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文档简介
体外受精和早期胚胎培养第1页,共40页,2023年,2月20日,星期三精子的形成过程返回精子的形成过程第2页,共40页,2023年,2月20日,星期三有丝分裂精细胞联会四分体精子初级精母细胞次级精母细胞体细胞精原细胞细胞分化复制第3页,共40页,2023年,2月20日,星期三线粒体高尔基体A、顶体的发生发育中的顶体发育中的尾
(中心体)B、尾的的发育C、精子头的出现D、细胞质浓缩E、精子的形成原生质滴尾线粒体鞘顶体①精子细胞变形成精子的过程第4页,共40页,2023年,2月20日,星期三在完成被包围,形成卵泡一般不进行MⅡ有丝分裂MⅠ卵原细胞卵子发生过程胎儿时期第一极体MⅡ卵子第二极体退化消失受精初级卵母细胞次级卵母细胞合子卵泡细胞受精过程排卵前后在中,场所为。输卵管第5页,共40页,2023年,2月20日,星期三
(1).相似点:最初阶段均进行有丝分裂,不断增加生殖原细胞的数量;经过减数分裂(MⅠ和MⅡ)才能形成精子或卵子。
精子和卵子的发生异同第6页,共40页,2023年,2月20日,星期三
(2).不同点:发生时间场所子细胞数目变形形状精子卵子重要区别两次分裂连续,在睾丸曲细精管两次分裂不连续,在卵巢和输卵管初情期以后胎儿时期4个精子细胞1个卵细胞2个极体是否蝌蚪形圆形哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备是在出生前完成的;精子是从初情期开始的第7页,共40页,2023年,2月20日,星期三1、概念:指和结合形成(即)的过程。2、标志:在和的间隙可以观察到两个极体时。3、场所:受精是在内完成的。受精:精子受精卵卵黄膜透明带输卵管卵子合子第8页,共40页,2023年,2月20日,星期三精子穿越和受精前的准备阶段受精阶段受精过程精子获能准备阶段1:卵子的准备准备阶段2:放射冠雌雄原核形成和透明带配子的结合精子进入卵黄膜第9页,共40页,2023年,2月20日,星期三受精卵卵裂期桑椹胚囊胚(内含囊胚腔)原肠胚(内含原肠腔)胎儿形成:在透明带内进行有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎总体积并不增加,或略有减少。:由具有全能性细胞构成,细胞数在32个左右,排列紧密,形似桑椹内细胞团:发育成胎儿各组织滋养层细胞:发育成胎膜和胎盘:最初发育在输卵管进行有丝分裂胚胎发育小结:滋养层外胚层中胚层内胚层原肠腔第10页,共40页,2023年,2月20日,星期三受精卵第一次卵裂第二次卵裂第三次卵裂囊胚囊胚囊胚腔原肠腔原肠胚外胚层中胚层内胚层———————内胚层——中胚层——原肠胚胚的发育:按照一定的次序向内运动受精卵——卵裂——囊胚原肠胚的形成第11页,共40页,2023年,2月20日,星期三1.表中哪种动物的胚胎在进入子宫时发育程度最高?提示:马的胚胎进入子宫时发育程度最高,其次为小鼠。2.将体外培养的马胚胎移植到母马子宫时,应选择什么阶段的胚胎?如果换成牛又该怎样处理?提示:马应选择囊胚阶段的胚胎。牛在自然情况下,胚胎虽然最早可在8~16细胞阶段进入子宫,但为了提高移植后胚胎的发育率和妊娠率,在实践中通常用发育到囊胚阶段的胚胎进行移植。资料分析:(教材P67)第12页,共40页,2023年,2月20日,星期三3.为什么说关于动物的体内受精和胚胎发育的研究,会为胚胎工程提供理论基础?请结合本节内容举例说明。提示:胚胎工程的许多技术都是在了解哺乳动物自然条件下受精和早期胚胎发育的基础上实现的。本节涉及的哺乳动物体内受精和胚胎发育都是在自然条件下的特点和规律,人们正是在认识了这些自然规律的基础上,在体外进行有效的模拟,才使卵母细胞能在体外成熟;精子能在体外完成获能;获能精子和成熟卵母细胞能在试管内完成受精;体外受精卵能在人工培养条件下继续发育等,这些都有赖于体内自然条件下的基础研究成果。第13页,共40页,2023年,2月20日,星期三3.2体外受精和早期胚胎培养第14页,共40页,2023年,2月20日,星期三1978年7月25日世界首例试管婴儿第15页,共40页,2023年,2月20日,星期三1988年3月10日我国首例试管婴儿第16页,共40页,2023年,2月20日,星期三1992年我国首例三胞胎试管婴儿第17页,共40页,2023年,2月20日,星期三根据资料回答下列问题:1.上述资料用到了什么生物技术?
试管婴儿技术(包括体外受精、胚胎体外培养)和胚胎移植技术。2.试管婴儿和母亲正常怀孕,生产的过程有何异同?相同之处:都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。第18页,共40页,2023年,2月20日,星期三一、教学目标:1.简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。2.简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。二、教学重点:1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。三、教学难点:1.卵母细胞的采集和培养。2.精子的采集和获能。第19页,共40页,2023年,2月20日,星期三一、试管动物技术概念:通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术。过程:卵子精子早期胚胎个体胚胎移植子宫受精卵体外受精第20页,共40页,2023年,2月20日,星期三1982年世界首例试管牛犊问世
实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是
和
的培养。体外受精早期胚胎第21页,共40页,2023年,2月20日,星期三胚胎移植采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产的技术流程图第22页,共40页,2023年,2月20日,星期三
主要包括
、
和
等几个主要步骤。概念:采取雌性动物的
和雄性动物的
,使其在
中受精。二、体外受精卵细胞精子试管卵细胞的采集精子的获取受精第23页,共40页,2023年,2月20日,星期三1.卵母细胞的采集和培养
对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等卵母细胞的采集:
最常用的方法是卵巢经过
处理,具体做法是给供体注射
,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从
中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。超数排卵促性腺激素输卵管第24页,共40页,2023年,2月20日,星期三
大家畜或大型动物,如牛,卵细胞的采集:
从屠宰场已屠宰母畜的
中采集卵母细胞,也可以借助
、
或
等工具确定卵泡位置,直接从活体动物中吸取卵泡液(连同卵母细胞)取出,在体外进行人工培养,使其成熟。卵巢超声波(B超)探测仪内窥镜腹腔镜牛卵巢MII中期第25页,共40页,2023年,2月20日,星期三活体采集的牛卵母细胞第26页,共40页,2023年,2月20日,星期三2.精子的收集和获能
1)收集的方法:假阴道法,手握法和电刺激等2)获能处理:培养法:啮齿动物、家兔和猪化学法:牛、羊培养法:精子在获能液中获能。化学诱导法:精子一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导获能。第27页,共40页,2023年,2月20日,星期三三、受精获能的精子+成熟的卵子(MII)
获能液受精卵或受精液胚胎发育培养液第28页,共40页,2023年,2月20日,星期三第29页,共40页,2023年,2月20日,星期三四、胚胎的早期培养概念:是应用人工创造条件,对获取的进行体外培养。培养液成分:水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等早期胚胎第30页,共40页,2023年,2月20日,星期三不同动物胚胎移植时间不同牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段小鼠、家兔:卵裂期或囊胚阶段试管婴儿:8个或16个细胞阶段
胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。第31页,共40页,2023年,2月20日,星期三第32页,共40页,2023年,2月20日,星期三
试管动物与克隆动物相比生殖方式:技术手段:遗传规律:有性生殖无性生殖核移植技术、胚胎移植遵循无体外受精胚胎移植第33页,共40页,2023年,2月20日,星期三
一、试管动物技术1.试管动物技术是指:通过___________使卵子和精子在___________成熟和受精,并通过培养发育为______后再经移植产生后代的技术。2.这项技术的前期工作包括___________和___________。人工操作体外条件下早期胚胎体外受精早期胚胎二、体外受精:1.哺乳动物的体外受精主要包括___________、___________和___________等主要步骤。2.卵母细胞的采集和培养对于实验动物如小鼠、兔、猪、羊,常采用_______处理,使其排出更多的___________,然后从________中冲取卵子。卵母细胞的采集
精子的获取
受精
促性腺激素卵子输卵管第34页,共40页,2023年,2月20日,星期三3.精子的采集和获能:⑴收集精子的方法:⑵精子体外获能的方法①培养法:采用将精子放人人工配制的___________中使其获能。②化学诱导法:将精子放在一定浓度的___________或钙离子载体A23187溶液中,用___________诱导精子获能。
4.受精:___________和培养成熟的卵子,一般情况下都可以在___________或_________
__中完成受精。获能液
肝素
化学药物
获能的精子
获能溶液
专用的受精溶液
第35页,共40页,2023年,2月20日,星期三三、胚胎的早期培养1.哺乳动物胚胎的培养液成分:2.胚胎早期培养的目的(1)精子和卵细胞在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查________和___________。(2)当胚胎发育到适宜的阶段进行_______或_______。3.胚胎移植的时间(1)牛、羊一般在___________或___________进行移植。(2)人的体外受精胚胎,即试管胚胎,可在_______阶段移植。受精状况
受精卵的发育能力
桑椹胚阶段
囊胚阶段受体移植
冷冻保存8-16个细胞第36页,共40页,2023年,2月20日,星期三巩固练习1.下列不属于胚胎工程的是:()A.体外受精B.胚胎分割、胚胎移植C.胚胎干细胞培养D.转基因鲤
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