药物分析18药物制剂分析概论

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第一节药物制剂分析的特点

Specialfeature

第二节片剂和注射剂的分析

GeneraldetectioninTablets&Injection

第三节片剂和注射剂中药物的含量测定

AssayInterferences&theirelimination

第四节复方制剂分析

Assayofcompoundpreparations第一页，共81页。CompanyLogo第一节药物制剂分析的特点Specialfeatures药物制剂的特点制剂的杂质检查一般不需要完全重复原料药的检查项目，制剂是用符合要求的原料药和辅料制备，制剂的杂质检查主要是检查在制备和贮藏过程中可能产生的杂质。如盐酸普鲁卡因注射液要求检查对氨基苯甲酸，而原料药则不需要检查此项目。药物制剂分析中，需做制剂的常规项目检查，此外，对某些制剂还需做一些特殊的检查。如对水溶性较差的药物片剂，需作溶出度测定。

第二页，共81页。CompanyLogo3.药物制剂组成较为复杂，在设计和选定分析方法时，应根据药物的性质、含量的多少以及剂型、赋形剂、附加剂的影响程度而定。测定方法除满足准确度和精密度的要求外，专属性和灵敏度也应符合要求。对药物含量较低的制剂，应选择灵敏度高的方法测定；当辅料对测定有干扰时，则应选择专属性较强的方法。第三页，共81页。CompanyLogo制剂含量的表示方法：测得量相当于标示量%=--------×100%

标示量

第四页，共81页。CompanyLogo第二节片剂和注射剂的分析片剂的检查项目【重量差异】(weightvariation)

【崩解时限】(disintegration)

【含量均匀度】(contentuniformity)

【溶出度】(dissolution)

【释放度】

GeneraldetectioninTablets&Injection第五页，共81页。CompanyLogo一、片剂的检查项目（一）重量差异(weightvariation)

按规定称量方法测得片剂每片的重量和平均片重之间的差异程度。检查方法

取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重，再分别准确称定每片的重量，计算每片片重与平均片重差异的百分率，即重量差异。第六页，共81页。CompanyLogo结果判断

超出重量差异限度的不得多于2片，并不得有1片超出限度的1倍。第七页，共81页。CompanyLogo（二）崩解时限(disintegration)

固体制剂在规定的介质中，以规定的方法进行检查，崩解溶散并通过筛网所需时间的限度（不溶性的包衣材料或破碎的胶囊壳除外）。第八页，共81页。CompanyLogo结果判断

取药片6片检查，如有1片不合格，应另取6片复试，均应符合规定。第九页，共81页。CompanyLogo（三）含量均匀度(contentuniformity)

小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂等每片(个)含量符合标示量的程度。适用范围每片/个标示量≤10mg或主要含量<5％片重的片剂、胶囊或注射用无菌粉末其余制剂中每片/个标示量≤2mg或主要含量<2％片重者

透皮贴剂药物的有效浓度与毒副反应浓度比较接近的品种或混匀工艺较困难的品种，每片(个)标示量≤25mg者第十页，共81页。CompanyLogo检查方法

除另有规定外，取供试品10片(个)，按照各药品项下规定的方法，分别测定每片(个)以标示量为100的相对含量X，求其平均值X

和标准差S以及标示量与均值之差的绝对值A()

A＋1.80S≤15.0

⇒

A＋S＞15.0

⇒

A＋1.80S＞15.0，且A＋S≤15.0⇒另取20片(个)复试根据初、复试结果，计算30片(个)的均值、标准差S和标示量与均值之差的绝对值A；A+1.45S≤15.0

⇒A＋1.45S＞15.0

⇒结果判断第十一页，共81页。CompanyLogo应用示例地西泮片

(DiazepamTablets)[规格](1)2.5mg(2)5mg[含量均匀度]

取本品1片，置100ml量瓶中，加水5ml，振摇，使药片崩解后，加0.5%硫酸的甲醇溶液约60ml，充分振摇使地西泮溶解，用加0.5%硫酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，用0.5%

硫酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法(附录ⅣA)，在284nm的波长处测定吸光度，按C16H13ClN2O的吸收系数()为454计算含量，应符合规定（附录ⅩE）。第十二页，共81页。CompanyLogo试验结果结果判断

X＝102.26A=∣100-X∣=2.26S＝2.06A+1.8s＝5.97

合格第十三页，共81页。CompanyLogo（四）溶出度(dissolution)

药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速率和程度。它是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中崩解和溶出的体外简易试验方法，是评价药物口服固体制剂质量的一个指标，对难溶性药物一般都做溶出度的检查。第一法转篮法第二法桨法第三法小杯法（小杯搅拌桨法）检查方法第十四页，共81页。CompanyLogo第一法转篮法除另有规定外，分别量取经脱气处理的溶出介质900ml，置各溶出杯内，加温，待溶出介质温度恒定在37oC±0.5oC后，取供试品6片(粒、袋)，分别投入6个干燥的转篮内，按规定速度旋转。除另有规定外，至规定时间时取样，立即用0.8μm的微孔滤膜滤过。自取样至滤过应在30s内完成。取澄清滤液，照该品种项下规定的方法测定，计算每片的溶处量。第十五页，共81页。CompanyLogo篮体溶出杯篮轴第十六页，共81页。CompanyLogo第十七页，共81页。CompanyLogo第十八页，共81页。CompanyLogo第二法桨法如片剂或胶囊剂浮于液面，应先装入沉降篮。计时自供试品接触溶出介质开始。第十九页，共81页。CompanyLogo第三法小杯法第二十页，共81页。CompanyLogo结果判断6片(个)中每片(个)的溶出量，按标示量计算，均不低于规定限度(Q)6片(个)中仅有1~2片(个)低于Q，但不低于Q-10%，且其平均溶出度不低于Q6片(个)中有1~2片(个)低于Q，其中仅有1片(个)低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出度不低于Q时，应另取6片(个)复试初、复试的12片(个)中仅有1~3片(个)低于Q，其中仅有1片(个)低于Q-10%，但不低于Q-20%，且其平均溶出度不低于Q第二十一页，共81页。CompanyLogo应用示例阿司匹林片溶出度的测定测定方法取本品，照溶出度测定法(第一法)，以稀盐酸(盐酸24ml加水至1000ml)，转速为100转/分，依法操作，经30min，取溶液10ml滤过；精密量取续滤液3ml置50ml容量瓶中，加0.4%NaOH5ml，置水浴中煮沸5min，放冷，加稀硫酸2.5ml，并加水稀释至刻度，摇匀。照分光光度法(药典附录ⅣA)，以溶剂为空白，在303nm的波长处测定吸光度，按C7H6O3的吸收系数(为454）计算，再乘以1.304，计算每片的溶出量，限度为标示量的80%，应符合规定。第二十二页，共81页。CompanyLogo计算结果判断第二十三页，共81页。CompanyLogo（五）释放度

系指药物从缓释制剂、控释制剂、肠溶制剂及透皮贴剂等在规定条件下释放的速率和程度。它是模拟体内消化道条件，用规定的仪器，在规定的温度、介质、搅拌速率等条件下，对制剂进行药物释放速率的试验，用以检测产品的生产工艺是否达到控制产品质量的目的。检查方法第一法⇒缓试制剂或控释制剂第二法⇒肠溶制剂第三法⇒透皮贴剂第二十四页，共81页。CompanyLogo第一法第一点0.5~2h⇒考察药物是否有突释第二点中间取样时间点⇒确定释药特性第三点最后取样时间点⇒确定释药完全第二法酸中释放量≤10％标示量缓冲液中释放量>70％标示量(Q)第二十五页，共81页。CompanyLogo二、注射液的检查项目注射液系指药物与适宜的溶剂或分散介质制成的供注入体内的溶液、乳状液或混悬液，以及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂。溶剂

最常用的水性溶剂为注射用水，亦可用0.9%氯化钠溶液或其他适宜的水溶液。非水溶剂有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。常用的油溶剂为注射用大豆油。其质量应符合大豆油(供注射用)的标准。其他溶剂必须安全无害，用量应不影响疗效。第二十六页，共81页。CompanyLogo附加剂

附加剂一般有渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂等。抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等。常用的抑菌剂及其浓度(g/ml)为苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等。抑菌剂用量应能抑制注射液内微生物的生长。加有抑菌剂的注射液，仍应用适宜的方法灭菌。注射量超过5ml的注射液，添加的抑菌剂必须特别审慎选择。供静脉(除另有规定外)或椎管注射用的注射液，均不得添加抑菌剂。第二十七页，共81页。CompanyLogo【装量】【装量差异】【可见异物】【无菌】

【热原】/【细菌内毒素】【不溶性微粒】第二十八页，共81页。CompanyLogo（一）装量为保证注射用量不少于标示量，灌装标示装量为50ml与50ml以下的注射液时，应按下表适当增加装量。除另有规定外，供多次用量的注射液，每一容器的装量不得超过10次注射量，增加装量应能保证每次注射用量。第二十九页，共81页。CompanyLogo

注射液的标示装量为2ml或2ml以下者取供试品5支，2ml以上至10ml者取供试品3支，10ml以上者取供试品2支 开启时注意避免损失，将内容物分别用相应体积的干燥注射器及注射针头抽尽，然后注入标化的量具内，在室温下检视； 测定油溶液或混悬液的装量时，应先加温摇匀，再用干燥注射器及注射针头抽尽后，同前法操作，放冷至室温检视， 每支注射液的装量均不得少于其标示量。 注射液的标示装量为50ml以上至500ml的按最低装量检查法(附录ⅩF)检查，应符合规定。检查方法第三十页，共81页。CompanyLogo（二）装量差异供试品5瓶(支)的中每瓶(支)的装量与平均装量相比，应该符合规定。如有一瓶(支)不符合规定，应该另取10瓶(支)复试，均应符合规定。

凡检查含量均匀度的注射用无菌粉末，一般不再检查装量差异。第三十一页，共81页。CompanyLogo（三）可见异物

存在于注射液、滴眼液中，在规定条件下目视可以观察到的不溶性物质，其粒度或长度通常大于50μm。

灯检法

光散射法结果判断溶液型静脉用注射液、注射用浓溶液和滴眼剂20支(瓶)供试品中，均不得检出可见异物，如检出可见异物的供试品不超过1支(瓶)，应另取20支(瓶)同法检查，均不得检出。混悬型注射液和混悬型滴眼液20支(瓶)供试品中，均不得检出色块/纤毛等可见异物。第三十二页，共81页。CompanyLogo（四）无菌检查注射剂以及其他要求无菌的药品是否无菌的一种方法。对检查无影响的供试品⇒直接接种法供试品对检查有干扰⇒薄膜过滤法第三十三页，共81页。CompanyLogo（五）热原/细菌内毒素

内毒素为外源性致热原，可激活中性粒细胞，使之释放出内源性热原质，作用于体温调节中枢引起机体发热。

热原⇒家兔法细菌内毒素⇒鲎试剂法原理

鲎的血变形细胞中含有高分子量凝固酶原和凝固蛋白原。前者经内毒素激活转化为具有活性的凝固酶，通过凝固酶的酶解作用将凝固蛋白原转变为凝固蛋白，凝固蛋白通过交联酶作用相互聚合而形成牢固的凝胶。第三十四页，共81页。CompanyLogo第三节片剂和注射剂中药物的含量测定一、常见干扰及排除糖类硬脂酸镁抗氧剂▪加入掩蔽剂

▪加酸分解

▪加入弱氧化剂氧化

▪利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱的差异进行测定溶剂油▪有机溶剂稀释法

▪萃取法

▪柱色谱法第三十五页，共81页。CompanyLogo（一）糖类淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是固体制剂的稀释剂，具有还原性，干扰氧化还原滴定：高锰酸钾法、溴酸钾法等。第三十六页，共81页。CompanyLogoFeSO4原料药——采用KMnO4法FeSO4片剂——采用铈量法应用示例第三十七页，共81页。CompanyLogo【含量测定】取本品约0.5g，精密称定，加稀硫酸与新沸过的冷水各15ml溶解后，立即用高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)滴定至溶液显持续的粉红色。每1ml高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)相当于27.80mg的FeSO4·7H2O。【含量测定】取本品10片，置200ml量瓶中，加稀硫酸60ml与新沸过的冷水适量，振摇使硫酸亚铁溶解，用新沸过的冷水稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸迅速滤过，精密量取续滤液30ml，加邻二氮菲指示液数滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于27.80mg的FeSO4·7H2O。第三十八页，共81页。CompanyLogo固体制剂常用的润滑剂，以硬脂酸镁(C36H70O4Mg)和棕榈酸镁(C32H62O4Mg)为主的混合物。

配位常数：被测离子-EDTA>>Mg2+-EDTA，不干扰调节pH或选择合适的指示剂

pH6.0~7.5，酒石酸(草酸)可掩蔽。（二）硬脂酸镁Mg2+干扰EDTA配位滴定；硬脂酸根干扰高氯酸非水滴定。干扰作用干扰消除方法第三十九页，共81页。CompanyLogo硬脂酸根、苯甲酸盐、羧甲基纤维素钠干扰高氯酸滴定干扰消除方法被测药物含量>>硬脂酸含量，干扰可以忽略；脂溶性有机碱性药物，碱化萃取分离后，滴定。无水草酸的醋酐溶液，与硬脂酸镁的镁离子形成沉淀，且游离的硬脂酸在醋酐溶液中不显酸性，以孔雀绿为指示剂，高氯酸为滴定液，适用于叔胺类药物或含氮杂环类药物的片剂测定。第四十页，共81页。CompanyLogo硫酸奎宁片QuinineSulfateTablets

【含量测定】取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸奎宁0.3g），置分液漏斗中，加氯化钠0.5g与0.1mol/L氢氧化钠溶液10ml，混匀，精密加氯仿50ml，振摇10分钟，静置，分取氯仿液，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液25ml，加醋酐5ml与二甲基黄指示液2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显玫瑰红色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于19.57mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4·2H2O。应用示例【含量测定】取本品约2g，精密称定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml与结晶紫指示液1~2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于24.90mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4。第四十一页，共81页。CompanyLogo（三）抗氧剂常用抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠及维生素C等碘量法溴量法铈量法亚硝酸钠法第四十二页，共81页。CompanyLogo3.1加入掩蔽剂（丙酮或甲醛）第四十三页，共81页。CompanyLogo维生素C注射液VitaminCInjection【含量测定】精密量取本品适量（约相当于维生素C0.2g），加水15ml与丙酮2ml，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。安乃近注射液MetamizoleSodiumInjection【含量测定】精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，再加水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取10ml，置锥形瓶中，加乙醇2ml、水6.5ml与甲醛溶液0.5ml，放置1分钟，加盐酸溶液(9→1000)1.0ml，摇匀，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定（控制滴定速度为每分钟3～5ml），至溶液所显的淡黄色在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于17.57mg的C13H16N3NaO4S·H2O。应用示例第四十四页，共81页。CompanyLogo3.2加酸分解

Na2S2O3+2HCl→2NaCl+H2S2O3(加热)→

SO2↑

+

H2O

NaHSO3+HCl

→NaCl+H2SO3(加热)→

SO2↑

+

H2O应用示例磺胺嘧啶钠注射液SulfadiazineSodiumInjection本品为磺胺嘧啶钠的灭菌水溶液。【规格】(1)2ml∶0.4g(2)5ml∶1g

【含量测定】精密量取本品适量(约相当于磺胺嘧啶钠0.6g)，照永停滴定法(附录ⅦA)，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于27.23mg的C10H9N4NaO2S。第四十五页，共81页。CompanyLogo

永停滴定法用作重氮化法的终点指示时，调解R1使加于电极上的电压约为50mv。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液(1→2)15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂-铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L或0.05mol/L)迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。第四十六页，共81页。CompanyLogo盐酸普鲁卡因胺注射液

ProcainamideHydrochlorideInjection

本品为盐酸普鲁卡因胺的灭菌水溶液。【规格】

(1)1ml∶0.1g(2)2ml∶0.2g(3)5ml∶0.5g(4)10ml∶1g【含量测定】精密量取本品5ml，加水40ml与盐酸溶液(1→2)10ml，迅速煮沸，立即冷却至室温，照永停滴定法(附录ⅦA)，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于27.18mg的C13H21N3O·HCl。

第四十七页，共81页。CompanyLogo3.3加入弱氧化剂氧化(H202和HNO3)要求——加入的弱氧化剂能将抗氧剂(亚硫酸盐等)氧化，而不氧化被测药物，不消耗滴定液。第四十八页，共81页。CompanyLogo306nm243nm3.4UV吸收谱差消除干扰第四十九页，共81页。CompanyLogo盐酸异丙嗪片【含量测定】

取本品10片，除去包衣后，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸异丙嗪12.5mg)，置200ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)适量，振摇15分钟使盐酸异丙嗪溶解，再加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA），在249nm的波长处测定吸收度，按C17H20N2S·HCl的吸收系数()为910计算，即得。盐酸异丙嗪注射液【含量测定】精密量取本品2ml，置100ml量瓶中，用盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置另一100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录ⅣA），在299nm的波长处测定吸收度，按C17H20N2S·HCl的吸收系数()为108计算，即得。第五十页，共81页。CompanyLogo甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液(USP)MenadiolSodiumInjection本品为灭菌水溶液。含苯甲酸或苯酚抑菌剂及焦亚硫酸钠。【含量测定】精密移取本品适量，用0.1mol/L盐酸稀释配制为每1ml含甲萘氢醌二磷酸酯钠50g的溶液，取上述溶液10ml置于60ml分液漏斗中，用15ml三氯甲烷提取三次，弃去有机层，取水层离心分离后作为供试液，于290nm处测定其吸收值A290nm。另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对照品同法测定，按计算含量，即得。萃取分离后UV测定3.5其它方法第五十一页，共81页。CompanyLogo（四）溶剂油

脂溶性药物(如甾体激素类)常配制成油溶液。溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响：溶液浑浊，影响UV测定、容量滴定、HPLC测定。4.1

有机溶剂稀释法适用范围药物标示量高，稀释倍数大或测定溶剂对油溶解性好，溶剂油对测定无干扰。第五十二页，共81页。CompanyLogo应用示例癸氟奋乃静注射液FluphenazineDecanoateInjection本品为癸氟奋乃静的灭菌油溶液。【规格】

1ml∶25mg【含量测定】精密量取本品5ml（约相当于癸氟奋乃静0.125g），加冰醋酸20ml，振摇，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于29.59mg的C32H44F3N3O2S。第五十三页，共81页。CompanyLogo复方己酸羟孕酮注射液CompoundHydroxyprogesteroneCaproateInjection本品为己酸羟孕酮和戊酸雌二醇的灭菌油溶液。【规格】1ml∶己酸羟孕酮250mg与戊酸雌二醇5mg【含量测定】照高效液相色谱法（附录ⅤD）测定。色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(85∶15)为流动相；流速每分钟0.7ml；检测波长为225nm。己酸羟孕酮与戊酸雌二醇的分离度应符合要求。测定法用内容量移液管精密量取本品1.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为戊酸雌二醇供试品溶液；精密量取1.0ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为己酸羟孕酮供试品溶液；取此两种供试品溶液各10μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积。另分别取戊酸雌二醇与己酸羟孕酮对照品适量，精密称定，加甲醇使溶解并定量稀释制成每1ml约含己酸羟孕酮与戊酸雌二醇各0.02mg的溶液，作为对照品溶液，取对照品溶液10μl，依法测定，按外标法以峰面积计算，即得。第五十四页，共81页。CompanyLogo4.2

萃取法本品为丙酸睾酮的灭菌油溶液。【规格】(1)1ml∶10mg(2)1ml∶25mg(3)1ml∶50mg

【含量测定】HPLC测定

ODS柱；甲醇-水(70∶30)

流动相；检测波长254nm。柱效和分离度应符合要求。内标溶液的制备取苯丙酸诺龙约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。测定法用内容量移液管精密量取本品适量(约相当于丙酸睾酮50mg)，置50ml量瓶中，用乙醚分数次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml置具塞离心管中，在温水浴内使乙醚挥散；用甲醇振摇提取4次(第1～3次各5ml，第4次3ml)，每次振摇10分钟后离心15分钟，并用滴管将甲醇液移置25ml量瓶中，合并提取液，精密加入内标溶液5ml,用甲醇稀释至刻度，摇匀，取5～10μl注入液相色谱仪，测定，即得。丙酸睾酮注射液TestosteronePropionateInjection第五十五页，共81页。CompanyLogo4.3

柱色谱法USP测定丙酸睾酮注射液油溶液反相正相丙酸睾酮，甾醇，三萜类丙酸睾酮乙醇稀释紫外测定第五十六页，共81页。CompanyLogo二、含量测定应用示例（一）盐酸苯海拉明制剂的含量测定盐酸苯海拉明

DiphenhydramineHydrochloride本品为N,N-二甲基-2-(二苯基甲氧基)乙胺盐酸盐。第五十七页，共81页。CompanyLogo含量测定方法第五十八页，共81页。CompanyLogo1.原料药测定【含量测定】取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酐4ml溶解后，再加醋酸汞试液4ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于29.18mg的C17H21NO·HCl。按干燥品计算，含C17H21NO·HCl不得少于99.0%。第五十九页，共81页。CompanyLogo2.片剂含量测定2.1酸性染料比色法(2000版Ch.P)原理

碱性药物在酸性条件下与酸性染料溴甲酚绿结合生成有色的离子对，经氯仿提取后，在415nm波长处有最大吸收，利用比色法测定含量。【性状】本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显白色【规格】25mg

含量要求：本品含盐酸苯海拉明(C17H21NO·HCl)应为标示量的93.0%~107.0%。第六十页，共81页。CompanyLogo【含量测定】

对照品溶液的制备精密称取盐酸苯海拉明对照品50mg，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备取本品10片，除去糖衣后精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海拉明50mg)置100ml量瓶中，加水适量使盐酸苯海拉明溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。溴甲酚绿溶液的制备

取溴甲酚绿50mg，加0.1mol/L氢氧化钠溶液0.7ml溶解后，加0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液50ml，0.1mol/L盐酸溶液3.5ml，加水稀释成100ml，摇匀，滤过，pH值为3.8。第六十一页，共81页。CompanyLogo测定法

精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置分液漏斗中，各加水5ml与溴甲酚绿溶液3.0ml，摇匀，分别精密加氯仿10ml，振摇提取3分钟，静置分层后，分取氯仿液至具塞离心管中，离心(2500转/分)10分钟，取澄清的氯仿液，照分光光度法(附录ⅣB)，在415nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。第六十二页，共81页。CompanyLogo2.2高效液相色谱法(2005版Ch.P)【含量测定】照高效液相色谱法(附录ⅤD)测定

色谱条件与系统适用性试验

用氰基键合相硅胶为填充剂；以乙腈-水-三乙胺(50:50:0.5)（用冰醋酸调节pH值至6.5）为流动相；检测波长为258nm。理论塔板按盐酸苯海拉明峰计算不低于5000。盐酸苯海拉明峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。测定法取本品20片，除去包衣后精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海拉明50mg)，置100ml量瓶中，加水适量使盐酸苯海拉明溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸苯海拉明对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中约含有0.5mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。第六十三页，共81页。CompanyLogo3.注射剂含量测定【性状】本品为无色的澄明液体【规格】1ml:20mg

含量要求：本品含盐酸苯海拉明(C17H21NO·HCl)应为标示量的95.0%~105.0%。阴离子表面活性剂滴定法（两相滴定法）

(2000版Ch.P)

反相高效液相色谱法(2005版Ch.P)第六十四页，共81页。CompanyLogo3.1

阴离子表面活性剂（烷基磺酸盐）滴定法

原理使用阴离子表面活性剂(AnionSurfactant)溶液作为滴定剂的方法。常用于呈阳离子态的有机碱性药物的含量测定。终点前终点时第六十五页，共81页。CompanyLogo【含量测定】精密量取本品适量(约相当于盐酸苯海拉明20mg)，置具塞锥形瓶中，加水20ml，加氯仿50ml与稀硫酸5ml，再加二甲基黄-溶剂蓝19混合指示液1ml，用磺基丁二酸钠二辛酯试液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海拉明对照品约20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶中”起，依法测定，根据二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的量(ml)的比值计算，即得。第六十六页，共81页。CompanyLogo阴离子表面活性剂滴定法测定的其它药物

克霉唑软膏、栓、溶液

盐酸胺碘酮片

硝酸益康唑软膏

盐酸氯丙那林片(含量及均匀度)

盐酸苯海索片(含量及均匀度)

第六十七页，共81页。CompanyLogo盐酸苯海索片(BenzhexolHydrochlorideTablets)【含量测定】取本品25片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海索20mg)，置具塞锥形瓶中，加水8ml、稀硫酸3ml和氯仿25ml，再加二甲基黄-亚甲蓝混合指示液0.5ml，用0.25％磺基丁二酸钠二辛酯溶液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海索对照品20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶中”起，依法测定，根据二者消耗0.25％磺基丁二酸钠二辛酯溶液的量(ml)的比值计算，即得。第六十八页，共81页。CompanyLogo（二）盐酸吗啡制剂的含量测定盐酸吗啡

MorphineHydrochloride本品为17-甲基-3-羟基-4,5α-环氧-7,8-二脱氢吗啡喃-6α-醇盐酸盐三水合物。第六十九页，共81页。CompanyLogo第七十页，共81页。CompanyLogo（三）阿片中吗啡的含量测定阿片

Opium本品为罂粟科植物罂粟的未成熟蒴果被划破后渗出的乳状液经干燥制成。其主要成份为吗啡、可待因、罂粟碱、那可汀、蒂巴因。【性状】本品为棕色或暗棕色膏状物。新鲜品略柔软，存放日久，则变坚硬或脆。臭特殊，味即苦。含量限度：含吗啡按无水吗啡(C17H19NO3)计算，不得少于9.5%。第七十一页，共81页。CompanyLogo【含量测定】照高效液相色谱法(附录ⅤD)测定

色谱条件与系统适用性试验

用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠水溶液-乙腈(5:5:2)为流动相；检测波长为220nm。理论塔板按吗啡峰计算不低于1000。固相萃