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文档简介

实验六酶的特异性生物化学实验之－－【实验目的】

学习酵母蔗糖酶（粗提液）和唾液淀粉酶的制备，了解酶的特异性及检测方法。【实验原理】

酶是生物催化剂，酶对所作用的底物有严格的选择性，即酶的特异性。淀粉和蔗糖都是非还原性糖，分别为唾液淀粉酶和蔗糖酶的专一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有还原性的麦芽糖，蔗糖被蔗糖酶水解生成具有还原性的葡萄糖和果糖。Benedict试剂（含有Cu2+）常用于检验还原糖的存在，其被还原后生成砖红色的Cu2O沉淀。【器材及试剂】（一）器材：1.恒温水浴锅2.试管及试管架3.离心机4.吸量管5.烧杯、量筒、漏斗等（二）试剂：1.2%蔗糖2.1%淀粉（内含0.3%的NaCl）3.唾液淀粉酶溶液4.蔗糖酶溶液5.Benedict试剂2.取试管5支，标号，按下表所列的次序操作：试剂试管编号123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—唾液淀粉酶（ml）——1.01.01.0蒸馏水（ml）1.01.0——1.0

3.

摇匀，置37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂2ml，再放沸水浴5min。观察各管颜色变化，并解释实验结果。(二)蔗糖酶的特异性1.蔗糖酶溶液的制备：取活性干酵母1.0g，置于研钵中，加少量蒸馏水及石英砂研磨提取约10min，再加蒸馏水至总体积约为20ml，过滤或离心，滤液或上清液备用。3.摇匀，

置37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂2ml，再放沸水浴5min。观察各管颜色变化，并解释实验结果。【注意事项】

唾液的稀释倍数因人而异，有时差别很大，稀释倍数可以是50～300倍。【思考题】1、若将淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min，实验结果会发生什么样的变化？2、酶作用的专一性有哪几种？量程的调节

1.按照从大体积调为小体积的方法调节。2.用拇指和食指旋转取液器上的旋钮，使数字窗口出现所需容量体积的数字。注意：千万不要将旋钮旋出最大量程，否则会卡住内部机械装置或者弹簧弹出而损坏了移液枪。

微量移液器的使用方法枪头（吸液嘴）的装配

在将枪头（pipettetips）套上移液枪时，正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。移液器的正确放置

使用完毕，可以

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