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卵清白蛋白提取的工艺组员：阮金丽刘碧娇魏徐丽梁倩萍·蛋清中各种蛋白的理化性质

名称比例分子量KDa等电点卵清蛋白52%454.5伴清蛋白13%786.6溶菌酶11%284.0-4.3卵类粘蛋白3.5%1410.7卵粘蛋白1.5%18(α)400(β)4.7免疫球蛋白<1.0%不同不同

工艺流程分离蛋清离子交换层析脱盐预处理收集，检测分离蛋清将新鲜鸡蛋洗干净，敲碎蛋壳（大头），小心分离出蛋清和蛋黄，取蛋清预处理1将蛋清缓慢搅拌（以不引起泡沫为准）至胶状部分破坏用蛋清两倍体积的20mmol/LTris-HCl稀释（取样SDS测蛋白含量）2用1mol/L的HCl调pH至6.0，在2℃条件下缓慢搅拌3h，以沉淀伴清蛋白3在4℃、转速为6000r/min条件下，离心5分钟去除沉淀；4上清液用1mol/LNaOH调整到pH8.0，在4℃，转速15000r/min条件下，离心30min，沉淀卵黏蛋白，取上清液备用。离子交换Q-SepharoseF.F阴离子柱分离1溶胀在体积分数为20%乙醇中的强阴离子填料Q-SepharoseFF搅匀，取所需量，静置2用pH8.0的20mmol/L的Tris-HCL起始缓冲液置换20%的乙醇溶液3-5次，最终缓冲液与胶体的体积比为1：3备用。3将Q-SepharoseFF装入色谱柱中，最终体积为40mL。用20mmol/LTris-HCL（pH8.0）平衡色谱柱上样将蛋清制备液以3mL/min加入Q-SepharoseFF色谱柱中待吸附饱和后，用20mmol/LTris-HCL（pH8.0）缓冲液冲洗未结合到Q-SepharoseFF

色谱柱上的蛋白，直到记录仪记录线回到基线7洗脱用含0.15mol/LNaCL的20mmol/LTris-HCL（pH8.0）进行洗脱，收集各洗脱液收集，检测收集洗脱液SDS检测卵清白蛋白的纯度自己好好看一下，一定要弄清楚每一步的作用，要思考！SDS的操作步骤以及所用溶液的配制方法自己找哦。用到层析技术的，装好

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