侵袭性真菌感染的血清学检测

侵袭性真菌感染的血清学检测IFD血清学检测方法真菌抗原、抗体、酶、代谢产物标本类型真菌（除外接合菌和隐球菌）(1,3)-β-D-葡聚糖（G试验）血清、血浆曲霉半乳甘露聚糖（GM）与烟曲霉抗体（IgG、IgM、IgE）血清、BAL（CSF）新型隐球菌荚膜多糖抗原（GXM试验）血清、CSF念珠菌甘露聚糖（M试验）、甘露聚糖抗体（IgG、IgM）血清、CSF第二页，共24页。2IFI血清学检测的应用价值第三页，共24页。3病死率高，预后差治疗：与时间赛跑1.Gareyetal.CID2006;43:25-31;2.Morrelletal.AAC2005;49:3640-51美国单中心，157念珠菌菌血症2美国4中心，230念珠菌菌血症IFI—临床诊治的巨大挑战第四页，共24页。4G试验检测侵袭性曲霉感染（IA）40名确诊或拟诊IA患者敏感性87.5%,特异性89.6%,PPV70%，NPV

96.3%其中确诊IA

100%敏感，拟诊IA

60%敏感确诊或拟诊IFI，平均比出现临床症状和体征早10d；阳性患者中70%比临床表现早3天第五页，共24页。5IFI血清学检测的应用价值第六页，共24页。6单一检测有局限性

G试验假阳性影响因素血液透析患者（纤维素膜）细菌血症、肝硬化、小肠结肠炎患者使用凝血因子、白蛋白、免疫球蛋白抗肿瘤治疗：蘑菇多糖、裂褶菌多糖手术中使用棉纱垫、棉拭子等标本溶血、脂血、黄疸标本污染（床边消毒纱布，实验室环境粉尘）实验耗材：所有枪头、试管、玻璃管均应无热原IV抗生素（β-内酰胺类：AMC/SAM…）患者使用阿莫西林/棒酸，哌拉西林/他唑巴坦

(D-葡聚糖存在于生产工艺中的一些例如纤维过滤膜的成分中)KullbergBJ,ArendrupMC.NEnglJMed2015;373:1445-56.SulahianAetal.JClinMicrobiol2014;52:2328-33.第七页，共24页。7单一检测有局限性

GM试验假阳性影响因素抗菌药物：哌拉西林-三唑巴坦采样：用药前，或在血药浓度较低时高剂量使用激素透析：不能清除大分子GM化疗的严重黏膜炎的患者谷类食物和脂质甜点中的GM抗原通过肠道入血儿童和新生儿：假阳性83%母乳或配方食品中双歧杆菌与GM有交叉反应交叉反应真菌：青霉、拟青霉、隐球菌、头状地霉、组织胞浆菌等接受心肺旁路手术自身免疫性肝炎等免疫性疾病接受白蛋白、免疫球蛋白和其他营养液治疗第八页，共24页。8SuhailAhmad,ZiauddinU.Khan.DiagnosticvalueofDNA,(1-3)-β-D-glucan,andgalactomannandetectioninserumandbronchoalveolarlavageofmiceexperimentallyinfectedwithAspergillusterreus[J].DiagnosticMicrobiologyandInfectiousDisease59(2007)165–171单独检测：联合检测：G和GM试验联合检测提高检测敏感性血清血清敏感性特异性第九页，共24页。9MunozP,GuineaJ,BouzaE.Updateoninvasiveaspergillosis:clinicalanddiagnosticaspects[J].ClinicalMicrobiologyandInfection,2006,12(s7):24-39.G和GM实验联合检测能提高检测的特异性（Specificity）和阳性预测值（PPV）GM实验G实验联合检测第十页，共24页。10收集北京友谊医院2013年5月-2014年1月住院患者与健康人共107例，包括:念珠菌血症13例危险因素组（临床诊断侵袭性念珠菌病或接受化疗恶性疾病、留置深静脉置管等侵袭性念珠菌高危病人）63例对照组（健康体检人群）31例使用丹娜ELISA试剂盒进行检测血清甘露聚糖抗原（Mn）与甘露聚糖IgG抗体（Mn-IgG抗体）。念珠菌抗原抗体联合检测的研究陈玲，王红，张淑文等.中国真菌学杂志，2014,9(6):325-330第十一页，共24页。11念珠菌抗原抗体联合检测的研究陈玲，王红，张淑文等.中国真菌学杂志，2014,9(6):325-330Mn抗原Mn-IgG抗体敏感度41.7%91.7%特异度98.8%52.8%阴性预测值92.4%100%阳性预测值100%27.5%3、结论甘露聚糖抗原在诊断念珠菌血症时的特异度较高。甘露聚糖IgG抗体在诊断念珠菌血症的敏感性较高。两者的联合检测可以适当提高检测的敏感度与特异度，有助于念珠菌血症的诊断。第十二页，共24页。12种属G试验GM试验

Mn试验GXM试验

念珠菌属+-+-镰刀菌属+---隐球菌属

---+曲霉菌属++--青霉菌属+-（可有假阳性）--接合菌纲

----多种试验的联合检测，能够在早期快速、有效的确定菌属，提高检出率和准确性四种抗原联合检测有助于真菌种属的鉴别第十三页，共24页。13IainD.Page,MalcolmRichardsonandDavidW.Denning.Antibodytestinginaspergillosis—quovadisMedicalMycology,2015,53,417–439曲霉菌抗原抗体联合检测在

不同类型肺曲霉病中的价值基于6.3万IA，24万CPA和88.7万ABPA患者的统计结果。IACPAABPAGM62%23%0%IgG65%100%65%IgE0%66%100%第十四页，共24页。14不同的检测方法联合检测有助于诊断不同类型的曲霉病第十五页，共24页。15抗原检测抗体检测结果判定++深部感染+-早期感染，未产生抗体或免疫力低下，无抗体产生-+感染一段时间，抗原可能分解，或者抗原被抗体中和--非本检测项感染抗原与抗体联合检测的意义针对患者不同的病程，抗原、抗体的定量检测结果提高了阳性检出率抗原、抗体联合检测有助于防止漏检抗原、抗体的浓度变化能提示临床确定停药时间提供参考依据真菌感染G实验筛查抗原检测抗体检测第十六页，共24页。16IFI血清学检测的应用价值第十七页，共24页。17强调连续2次阳性第十八页，共24页。18强调连续2次阳性第十九页，共24页。19强调连续2次阳性第二十页，共24页。20JOURNALOFCLINICALMICROBIOLOGY,Oct.2003,p.4551–4558抗体含量(AU/mL)甘露聚糖含量(ng/mL)急性粒细胞白血病（粒缺病人）白细胞数目(103/mL)