转录第二部分详解

转录第二部分详解演示文稿现在是1页\一共有42页\编辑于星期日优选转录第二部分现在是2页\一共有42页\编辑于星期日增强子和沉默子增强子（enhancer）：是一种能够大幅度增强基因转录效率的顺式作用元件。沉默子（silencer）：与增强子相反，是一种阻止基因表达的顺式作用元件。作用特性：与启动子不同，其作用与距离、方向和位置均无关；对临近的基因作用最强；某些增强子或沉默子具有组织特异性。现在是3页\一共有42页\编辑于星期日增强子和沉默子的作用特性现在是4页\一共有42页\编辑于星期日增强子作用的环出模型

现在是5页\一共有42页\编辑于星期日（三）转录因子（transcriptfactor,TF）反式作用因子：是能直接或间接地识别或结合各种顺式作用元件，参与调控基因转录的蛋白质。顺式作用元件必须由反式作用因子与之结合后才能对转录起调控作用。转录因子：真核RNA聚合酶不能识别DNA上的启动子，识别这些启动子序列的反式作用因子称为转录因子。转录因子在转录中主要有两大基本功能：一是作为装配因子或定向因子识别和结合核心启动子，招募RNA聚合酶正确地与启动子结合；其次是调节RNA聚合酶的活性现在是6页\一共有42页\编辑于星期日参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ

TFⅡH57（a）（）TFⅡE与RNA-polⅡ结合，解螺旋酶30，74TFⅡF促进RNA-polⅡ结合及作为其他因子结合的桥梁33TFⅡB稳定TFⅡD与启动子的结合12，19，35TFⅡA辅助TBP-DNA结合TAF**结合TATA盒TBP*38TFⅡD功能亚基组成，分子量(kD)转录因子ATPase,解螺旋酶和CTD激酶活性促进启动子的解链和清空TFⅡH与RNA-polⅡ结合，协助招募TFⅡH，激活TFⅡH，促进启动子解链57（a）TFⅡE30，74TFⅡF促进RNA-pol结合及作为其他因子结合的桥梁33TFⅡB12，19，35TFⅡA辅助-DNA结合TAF**结合TATA盒TBP*38TFⅡD功能亚基组成，分子量(kD)转录因子b34现在是7页\一共有42页\编辑于星期日（四）真核生物RNA聚合酶II所负责的基因转录过程1.转录起始真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。转录起始前复合物(pre-initiationcomplex,PIC)：真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。现在是8页\一共有42页\编辑于星期日POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化转录的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化现在是9页\一共有42页\编辑于星期日POLIIIIFCTD转录预起始复合物的形成INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJE现在是10页\一共有42页\编辑于星期日转录起始复合物的形成——CTD的磷酸化INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJEPOLIIIIFCTDPPPPATP现在是11页\一共有42页\编辑于星期日启动子清空INRTATAUPE-20+1IIDIIAIIBHJEPOLIICTDPPPPNTPsmRNA前体转录延伸因子现在是12页\一共有42页\编辑于星期日模板理论(piecingtheory)一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。现在是13页\一共有42页\编辑于星期日（二）转录延长转录因子TFⅡS参与延伸真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。RNA-pol前移处处都遇上核小体。转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。现在是14页\一共有42页\编辑于星期日RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小体转录延长中的核小体移位转录方向现在是15页\一共有42页\编辑于星期日5------AAUAAA-5------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG转录终止的修饰点55333加尾AAAAAAA······3mRNA——和转录后修饰密切相关。（三）转录终止-3’末端的产生和多聚腺苷酸化现在是16页\一共有42页\编辑于星期日转录后加工Post-transcriptionalProcessing第三节现在是17页\一共有42页\编辑于星期日一、真核生物mRNA的转录后加工（一）首、尾的修饰5端形成帽子结构(m7GpppGp—)3端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)现在是18页\一共有42页\编辑于星期日帽子结构现在是19页\一共有42页\编辑于星期日5’端加帽：现在是20页\一共有42页\编辑于星期日5端帽子结构的功能提高mRNA的稳定性参与识别起始密码子的过程，提高mRNA的可翻译性有助于mRNA通过核孔从细胞核运输到细胞质提高剪接反应的效率。现在是21页\一共有42页\编辑于星期日变性与成熟的mRNA杂交；在电镜下观察DNA模板链成熟的mRNA（二）mRNA的剪接R-环技术发现基因断裂现象现在是22页\一共有42页\编辑于星期日鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图DNAmRNA目录R-环技术发现基因断裂现象现在是23页\一共有42页\编辑于星期日真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。1.断裂基因(splitegene)CABD编码区A、B、C、D非编码区现在是24页\一共有42页\编辑于星期日2.外显子(exon)和内含子(intron)外显子在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列，也就是基因中编码氨基酸的序列。内含子隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列，也就是基因中不编码氨基酸的序列。现在是25页\一共有42页\编辑于星期日鸡卵清蛋白基因hnRNA首、尾修饰hnRNA剪接成熟的mRNA鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰现在是26页\一共有42页\编辑于星期日3.mRNA的剪接（RNAsplicing）mRNA的剪接：除去hnRNA中的内含子，并将相邻的外显子连接起来，形成成熟的mRNA。snRNP与hnRNA结合成为剪接体（splicesome）核内的蛋白质小分子核糖核酸蛋白体（snRNP发音为snurps

）snRNA参与剪接的主要有：U1-snRNP、U2-snRNP、U4-snRNP、U5-snRNP和U6-snRNP。现在是27页\一共有42页\编辑于星期日①剪接体组装过程剪接供体位点剪接受体位点分支点现在是28页\一共有42页\编辑于星期日②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4无活性的剪接体U5激活的剪接体现在是29页\一共有42页\编辑于星期日剪接过程中的两次转酯反应现在是30页\一共有42页\编辑于星期日二、真核细胞tRNA的转录后加工tRNA前体RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA目录现在是31页\一共有42页\编辑于星期日RNAaseP（外切酶）、内切酶目录1.剪切和修剪：核糖核酸酶催化现在是32页\一共有42页\编辑于星期日tRNA核苷酸转移酶、连接酶ATPADP目录2.添加CCA现在是33页\一共有42页\编辑于星期日3.碱基修饰（2）还原反应如：UDHU（3）核苷内的转位反应如：Uψ（4）脱氨反应如：AI如：AAm（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）目录现在是34页\一共有42页\编辑于星期日4.酵母Pre-tRNA的剪接真核细胞Pre-RNA具有小的内含子现在是35页\一共有42页\编辑于星期日三、真核细胞rRNA前体的后加工1)剪切、修剪和修饰2)剪接（某些真核生物，如四膜虫）现在是36页\一共有42页\编辑于星期日四膜虫rRNA内含子的二级结构1.四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式5´-端核苷酸序列四、核酶现在是37页\一共有42页\编辑于星期日最简单的核酶二级结构——锤头状结构(hammerheadstructure)通常为60个核苷酸左右同一分子上包括有催化部份和底物部份催化部份和底物部份组成锤头结构除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。2.核酶：具有催化性质的RNA底物部分现在是38页\一共有42页\编辑于星期日3.核酶研究的意义核酶的发现，对中心法则作了重要补充；核酶的发现是对传统酶学的挑战；利用核酶的结构设计合成人工核酶；生命的起源：“RNA世界”？现在是39页\一共有42页\编辑于星期日反转录ReverseTranscription现在是40页\一共有42页\编辑于星期日反转录酶(reversetranscriptase）：

以RNA为模板，四种dNTP为底物，依据碱基互补原则指导合成DNA链的酶，又称逆转录酶、反向转录酶。含有此种酶的病毒称为反转录病毒。现在是41页\一共有42页\编辑于星期日反