开题报告-戈婷婷课件

日粮中添加不同水平

的NDOs对锦江黄牛

瘤胃微生物生长、

发酵及组成的影响报告人：戈婷婷指导老师：瞿明仁教授开题报告目录

研究背景及进展

研究意义研究内容及方法技术路线研究预期结果试验创新点一、研究背景随着人们生活水平的提高，对牛肉的需求量增加近年来畜产品安全事件不断发生（如“三聚氰氨”）在肉牛饲料中大量使用抗生素、激素，使牛肉及其产品存在安全隐患因此，开发研制绿色、安全、环保、高效的营养生理调节剂，已成为学术研究的热点，也成为畜牧业可持续发展的当务之急1.促进有益菌的增殖2.提高机体的免疫机能3.调控动物消化道内的微生物区系4.促进营养物质的消化吸收5.预防机体的氧化损伤6.提高动物的生产性能营养生理活性物质的作用二、研究进展研究进展Gamo等的体外实验表明，GOS可以降低反刍动物的甲烷产量1995瞿明仁，凌宝明等.研究表明1.0%果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能作用效果最优200220072005刘兵，瞿明仁等.研究发现日粮中添加1.2%的SBOS更有利于绵羊瘤胃发酵的调控J.D.Quigley等研究发现饲喂添加FOS的血清代乳料，可降低犊牛的腹泻，减少抗生素和电解质的使用，提高犊牛的体增重和饲料转化率2000Newman等报道在牛代乳料中添加MOS，可提犊牛的日增重，并降低疾病发生率三、研究意义

NDOs对锦江黄牛瘤胃的功能作用，从而提高牛肉产品的品质，这在畜牧业生产中具有重要意义目前有关非消化寡糖在反刍动物的研究报道较少，所以本研究对推动NDOs在反刍动物中的应用具有重要意义研究报道出现不一的现象（掩盖效应和稀释效应），所以本试验采用体内和体外、传统和现代相结合的方法，在方法上具有一定的创新意义五、试验设计体外实验（批次培养法）体内实验（饲养试验）总结、分析、得出锦江黄牛NDOs适宜的添加品种及水平发酵参数微生物N产生量DMNP微生物生长效率MOEF对微生物总数及比例的影响（传统方法）对发酵参数及酶活的影响对微生物DGGE图谱带数（Ni）、总带数（N）及丰度（P）影响（16SrDNA和DGGE技术）不同品种和水平的NDOs六、试验方法（体外试验）高水平组中水平组低水平组对照组5头安装瘤胃瘘管的锦江黄牛采集瘤胃液NDOs作为处理因素水浴摇床体外培养24小时用于测定pH、VFA、MCP、NH3-N、NDF、DMNP、MOEF六、试验方法筛选出NDOs的添加品种及水平0.4%0.8%1.2%1.6%2.0%2.0%1.6%1.2%0.8%0.4%0%0%果寡糖甘露寡糖体外培养测定指标NDFpHDMNPMOEFNDF:参照杨胜主编的《饲料分析与饲料质量检测技术》(1993)pH:用pH计测得DMNP、MOEF:参照孟庆翔（1998）“瘤胃稀释率对蛋白质发酵和微生物生长效率的影响”中的测定方法六、试验方法（体内试验）5头安装瘤胃瘘管的锦江黄牛随机分3组青干草+精料预混料+低水平NDOs青干草+精料预混料+中水平NDOs青干草+精料预混料+高水平NDOs

于第3天采集瘤胃液样本预饲期10天正式期5天试验设自身对照测定指标1）采用直接法提取瘤胃微生物总DNA2）采用DNA凝胶回收试剂盒对DNA进行纯化3）瘤胃细菌16SrDNA全序列PCR扩增：引物8f：5’CACGGATCCAGAGTTTGAT(C/T)(A/C)TGGCTCAG1510r：5’GTGAAGCTTAGGG(C/T)TACCTTGTTACGACTT4）PCR产物DGGE图谱的分析：应用Bio—RadDCodeUniversalMutationSystemDGGE电泳系统5）根据DGGE图谱信息得出样品DGGE指纹图谱带数(Ni)、总带数(N)及丰度系数(P=Ni/N)DGGE图谱带数(Ni)总带数(N)及丰度(P)测定指标纤维素酶木聚糖酶蛋白水解酶总脱氢酶蛋白水解酶：按哈兹耶夫方法测定。每分钟催化酪蛋白水解生成lμg酪氨酸的酶量定义为一个酶活单位

纤维素酶：按Steward方法测定，以纯棉花在瘤胃液中培养48小时(38℃)的消失率代表瘤胃液中纤维素酶的相对活力总脱氢酶：按哈兹耶夫方法测定。以38.5℃,pH6.8条件下，每分钟引起测定液吸光度上升0.1的酶量定义为1个酶活单位木聚糖酶：按费笛波方法测定。1g固体酶粉在温度为40℃，pH值5.0条件，1min水解木聚糖生成相当于1μmol木糖还原物质的量为1个酶活力单位七、试验预期成果1）对锦江黄牛瘤胃微生物的区系结构、多样性影响规律2）对锦江黄牛瘤胃发酵类型、发酵参数、发酵活力影响规律3）对锦江黄牛瘤胃液中纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶、总脱氢酶蛋白酶等主要酶活性的影响规律及特征4）对锦江黄牛瘤胃微生物总量、生长速率、生长模型影响规律5）得出锦江黄牛NDOs的适宜添加品种及水平八、试验创新点1）在研究内容上，目前尚未见日粮中添加不同