细胞的内膜系统与囊泡转运课件

第五章细胞的内膜系统与囊泡转运现在是1页\一共有114页\编辑于星期日定义：指位于细胞质内，在结构，功能乃至发生上有一定联系的膜性结构的总称，是一连续的统一体。内质网高尔基复合体溶酶体过氧化氢体线粒体虽然也是由膜结构组成的，但不属于内膜系统。Endomenbranesystem核膜各种内体现在是2页\一共有114页\编辑于星期日

内膜系统分布于细胞质基质中。细胞质基质也称为胞质溶胶，是细胞质中除各种细胞器和内含物以外的较为均质而半透明的液体部分。化学组成小分子：包括水、无机离子（K+、Na+、Ca2+等）中等分子：脂类、糖类、氨基酸、核苷酸及其衍生物等。大分子：多糖、蛋白质、脂蛋白和RNA等。此外，细胞质基质中还含有大量的酶，它们是大分子合成和代谢所必需的。

细胞质基质的主要功能有离子环境、提供底物和反应场所。Cytoplasticmatrix现在是3页\一共有114页\编辑于星期日第一节内质网(Endoplasmicreticulum,ER)K.R.Porter等于1945年发现于培养的小鼠成纤维细胞，因最初看到的是位于细胞质内部的网状结构，故名内质网（endoplasmicreticulum，ER）。现在是4页\一共有114页\编辑于星期日Microsome（微粒体）细胞匀浆经过超速离心所得到的微细颗粒。分粗面微粒体和滑面微粒体。一内质网的化学组成现在是5页\一共有114页\编辑于星期日现在是6页\一共有114页\编辑于星期日现在是7页\一共有114页\编辑于星期日核膜外层二.内质网的形态结构内质网ER是由一层单位膜围成的形状大小不同的小管、小泡、扁囊状结构，相互连接形成一个连续的网状膜系统。ER约占细胞总膜面积的一半，是封闭的网络系统小管小泡扁囊状细胞膜核膜内质网细胞膜内质网的内腔相互连通。现在是8页\一共有114页\编辑于星期日现在是9页\一共有114页\编辑于星期日现在是10页\一共有114页\编辑于星期日RER现在是11页\一共有114页\编辑于星期日现在是12页\一共有114页\编辑于星期日SER现在是13页\一共有114页\编辑于星期日粗面内质网（RER):①膜表面附着核糖体；②形态多为板层状排列的扁囊；③多分布在分泌活动旺盛或分化较完善的细胞内。滑面内质网（SER):①膜表面无核糖体附着；②形态多为分枝小管或小泡；③多分布在一些特化的细胞中。核糖体粗面内质网粗面内质网滑面内质网滑面内质网现在是14页\一共有114页\编辑于星期日细胞不含纯粹的RER或SER，它们分别是ER连续结构的一部分。现在是15页\一共有114页\编辑于星期日现在是16页\一共有114页\编辑于星期日现在是17页\一共有114页\编辑于星期日粗面内质网合成的蛋白质：现在是18页\一共有114页\编辑于星期日现在是19页\一共有114页\编辑于星期日现在是20页\一共有114页\编辑于星期日现在是21页\一共有114页\编辑于星期日现在是22页\一共有114页\编辑于星期日现在是23页\一共有114页\编辑于星期日现在是24页\一共有114页\编辑于星期日信号肽假说----------1975年----------Bloble提出游离核糖体上信号肽的合成信号识别颗粒（SRP）识别信号肽，SRP-核糖体复合体形成，翻译暂停核糖体停泊于内质网膜通道蛋白移位子上，形成SRP-SRP受体-核糖体复合体核糖体在一种脱落因子作用下被分解主要过程目前普遍用★信号肽假说来解释分泌蛋白质的合成过程的。SRP脱离并参加再循环，核糖体翻译继续进行信号肽被切除，成熟的蛋白质落入内质网腔现在是25页\一共有114页\编辑于星期日现在是26页\一共有114页\编辑于星期日信号肽(signalpeptide)信号识别颗粒(signalrecognitionparticle,SRP)◆信号序列特征:16-26个氨基酸残基，其中含有4-12个疏水残基◆特异性:◆位置:N-端突出的一段肽;内信号肽存在于胞质中的核糖体结合蛋白颗粒，由6个蛋白质亚基和一个小的7SRNA组成。含三个功能域:翻译暂停结构域(P9/P14)信号肽识别结合位点(P54)SRP受体蛋白结合位点(P68/P72)。现在是27页\一共有114页\编辑于星期日锚泊蛋白（Dockingprotein,DP）/SRP-R

●是SRP在内质网膜上的受体蛋白●两个亚基:亲水的α亚基,疏水的β亚基移位子(translocon):内质网膜上亲水通道信号肽酶(signalpeptidase)分离因子(detachmentfactor)现在是28页\一共有114页\编辑于星期日核糖体循环现在是29页\一共有114页\编辑于星期日多聚核糖体(polyribosome)现在是30页\一共有114页\编辑于星期日现在是31页\一共有114页\编辑于星期日新生肽链协同翻译插入内信号肽介导现在是32页\一共有114页\编辑于星期日现在是33页\一共有114页\编辑于星期日现在是34页\一共有114页\编辑于星期日现在是35页\一共有114页\编辑于星期日2参与糖原代谢肝细胞的一个重要功能是维持血液中葡萄糖水平的恒定，这一功能与葡萄糖-6-磷酸酶的作用密切相关。在肝细胞中，糖原裂解释放葡萄糖-1-磷酸，然后再转变成葡萄糖-6-磷酸，由于磷酸化的葡萄糖不能通过细胞质膜，滑面内质网上的葡萄糖-6-磷酸酶将葡萄糖-6-磷酸水解为葡萄糖和磷酸后，葡萄糖就可穿过细胞质膜进入血液。现在是36页\一共有114页\编辑于星期日3肝细胞解毒的主要场所混合功能的氧化酶（mixed-functionoxidases）：在氧和NADPH存在下，将一些有毒物质氧化，并且每氧化一分子底物，要消耗一分子的氧，进而将NADPH转变成NADP+.由于这种反应的一个氧原子出现在产物中，其他则存在于水分子中，所以将催化这种类型氧化作用的酶称为混合功能的氧化酶。细胞色素P-450（cytochromeP-450）的羟基化作用：微粒体的混合功能的氧化酶系统类似一条呼吸链，由几个组分组成，核心成员是细胞色素P-450.细胞色素P-450参与有毒物质以及类固醇和脂肪酸的羟基化，羟基化涉及四个基本反应∶被氧化的物质同细胞色素P-450结合→细胞色素P-450中的铁原子被NADPH还原→氧同细胞色素P-450结合→底物结合一个氧原子被氧化，另一个氧原子用于形成水。被氧化的底物由于带上羟基，增强水溶性，容易被分泌排出。现在是37页\一共有114页\编辑于星期日4Ca2+的储存场所肌质网是细胞内特化的滑面内质网，是贮存Ca2+的细胞器。肌质网膜上重要的膜蛋白是Ca2+-ATP酶，滑面内质网可构成心肌和骨胳肌肌原纤维周围的肌质网。当肌细胞膜的兴奋信号传递到肌质网时则引起肌质网释放Ca2+，从而导致肌细胞的收缩活动。当肌肉松弛时，钙离子又重新泵回肌质网。所以肌质网实际上是作为钙库，其内有钙结合蛋白，每个钙结合蛋白可以结合30个左右的Ca2+。现在是38页\一共有114页\编辑于星期日5与胃酸、胆汁合成与分泌有关合成HCl合成胆盐现在是39页\一共有114页\编辑于星期日1898意大利神经解剖学家高尔基（CamilloGolgi)：光镜下观察枭、猫的神经细胞发现。第二节高尔基复合体(Golgicomplex)现在是40页\一共有114页\编辑于星期日一.高尔基体的结构与化学组成光镜：网状结构电镜扁平囊泡成熟面小囊泡大囊泡形成面反面高尔基网状结构高尔基中间膜囊顺面高尔基网状结构现在是41页\一共有114页\编辑于星期日扁平囊呈盘状，3-10层——高尔基堆

凹面：成熟面、反面；凸面：形成面、顺面；凸面/形成面/顺面小囊泡囊腔内含：中等电子密度的物质泡内含物质：低电子密度，较透明。来源：小囊泡融合。来源：由rER‘芽生’而来。大囊泡泡内含物质：高电子密度，浓缩泡。来源：扁平囊周边或局部膨突脱落形成。凹面/成熟面/反面现在是42页\一共有114页\编辑于星期日培养的上皮细胞中高尔基体的分布（高尔基体为红色，核为绿色）

现在是43页\一共有114页\编辑于星期日现在是44页\一共有114页\编辑于星期日现在是45页\一共有114页\编辑于星期日现在是46页\一共有114页\编辑于星期日高尔基体膜含有大约60%的蛋白和40%的脂类，具有一些和ER共同的蛋白成分。膜脂中磷脂酰胆碱的含量介于ER和质膜之间，中性脂类主要包括胆固醇，胆固醇酯和甘油三酯。高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。二.高尔基复合体的化学组成标志酶：糖基转移酶现在是47页\一共有114页\编辑于星期日高尔基体各部分标志的细胞化学反应：①嗜锇反应：经锇酸浸染后，cis面膜囊被特异地染色；②焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)：可特异显示高尔基体的trans面的1～2层膜囊；③烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)：可显示高尔基体中间几层扁平囊；④胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)：可显示靠近trans面上的一些膜囊状和管状结构，CMP酶也是溶酶体的标志酶。

现在是48页\一共有114页\编辑于星期日二.高尔基复合体的功能（一）与细胞的分泌活动有关3H标记亮氨酸3分钟17分钟117分钟高尔基复合体在细胞分泌活动中起着重要的运输作用；在分泌颗粒的形成过程中起着浓缩、修饰、加工等作用。现在是49页\一共有114页\编辑于星期日Golgicomplexandcell’ssecretion连续分泌Continual,unregulateddischargeofmaterialfromthecells非连续分泌Thedischargeofproductsstoredincytoplasmicgranules,inresponsetoappropriatestimuli.现在是50页\一共有114页\编辑于星期日1.糖蛋白的加工合成N-连接的寡糖链：在rER腔内合成。O-连接的寡糖链：在高尔基复合体内合成。糖蛋白3H标记甘露糖3H标记半乳糖；唾液酸糖3H标记N-乙酰葡萄糖胺高尔基复合体对糖蛋白的合成和修饰过程具有严格的顺序性。二胞内物质的加工修饰等现在是51页\一共有114页\编辑于星期日现在是52页\一共有114页\编辑于星期日2.蛋白质的水解加工无活性的前体物质（某些肽类激素）加工改造有生物活性的物质（激素）现在是53页\一共有114页\编辑于星期日三高尔基复合体是胞内蛋白质的分选和膜泡定向运输的枢纽蛋白质合成溶酶体寡聚糖磷酸化切除甘露糖加N-乙酰葡萄糖胺加半乳糖加唾液酸；分拣溶酶体顺面管网中层囊反面囊反面管网大泡（分泌颗粒）rER高尔基复合体顺面囊高尔基堆现在是54页\一共有114页\编辑于星期日第三节溶酶体20世纪——40年代末——鼠肝匀浆离心——酸性磷酸酶1955年——deDuve等人——电镜——鼠肝细胞——细胞化学显示(lysosome)现在是55页\一共有114页\编辑于星期日一溶酶体的形态特点和化学组成1溶酶体是一种具有高度异质性的膜性细胞器现在是56页\一共有114页\编辑于星期日溶酶体的酶溶酶体含60多种水解酶，这些水解酶多为酸性水解酶；PH值4-6。酶蛋白酶（肽酶）核酸酶磷酸酶糖苷酶酯酶硫酸酯酶（分解氨基多糖的酶）标志酶：酸性水解酶现在是57页\一共有114页\编辑于星期日现在是58页\一共有114页\编辑于星期日现在是59页\一共有114页\编辑于星期日1、初级溶酶体（primarylysosome）（内体性溶酶体）：只含酶，不含底物。直径约0.2~0.5um，有多种酸性水解酶，但无活性，含蛋白酶，核酸酶、脂酶、磷酶酶等60余种，反应的最适PH值为5左右。二.溶酶体的类型现在是60页\一共有114页\编辑于星期日2、次级溶酶体（secondarylysosome）是正在进行或完成消化作用的溶酶体，内含水解酶和相应的底物，可分为自噬溶酶体（autophagolysosome）和异噬溶酶体(phagolysosome)。次级溶酶体异噬性溶酶体：初级溶酶体+外源性物质——异噬过程自噬性溶酶体：初级溶酶体+内源性物质——自体吞噬（自噬过程）现在是61页\一共有114页\编辑于星期日Secondarylysosome现在是62页\一共有114页\编辑于星期日后溶酶体残余小体三级溶酶体脂褐质含铁小体多泡体髓样结构3、残余小体（residualbody）又称后溶酶体（post-lysosome）已失去酶活性，仅留未消化的残渣，故名。残体可通过外排作用排出细胞，也可能留在细胞内逐年增多，如表皮细胞的老年斑，肝细胞的脂褐质。现在是63页\一共有114页\编辑于星期日肝细胞脂褐质现在是64页\一共有114页\编辑于星期日内体初级溶酶体吞噬体异溶酶体吞饮体异溶酶体自噬体自溶酶体分泌颗粒分泌溶酶体次级溶酶体残质体异噬作用自噬作用现在是65页\一共有114页\编辑于星期日现在是66页\一共有114页\编辑于星期日三溶酶体形成与成熟过程（一）内体性溶酶体是由运输小泡和内体合并而成现在是67页\一共有114页\编辑于星期日现在是68页\一共有114页\编辑于星期日Mannose6-phosphateresiduestargetproteinstolysosomesTargetingofsolublelysosomalenzymestoendosomesandlysosomesbyM-6-Ptag现在是69页\一共有114页\编辑于星期日现在是70页\一共有114页\编辑于星期日四.溶酶体的功能一分解外来物质及清除衰老、残损细胞器溶酶体可谓是细胞内的消化器官，能把摄入到细胞内的各种大分子物质借助于水解酶的作用分解为简单物质。现在是71页\一共有114页\编辑于星期日自体吞噬：清除无用的生物大分子，衰老细胞、细胞器、个体发育中多余的细胞。许多生物大分子的半衰期只有几小时至几天，肝细胞中线粒体的平均寿命约10天左右。现在是72页\一共有114页\编辑于星期日二具有物质消化及细胞营养功能简单分子可透过次级溶酶体的膜，在细胞质内继续代谢而被利用，以补充细胞内所需营养，故溶酶体对细胞有消化营养作用。现在是73页\一共有114页\编辑于星期日三机体防御保护功能的组成部分巨噬细胞细胞吞噬的细菌、病毒颗粒均在溶酶体作用下杀灭现在是74页\一共有114页\编辑于星期日四参与某些腺体组织细胞分泌过程调节如甲状腺素则是在溶酶体的参与下形成的。甲状腺滤泡上皮细胞甲状腺球蛋白在滤泡腔内碘化后重新进入滤泡上皮细胞内形成大胶滴大胶滴与细胞内的溶酶体融合蛋白酶将碘化的甲状腺球蛋白水解生成甲状腺素甲状腺素通过细胞基部进入血液现在是75页\一共有114页\编辑于星期日无尾两栖类蝌蚪变态时的尾部吸收、哺乳类动物子宫内膜的周期性萎缩，均与溶酶体有密切关系。溶酶体在某些情况下可通过胞吐方式释放到细胞外，消化分解细胞外物质，这种现象体现在受精过程和骨质更新方面。在骨发生和骨再生过程中，溶酶体对骨质的更新起着重要作用。破骨细胞的溶酶体酶能释放到细胞外，分解和消除陈旧的骨基质，这是骨质更新的一个重要步骤。五在生物个体发生与发育过程中起重要作用现在是76页\一共有114页\编辑于星期日第四节过氧化物酶体1954年————Rhodin————电镜————小鼠肾小管上皮细胞————微体一.过氧化物酶体的形态特征(peroxisome)现在是77页\一共有114页\编辑于星期日二.过氧化物酶体所含的酶标志酶：过氧化氢酶。现在是78页\一共有114页\编辑于星期日现在是79页\一共有114页\编辑于星期日现在是80页\一共有114页\编辑于星期日现在是81页\一共有114页\编辑于星期日囊泡以出芽的方式从细胞的一种内膜细胞器脱离后又与另一内膜细胞器发生融合，这种转运过程称为囊泡转运（Vesiculartransport）。第五节囊泡与囊泡转运现在是82页\一共有114页\编辑于星期日特点：真核细胞；双向；有序。也可称为高度有组织的定向运输。作用：保证稳定交换细胞内外物质，传递信号。现在是83页\一共有114页\编辑于星期日一囊泡的来源与类型依被膜小泡(coatedvesicles)包被蛋白的不同分类：网格蛋白包被囊泡(clathrin-coatedvesicle)COPII被膜小泡(COPIIcoatedvesicles)COPI被膜小泡(COPIcoatedvesicles)现在是84页\一共有114页\编辑于星期日一、网格蛋白包被囊泡(Clathrin-CoatedVesicles)网格蛋白衣被小泡是最早发现的衣被小泡，介导高尔基体反面到内体、溶酶体、植物液泡的运输，以及质膜到内膜区隔的膜泡运输。现在是85页\一共有114页\编辑于星期日（1）网格蛋白：包被囊泡表面，提高囊泡表面张力现在是86页\一共有114页\编辑于星期日网格蛋白由3个重链和3个轻链组成，形成一个具有3个曲臂的形状。许多笼形蛋白的曲臂部分交织在一起，形成具有多边形网孔的笼子现在是87页\一共有114页\编辑于星期日网格蛋白小泡现在是88页\一共有114页\编辑于星期日Clathrincoatedvesicles现在是89页\一共有114页\编辑于星期日（2）衔接蛋白：可分别与网格蛋白和被转运的分子相结合，位于网格蛋白和囊泡之间，能催化网格蛋白的聚合、捕获转运分子。现在是90页\一共有114页\编辑于星期日（3）发动蛋白：囊泡颈部，水解GTP使囊泡释放现在是91页\一共有114页\编辑于星期日二、COPⅡ包被囊泡介导从内质网到高尔基体的物质运输。外被蛋白由五种蛋白质亚基构成。现在是92页\一共有114页\编辑于星期日现在是93页\一共有114页\编辑于星期日三、COPI包被囊泡

现在是94页\一共有114页\编辑于星期日CopIVesicles现在是95页\一共有114页\编辑于星期日二囊泡转运现在是96页\一共有114页\编辑于星期日现在是97页\一共有114页\编辑于星期日现在是98页\一共有114页\编辑于星期日SNAREs的作用是保证识别的特异性和介导运输小泡与目标膜的融合，位于运输小泡上的叫作v-SNAREs，位于靶膜上的叫作t-SNAREs现在是99页\一共有114页\编辑于星期日SNAREs现在是100页\一共有114页\编辑于星期日在神经细胞中SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素等细菌分泌的神经性毒素实际上是一类特殊的蛋白酶，能够选择性地降解SNAREs，从而阻断神经传导。病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。现在是101页\一共有114页\编辑于星期日除了融合锚定蛋白，Rab也促进和调节运输小泡的停泊和融合。Rabs与衣被召集GTP酶相似，起分子开关作用，结合GDP失活，位于细胞质中，结合GTP激活，位于细胞膜、内膜和运输小泡膜上，调节SNAREs复合体的形成。Rabs还有许多效应因子（effector）。现在是102页\一共有114页\编辑于星期日现在是103页\一共有114页\编辑于星期日现在是104页\一共有114页\编辑于星期日章节要点内膜系统各细胞器结构、功能及发生