计算剂量的相对误差在10%以内;
当大鼠体重在120〜300g范围内,按折算系数计算剂量的相对误差在15%以内;
当大鼠体重在100〜340g范围内,按折算系数计算剂量的相对误差在20%以内。
我们大多数情况下,大鼠在实验期间的体重在180〜250g。这样,我们按折算系数算出来
的剂量,其相对误差不会超过10%.基本上能接受。如果比较均匀,在180〜220g,则相
对误差在5%以内。这是完全可以接受的。
至此,我们是否明白了?
那就是说:
《药理实验方法学》所编的等效剂量折算表,按体重给药,只要大鼠体重相差不是很大,
其误差是可以接受的。这个表的编制,就是为了方便广大科研工作者。
如果大鼠体重达300g以上,尤其是达350g以上的时候,我们可以选择用实际体表面积
来算。我们知道,要把体重转化成体表面积,要用到计算器。这在我们给药的时候带来很
大的不便。那么,如果我们真的一定要很严谨,坚持要按实际体表面积给药的话,我们如
何快速、简便地算出剂量呢?其实很简单,我们可以根据上述理论的结果来进行修正。
凡体重在250〜300g之间的,误差按10%计算。即:A—B/B=0.1。我们可以直接按折
算系数,算出A的值。而B才是我们需要的真正最接近实际体表面积的值。易知:B=0.9A.
那就是说,在这个体重范围内的大鼠,剂量打九折就行了。
凡体重在300~350g之间的,误差按15%来算。B=0.87A,剂量为八点七折。
凡体重在350~400g之间的,误差按20%来算。B=0.83A
凡体重在400~450g之间的,误差按25%来算。B=0.8A
凡体重在450〜500g之间的,误差按30%来算。B=0.77A
这只是理论推算,除极少数情况外,实际体重太大的恐怕不能用于实验。
此前,不少战友对于剂量到底是按体重算还是按体表面积算,是有过一番争论的。在此,
当我们了解了其中的相对误差后,就会有选择依据了。我们可以根据上面提到的误差,权
衡一下用哪一种方法。
除了这些误差之外,我们在实验中常有不少人为误差。给药的剂量常会因为人为的操作而
出现偏差。而那样的偏差达10%我想是很常见的。而我们这个折算系数公式算出来的剂量
误差在15%以内的话,是不足为虑的。
因此,在说了这么多之后,我想说的是:
不要把简单的事情弄复杂。按折算系数算出来,剂量是八九不离十的。按照前面我所编制
的简表,大家都可以非常方便的算出剂量来。也就不必经常来论坛里问剂量了咯多
一句很笨笨的话:有人会问,那我要算大、小鼠之间的剂量比呢,要算大鼠和豚鼠的呢?
在鼠和兔的呢?这就很简单了。我们知道它们之间与人的剂量比,相比一下就知道它们之
间的比了。
至此,我们对于这个折算系数换算剂量的方法基本解析完全。
附:为了这一个小小的剂量的问题,花大量的篇幅来讲,其实目的只有一个:就是论证《药
理实验方法学》上那个等效剂量折算表的权威性。按此表来计算,结果不会差到哪里去。
而如果一定要用实际体表面积来算,一则相差无几,二则繁琐,令人不胜其烦。看了以上
的论述种种,您是否已有了上述感受呢?
现在,您就可以放心地用我编的那个简表了。很简单的几个数字:
小鼠:9.1倍大鼠:6.3倍豚鼠:5.42倍
兔:3.27倍猫:2.73倍猴:1.05倍狗:1.87倍。欢迎大家多多探讨〜〜!
本人意见仅供参考。
又附:在此对那个《药理实验方法学》中的折算关系表再提一点自己的看法。与大家共商
榷。我觉得,此表中,人的体重设为70kg,是有点不妥的。我们国人的平均体重是否能
达到70kg?难道我们都能吃得这么好?这恐怕不是太合理。
如果设为60kg或55kg,则能为大多数人接受。这样一来,这个表就得进行修正。如果为
60kg,则人的体表面积为1.55m2左右。那么,这样一来,折算系数表的中数字,全部要
修正。最后一行的数字要乘以1.72/1.55=1.11而表最右上端的人的体重改为60kg.
如此一来,我所编的那个简表就要修正了。
按人体重60kg计算:
这样,计算各种实验动物与人的剂量的倍数时就是这样了:
实验动物用剂量=人的剂量*60*1.11*折算系数/动物体重.
而原有的计算方法为:
实验动物用剂量=人的剂量*70*折算系数/动物体重。
这样,相当于简表中的数字都要乘以60*1.11/70=0.95
结果如下:
小鼠:8.65倍大鼠:5.98倍豚鼠:5.15倍
兔:3.11倍猫:2.59倍猴:0.998倍狗:1.78倍。
同理,按人体重55kg计算:简表中数字乘以55*1.175/70=0.92
小鼠:8.37倍大鼠:5.80倍豚鼠:4.82倍
兔:3.01倍猫:2.51倍猴:0.97倍狗:1.72倍。
同理,按人体重50kg计算,简表中数字乘以50*1.25/70=0.89
小鼠:8.1倍大鼠:5.61倍豚鼠:4.82倍
兔:2.91倍猫:2.43倍猴:0.93倍狗:1.66倍
此结果与大家共探讨。如有不同看法,请与我交流。
说完了实验动物的,我们下面来谈谈人的。
毕竟,临床才是最重要的。
我们知道,老人和小孩的用药剂量与成人通常是不一样的。
目前,我们对于成人的剂量常常是没有考虑体表面积的。无论高矮、无论胖瘦,一律是用
XXmg/天这样的剂量。从临床应用来说,是不妥的。但是,对药品生产厂家来说,他们
也只能如此。他们在说明书所说的剂量,在大多数人通常的剂量。当然,成人自己或医生
可以根据疗效调整用药剂量。
那么小孩的剂量该如何来算呢?
实际上,仍然是沿袭了体表面积的折算法。
成人体重一般按70kg算,体表面积一般按1.72m2算。
下面介绍常用方法:
1按体重计算:
在成人体重70kg计,
小儿剂量=小儿体重(Kg)/70*成人剂量
2按体表面积算:
小儿剂量=小儿体表面积/成人体表面积*成人剂量
成人体表面积一般按1.72m2来算。
按经验公式:小儿体表面积=(4*体重(kg)+7)/90+体重
例如:小孩重8kg,折算剂量=(4*8+7/90)/I.72*成人剂量=0.231成人剂
旦
里
此方亦非常简便,可操作性强。
实际上,因为成人与小儿体型系数是一样的,所以其体表面积就是他们体重比的2/3次
方。
那我们来验算一下上面这个例子:
(8/70)2/3=0.233,可以看出,与上述结果相差无几。
再算一例:
小儿体重12kg.
经验法:4*12+7/90+12/1。72=0.313
直接法:(12/70)2/3=0.306
可以看出,经验法基本准确。
另有计算体表面积的经验公式如下:
体表面积(m2)=0.0061x身高(cm)+0.0128x体重(kg)-0.1529
这是较为适合我国人的公式。一般用于计算成人。
还有些其它方法,因计算稍微复杂,在临床上不实用。不再列出。
在此,我推荐体表面积法。按经验公式计算体表面积,非常方便,笔算甚至口算可得出答
案。当然,有计算器在身边的,也可直接把体重的比输入,求其2/3次方也可很快得出。
值得注意的是:以上所述是按照成人与小孩的等效剂量来刻板地计算的。
如前所述,这种换算的前提是:小孩与成人对此药的敏感程度是一致的。
但是,小孩由于发育不完全,尤其是肝脏这一承担主要药物代谢的器官发育不完全,实际
上小孩比成人要敏感。
因此,在此剂量基础上还要酌减。本人认为,减至等效剂量的3/4〜4/5较为适宜。而
且,儿童用药要“摸石头过河”,不可盲目用较大剂量。
以上只是原则性的谈了一下小孩与成人剂量的换算。在临床上还要牵涉到配药的问题。那
则是护士们拿手的了。在此不再讨论。
5楼
在做动物实验的时候,我们通常要用到不同的给药途径。
而且,有时候我们想知道不同的给药途径之间的效果相差有多大?
以什么样的比例给予能使不同给药途径之间的效果差不多呢?
比如:某药,可静脉注射,也可以腹腔注射,我们想把静脉途径改为腹腔,到底给多少药
比较合适呢?或者,把静脉的改成口服,又大概是多少呢?
这些问题,许多实验书上并没有定论。大多数是我们在实践中根据经验总结出来的。
下面我们就来谈谈这个问题。
说到这个问题,我们不得不谈到生物利用度。按照经典的定义,生物利用度是指药物吸收
的速度和程度。吸收的速度反反与药物的达峰时间相关联。而吸收的程度与发挥作用的药
量是相关的。而我们常常主要关注的是吸收程度。因而,生物利用度尸=药物吸收量/经
静脉给药的量,这就是绝对生物利用度。
我们谈到不同给药途径之间的换算,就是要用到绝对生物利用度。通常我们以静脉为参照,
来比较其它途径给药能达到静脉的百分之几来衡量。关于不同途径给药的问题,在不少的
药理及相关的书上,有如下的叙述:
以口服量为100时,皮下注射量为30〜50,肌肉注射量为20〜30,静脉注射量为25。
这些是我们实验时所得到的一般的经验。从以上的数字我们可以看出,人们常常把口服生
物利用度估计为25%左右。认为肌注相当于静脉的80%,皮下相当于静脉的50%。应该
说,这样的估计是比较合理的。口服一般生物利用度可有30〜40%,高者也可达70%,
低者在15%以下。估计为25%,有点偏于保守,本人倾向于估计为30%。除此之外,在
动物实验中,还有一种重要的给药途径,就是:腹腔注射。它可达到不错的效果,而又比
静注要简单方便,因此常常采用。除了有吸收不太规则的缺点之外,其余方面很不错。而
且吸收一般可达静注的80〜85%。
因此,我们可以将上述结果列于下:
不同给药途径之间剂量换算估计值筒表
给药途径阱脉口服皮下注射矶峨射副腔注射
生物利用度全部入血传25〜30%40-5。%左80%左右80〜85%
环.无吸收过右
程
与酢脉的剂—3.X倍2〜2.5倍左1.25倍左右1.18-1.25倍
量之比右
与口服的剂025-033—05-06032-040.3-035
量之比</r*11
对此简表需要说明的是:
笫一,给药剂量可参照经验,但最好亲自实验。因为每种药物的生物利用度是不一样的。
简表中所示只是一种多数情况下的估计。可能与实际会有较大出入。
第二,能够不改给药途径时,尽量不改。实验药量足够的情况下,尽量不要改给药途径。
一则是各给药组间要剂同对比;二是给药途径改后效果不好对比。尤其是口服和静注之间
有时按上述折算给药时,血药浓度相差太大。主要是口服影响因素多。
第三,有时实验操作熟悉程度影响很大。尤其是静注。而口服途径一般来说,较易实现相
对准确。
以上所述,仅供参考〜〜!
欢迎大家和我交流〜--〜〜
附:关于局部给药的剂量折算问题
有时候,我们做的虽然是在体实验,却是局部给药。如:想考察一种药物对烧伤的作用。
一般用兔子做实验。那么,在多大的面积上给多少药才与临床差不多等效呢?
关于这个问题,我们只讨论皮肤给药的。
我个人认为,如果只是看药物在局部的作用(如:烧伤),就和人体用相同的剂量。即用
于人体多少面积涂多少药,动物也是多少面积涂多少药。不过,要注意一点,这是我们设
想实验动物对此药敏感程度与人相同的情况下。
那么,如果是透皮吸收的呢?也就是说,把皮肤只当作一个给药途径,最终在体内发挥作
用的呢?那实际上就相当于体内给药了,仍然按前面所述的等效剂量给药。
在前面的贴子中,我们讨论了常用实验动物的剂量换算的问题。
但有时候,我们可能会使用一些其它的动物。如;金黄地鼠、鹤鹑、来亨鸡、小型猪、鸭子等等。
那么,对于这样一些在这个表中无法找到折算系数的动物,我们怎样来折算它们与人或其它动物
的等效剂量呢?
对此,很多人会感到茫然。其实,只要知道等效剂量折算的原理,我们照样可以很好地估算出来。
与其它实验动物的剂量折算相似,方法如下:
第一,能找到有参考文献的,可以用现成的剂量。但这样的情况不多。
第二,有临床用量的,折算到动物。这就要我们去找到相应的动物的体型系数。通过查文献我们
可以找到。。。
LD50与药效学实验剂量的换算
面对一个全新的化合物,无任何资料可参照的情况下,我们如何去设置剂量?
我想,首先至少我们会做一个急性毒性实验。在急毒中,我们可以得到一个LD50,或者是最
大耐受量(MTD)。这可能成为我们选择剂量的一个重要依据。
那么,如何根据LD50或MTD来选择剂量呢?要注意些什么问题呢?
下面我来跟大家探讨一下。
在不少的药理书上,都是讲测出药物或化合物的LD50以后,取其1/10,1/20,1/30的
剂量作为药效学的高、中、低剂量。
对此,我们差不多也是这样做的。只是有个预试过程。在预试中摸索并调整剂量。但上述剂
量的设置似乎没有一个定量的、理论的依据。
那么,我们如何来估计药效学实验的剂量呢?
在此,我提出一个自己的想法。
我们知道,药物是安全性和有效性并存的。在达到很好的药效的时候,可能已经产生毒性了。
我们既要控制毒性,又要在这个基础上尽量最大地发挥药效。那么,什么样的情况下可以满
足这样一个要求呢?
我觉得,就是:当药物差不多刚刚引起毒性反应时的剂量设为药效学的最高剂量,再往下以
等比递减。如果要给一个定量的数字,我觉得取LD5比较好。就是说,把引起5%实验动物
死亡的剂量定为药效学最高剂量。
如果这样,那接下来的问题就是:寻找LD50与LD5之间的关系。
下面,我们就运用药理学与数学的知识来探讨这个问题。
为此,我们先来了解一下相关的基础知识。
我们知道,药理效应跟剂量(或药物浓度)之间存在一定的关系。这种关系不是完全地成比
例,可能是效应与浓度的对数成比例,也可能效应与浓度的对数亦不成比例,而是表现出一
种这样的规律:浓度较小时,增加浓度药效增加不很明显;浓度中等时,增加浓度药效有较
明显地增加;浓度较大时,增加浓度药效增加又不太明显;直到出现最大效应。这就是所谓
的“量一效关系”或“浓度一效应关系,
如何用数学的模型或是公式来描述这样一种“浓度一效应关系”呢?
早已有人对此进行了研究。其中比较为大家所公认的是由A.V.Hill提出的一个方程:
E=Emax.Cs/ECs50+Cs
这就是著名的Hill方程。
式中,Emax表示药物的最大效应;EC50表示达到50%的Emax时的药物的浓度;C表示药
物的浓度;上标S是表示浓度一效应关系曲线形状的参数。
毒理效应可以看作是一种特殊的药理效应。因此,我们将这一公式移植到急毒实验中来进行
一些应用。
对于一定大小的动物而言,一定的剂量与一定的血药浓度基本上成正比的。所以,我们就以
剂理来代替浓度进行计算。
上式中,以LD50代替EC50,以LD代替C,则得:
E=Emax.LDs/LDs50+LDs
很显然,在毒理实验中,Emax就是死亡率为100%时的效应。
相应地,LD5则为死亡率为5%时的效应;LD1则为死亡率为1%时的效应:LD50贝I」为死亡
率为50%时的效应。我想对此大家应无异议。
如此,我们来看,当剂量为LD5时,LD5与LD50之间的关系如何呢?
E5=5%Emax=Emax.LD5s/LDs50+LD5s
得:0.05=LD5s/LDs50+LD5s
化简,
得:LD5s=0.05/0.95XLDs50
=1/19XLDs50
同样地,LD1s=1/99XLDs50
如果S=1,则LD5大约为LD50的1/20;LD1贝U为LD50的1/100.
如果S=2,则LD5大约为LD50的0.229;LD1则为LD50的0.1.
如果S=3,贝ijLD5大约为LD50的0.378;LD1贝ij为LD50的0.219.
如果S=4,则LD5大约为LD50的0.479;LD1则为LD50的0.317.
如果S=5,则LD5大约为LD50的0.555;LD1则为LD50的0.399.
如果S=6,则LD5大约为LD50的0.612;LD1则为LD50的0.464.
S是决定药效随血药浓度增加而变化的趋势的程度的参数。当S6时,药效是随血药浓度呈
突进式的;而当S介于二者之间时,药效是呈过渡式的。
很多药物的S值在2以下,一部分在2〜5之间,大于6的极少。也就是说,大多数药物的效
应随血药浓度增加是渐进式的,或近于渐进式的。
那么,根据以上的计算结果,我们是否可以初步地得到一个结论呢?
那就是说,当我们知道一个化合物的LD50以后,我们可以得到一点关于它的LD5或LD1的
信息。我们希望在做药效学实验时,动物的死亡率不要超过5%,最好不要超过1%。也就是
说,药效学的最高剂量是否可以估计为LD5或者LD1呢?
我觉得是可以的。而且,我更趋向于保守地估计。那就设为1%吧。剂量就给到LD1的样子。
同理,虽然我们知道有些药物的S值是大于2的,这样量一效曲线比较陡,算出来的LD1与
LD50接近了许多,但为保守起见,我们仍取比较小的剂量作为药效学的实验剂量。
这样我们就得到了药效学剂量的一个最保守的估算值:大约取LD50的1/100.
但,不可否认的是,这是一个相当保守的估计。如果药物的S值是大于2的,则这个剂量可
能要高好几倍。因此,药效学的剂量高的可以取到LD50的1/10,甚至1/5。
因此,这些是需要我们去摸索的。因为,毕竟毒理反应和药理效应的机理可能不同,其量一
效关系的变化规律可能不一样。我们通常给的剂量大概是LD50的1/50~1/20之间。在
新药研究指南中,并没有规定剂量取LD50的多少分之一。而是给出了一些基本的原则。只要
遵循了这些原则就可以了。长毒实验中规定低剂量不能有毒性反应,中剂量有轻微毒性反应,
高剂量要有一定的毒性反应。是否可以考虑将LD50的1/100作为长毒试验的低剂量?我觉
得上式有一定的参考意义。
对化学合成药而言,剂量在100mg/kg以上就是相当大的剂量了。多数药效学实验的剂量在
10~100mg/kgo甚至在10mg/kg以下。如果LD50超过5g/kg,那样化合物的毒性就是相当
低了。
对于中草药而言,可能很多时候测不到LD50,而是用最大耐受量来表示。在MTD时,还没
有出现一只动物死亡。那可以这样说,此药的LD1肯定是比这个MTD要大的。因此,从理论
来上说,药效学的最高剂量可以达到MTD。当然,这个思维的出发点是,在这个剂量点基本
上还没有动物出现严重的毒性反应。但不能忽略的一点是,没有死亡不能就推定没有毒性。
因此,实际操作中,我们常常会以MTD的几分之一来定药效学剂量。1/2或1/3是常用的。
在实践中观察效果。为什么可以这样做呢?因为,当剂量达到MTD时,可能药效早已达到了
最高点。从量一效曲线的规律我们也知道。所以,没有必要用那么高的剂量。
一家之言,仅供参考〜!
希望大家多多探讨。
附:由于上面的公式有点看不清。上传一张图片。
s
厂EmaxC
E=----------aHill方程
S
AQO+C
lEmaxLDs毒理效应与剂量
E=-备---的--关--系--
LD;°+LDSb一一近11方程
的衍变
动物实验基础知识系列之二:试剂如何配制?
做一个动物实验,要涉及要许多方面。从实验设计到实验操作,再到实验数据的整理及统计,以
及论文的撰写,需要各个方面综合的、零零散散的知识和经验。而泛泛而谈,虽能总括一般的规
律,但也许战友们得不到最贴心、最具实用价值的信息。为此,本版将陆续推出一些最基础的专
题,从一般到特殊,从抽象到具体,从已知到未知,逐步地深入讨论。希望大家踊跃参与。
下面,我们来讨论在动物实验中的试剂的配制的问题。
分以下几个方面来讨论:
一、用于实验的试剂的类型及用途
二、用于实验的试剂原料的贮存方式
三、用于实验的试剂的溶解度及常用配制方法
四、配制试剂的常用溶剂及适用范围
五、配制和使用试剂时的量器、衡器的选择
六、配制好的试剂的使用和保存方式
七、配制好的试剂的常见问题及解决方式
八、有毒、危险性试剂的配制及保存
九、试剂配制的优化
十、如何追溯实验中试剂导致的问题?
十一、常用缓冲液的配制
十二、生物类试剂的配制杂谈
十三、如何找到自己需要的试剂?
十四、Doityourself?还是买现成的试剂?
十五、实验中购买试剂的成本一效用分析
十六、不稳定试剂的配制
此系列贴主要是从大的方向、原则方面来讲述的。对于某一试剂的具体细节问题没有作过深的探
讨。各位参与讨论的战友,请着重讲述某具体试剂你是如何配制的?要注意些什么细节问题。希
望本贴能长期不断地深入下去。
系列贴子中如有不当之处,请各位不吝指出!
首先,我们来了解一下动物实验中需要用到的试剂的类型
按照其贮存状态来分:试剂有己配好的即用型试剂和需要配制的试剂。
前者,如:一些性质较稳定的、或单剂量包装的试剂。像Western中的DAB显色试剂就有现成
的可直接用。后者,如:大多数的药物、试剂。当然,要配制的占大部分。
按其用途来分,可分为:
药物:通常就是我们要考察其药效或机制的化合物或中草药提取物。又可分为原料药和制剂。原
料药一般可直接应用。制剂有的要进行提取,有的可直接用。
动物模型用试剂:如:造糖尿病的STZ、造肝损伤的氨基半乳糖胺、四氯化碳、造睾丸损伤的镉
剂、造成肺损伤的博来霉素、造成肾损伤的腺喋吟、造成炎症的角叉菜胶等等。
动物模型用饲料:这个一般是固体状态。也有半固体的。液体状态的较少。如:高脂饲料中要配
以胆固醇、丙基硫氧嗒咤、胆酸盐、鸡蛋黄、猪油等。
动物基本操作用试剂:如:麻醉用试剂、动物除毛的试剂硫化钠、动物标记的试剂苦味酸、取血
或插管用的试剂肝素、消毒用的75%乙醇、碘伏、新洁尔灭、动物手术后护理的抗生素等。
各类缓冲液或基础分散介质:如:PBS、生理盐水、柠檬酸缓冲液、克氏液、任氏液、配难溶性
药物用的0。5%CMC—Na液、DMS。液、增溶剂泊洛沙姆(与药物混匀后再加入溶剂中)
保存标本的试剂:如:10%福尔马林、中性福尔马林、4%多聚甲醛、Bouin“液等。
清洗液:如:稀盐酸液、重铭酸钾洗液。
检测试剂:这个因实验而异。不同的实验有不同的方法。可以另开专题讨论。
按其使用时限来分:
即配即用型:如:STZ极易分解,配制后要迅速全部用完,不然完全失效。一些酶类的试剂,配
制后也要尽快用完。已配好的显色剂,通常也是较短时间内用完。对水不稳定的药物,如:青霉
素。尽快用完。
可在一周内使用短效型:主要是一些亚稳定状态的溶液。可随温度、氧气的作用而逐渐分解而达
不到使用的要求。如:蛋白电泳中的过硫酸镂,是一种促进氧自由基产生的辅助试剂,促进凝胶
的形成,时间久了就不能产生自由基,故而一般在一周内使用,最多两周。有些缓冲液,尤其是
做离体实验的,一般低温保存下尽快地用完。不然可影响实验结果。
一个月以内的中效型:许多试剂在配好后,如果能低温保存,能用一个月以上。
三个月以上的长效型:不少性质稳定,且对浓度准确度要求不是太高的溶液,可长期保存使用。
像福尔马林、生理盐水、CMC-Na溶液。
按其纯度可分为:
化学纯:一般化学实验用的,含少量杂质.纯度一般应在98%以上.
分析纯:做分析实验用的,含微量杂质,纯度一般应在99%以上.缩写:A.R
色谱纯:液相流动相的要求.据本人理解应是不出现杂峰.纯度可能在99.9%.
生化纯:好像在一些生化试剂里有这么写的.缩写:B.R
要注意的是,有些厂家有标明优级纯(G.R)的,实际上,可认为相当于分析纯的级别.
还有就是级别最高的:标准品、对照品。其实这二者差别不大。我们通常混用这两个词。按药典
规定,我们通常用的基准物质称为对照品。而抗生素类(注意,不是合成抗菌药)的基准物质则
称为标准品。而事实上,我们似乎总是把“标准品”当作最高级别,而把'对照品'当作一个比“标准
品”低一点的级别。事实并非如此,这两个词应是一样的。只是标准品特指抗生素或其它生物制
品。
特此将二者区分如下:
对照品、标准品系指用于鉴别、检查、含量测定的基准物质。
其中,标准品特指用于生物检定、抗生素或生化试剂中含量或效价检定的基准物质,按效价单
位计,与国际标准品标定。
如:青霉素的基准物质称为标准品,而氧氟沙星的基准物质则称为对照品。但在所发表的论文中,
我们所看到的绝大部分情况是二者混用。称青霉素为对照品的、标准品的,都有。
那么这些基准物质要达到什么样的要求?我想,纯度至少要达到99.99%吧。生物制品或抗生素
则不一定了,因为有的抗生素实际上就是混合物的。只能用效价来评定。
在配制标准品或对照品时,尤其注意要准确。通常,我们在称量10mg以下的物质时,是很难准
的。因此,我们在配某些试剂时,可考虑先称10mg以上的物质配成较大的浓度,再逐步稀释,
所得浓度要准确一些。
每一种试剂对不同级别的规定和要求是不同的.
我们可以看到论文中要标明试剂的纯度。通常有写到化学纯、分析纯、色谱纯、纯度达到多少?
含标示物多少?等等。这需要在做实验之前了解我们所要用的试剂的纯度要求是怎样的。不然难
以得到满意的结果。如:需要用色谱纯的试剂用了分析纯,可能会得到失败的实验结果。
动物实验中,用到分析纯及以上级别的比较多。做药动学实验,液相检测时要注意,要用色谱纯
试剂,不然严重影响实验结果。
按其毒性,有无毒、低毒、中等毒性、剧毒几种。
要注意毒性试剂的保存,以及实验过程中自身的防护。
首先,我们来了解一下动物实验中需要用到的试剂的类型
第三,试剂的溶解度。
这是对大多数固体试剂而言。如果是液体试剂,则就要看它能否有溶剂中混匀或者分散。
一般而言,我们可以把试剂分为易溶性和难溶性的两大类。又可分为脂溶性的亲水性两大类。
下面我们就来谈谈如何配制这些试剂。
易溶性的:像绝大多数的酸、碱、盐类试剂,都是易溶性,且一般是水溶性的。这类试剂很多是
用双蒸水配制的。
难溶性的:难溶性的有的是脂溶性比较高的,可以用油来配制。但有时候不能用油,但又要混匀,
这时我们只好加助悬剂或者增溶剂,或者用潜溶剂。助悬剂,如I:竣甲基纤维素钠(CMC-Na);
增溶剂,如:泊洛沙姆188;潜溶剂,如:乙醇。也有少数用DMS。来配的。DMS。号称万能
溶剂。但实际使用时,要考虑可能引起一些药理效应,从而对实验结果产生干扰。能不用尽量不
用。
在配制难溶性物质的时候,有的可以加加热,有的可以搅拌,有的可以用超声。要特别注意不要
盲目加热。一是有些物质一加热就变质了,产生了分解产物;二是有些物质加热就失效了,如一
些酶或蛋白质类的物质。
有些物质的溶解性是我们所熟知的。配这类物质的时候自然就轻车熟路了。但是,有些试剂我们
并不知道。该如何弄呢?方法有三。一是查看试剂包装的说明。一般上面会有一些信息。二是上
网查询。google上找到的网页或是论文都可以。三是要试。可以用小剂量的试试。看看溶解度
如何。我曾经一次用丙酸睾酮注射液,想要稀释,便用双蒸水来做。结果发现根本不混溶。因说
明书上没说明是什么溶剂配的,当时看到是十分澄清的,没有细想。后来改用植物油稀释,效果
不错。
有时候,我们学药理的中可能有些化学好一点,觉得从结构上来看就知道其溶解性的规律。但往
往会因为过于自信而忽略了一些特例。像盐酸小嬖碱,从结构上看,应是水溶性很好的。然而,
实际却基本不溶。淫羊蕾甘,想一想,昔类都有糖基,极性大,总是能溶的吧?却几乎不溶于水,
而溶于乙醇、甲醇中。因此,物质的溶解度如何,除了查阅相关的资料外,其实很重要的一点还
是要自己动手配制一点预试一下。
值得注意的是,乙醇是一种非常好的溶剂。通常与水以不同浓度混合,有时可达到比较满意的效
果。
第四,我们来谈谈配制试剂的常用溶剂或者分散介质。
应该说,这是大家比较熟悉的一个问题。
常用的溶剂或分散介质不外乎以下几种:水、有机溶剂、复合溶媒、缓冲液。
水,是用得最广泛的溶剂。配制试剂,当然不能用自来水,至少也是蒸储水。最好是用双蒸水。
双蒸水实际上就相当于注射用水的要求了。双蒸水可以达到无菌、无热原的要求。配制水溶性的
试剂时,要注意相关容器的洗涤、灭菌。注意量器不能高温烘烤,不然可致形变而量得不准。如:
量筒、量杯、容量瓶。这类玻璃容器一般都是用重铭酸液浸泡,再洗涤。
有机溶剂,是许多试剂中必不可少的。用理较多的是乙醇、甲醇、丙酮、氯仿这三种。除有时候
用到乙醇外,其余很少用来作为动物口服药物的溶剂。多用分析纯。当然,做液相检测时,要用
色谱纯。有时候,这些溶剂不需任何配制,本身就作为试剂来使用。如:用甲醇沉淀蛋白。做
PCR时,用氯仿除蛋白。用乙醇进行洗涤等。要注意有机溶剂的易燃性和毒性。一是防操作不当
而起火;二是要进行一定的防护,如I:带口罩、一次性手套等。要注意甲醇对眼睛的毒性,氯仿
对肝脏的毒性。尽管这些毒性远不如致癌的试剂毒性大,但也不可忽视。
复合溶媒,通常是指乙醇等亲水性较强的溶剂与水互溶形成的混合物。丙酮亦可,但少用。有些
试剂用一定浓度的乙醇来配效果比较好。注意,如果要较为精确地测定乙醇浓度,最好还是使用
酒精比重计。
缓冲液,严格来说,算不上溶剂,只能算一种分散介质。但在药理实验中,又是广泛使用的。这
是因为,有些试剂必须在一定的PH值条件下才能稳定。最常用的莫过于磷酸缓冲液(PBS)了。
而且PBS又可配成不同的PH值。此外,就是醋酸一醋酸钠缓冲液、柠檬酸缓冲液了。前面述及
的STZ,必须在PH4〜4.5之间才能稳定,故而要用缓冲液配制。同时,一些缓冲液是用于洗涤
或暂时保存组织的溶液系统。如:取组织标本时,通常要用生理盐水或PBS来洗涤血迹。还有,
像电泳缓冲液,是进行蛋白电泳或DNA电泳不可少的介质。配制缓冲液时,要注意如下事项:1。
严格按照说明进行。主要是加入溶液中的物质的顺序。因为顺序错了可能产生沉淀或其它现象而
导致不能使用。二是要准确测量PH值。三是一定要写好牢固的标签。本人配制蛋白电泳缓冲液
时,有一次将浓缩胶缓冲液与分离胶缓冲液恰好弄反了,导致失误。二者仅仅是因为其组分的比
例不同,而PH不同。贴上醒目而牢固的标签就容易识别。
第五,我们来谈谈配制试剂中衡器、量器及其它器具的选择。
我们知道,试剂的原料大多数情况下是固体,少数的一部分是液体。固体的配制要用到衡器
和量器,而液体原料的配制需要量器,也有少数要用衡器。在配制过程中,要使试剂符合我
们的要求,还要用到如:玻棒、磁力搅拌器、PH试纸、分液漏斗、滤纸等器具。
下面我们就来
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