自动化全血分析的临床应用

仪测血液细胞分析2002年仪测血细胞分析的发展十六世纪人类认识到血液中细胞的存在其后的200年，显微技术的不断发展，人们对血中细胞成份进行分类

1956年，Coulter根据细胞的低导电性，设计了第一台A型单通道分析仪

现今，结合组织化学和免疫组化、高频传导及激光散射等技术，生产出的五分类、多参数血细胞分析系统已得到普及。仪测血液细胞分析的方法1、电阻抗法：

当细胞快速流经小孔时，由于细胞是不良导体，小孔电阻加大，相当于小孔的横截面积减少，在电流恒定的情况下，出现瞬间的电压变化而产生一个电脉冲，电脉冲的数量就是流经小孔的细胞数；电脉冲的大小与细胞大小成正比，因此能进行细胞分类。2、光散射法：

全血标本首先需要按照一定比例稀释成细胞悬液，在鞘液的作用下，形成细胞流，细胞被排成单列快速通过光学检测区，当流动中的细胞和测定光束相交时，由于血细胞透光度与鞘液不同，引起光散射变化，引发一脉冲信号，信号的大小与细胞体积有关，以此来进行细胞计数及体积测定。3、组织化学法：

在稀释液及溶血素的配合作用下，使红细胞膜在极短的时间内完全溶解，使各种WBC维持颗粒状态，保持一定的体积。从而保证了WBC计数的可靠性。将释放的血红蛋白经化学处理后转化为较为稳定的血红蛋白衍生物，在540nm左右有最大吸收峰，可用比色法进行定量测定。自动化仪器的分析原理血红蛋白测定基本原理

不同类型的血细胞分析仪，血红蛋白测定原理是相同的。血液经溶血剂作用后，红细胞溶解，释放血红蛋白，与溶血剂结合形成血红蛋白衍生物，在特定波长（一般在530-550nm）下比色，吸光度的变化与液体中Hb含量成比例。不同系列血液分析仪配套溶血剂配方不同，形成的血红蛋白衍生物亦不同，吸光度各异但最大吸收峰均接近540nm。全血分析测定测参数（SysmexKX-21)WBCRBCPLTWBC分群RDWPDWMCVMPVHGBMCHMCHC红细胞参数脉冲计数脉冲高度、宽度比色法计算值用于诊断贫血的参数RBC、HCT、HGB用于贫血分类的参数MCV、MCH、MCHC、RDW白细胞参数WBC、WBC分群血小板参数PLT、MPV、PDW、白细胞参数WBC分群与传统形态学分类的关系及区别(三分类)小细胞群中间细胞群大细胞群淋巴细胞单核细胞大淋巴细胞嗜酸细胞嗜碱细胞幼稚细胞粒细胞红细胞参数分析

贫血是指单位容积的血液中HGB、RBC或HCT低于同年龄、同性别的最低值即为贫血。贫血的定义红细胞参数分析用于判断贫血参数：

RBC、HCT、HGB用于贫血分类参数：MCV、MCH、MCHC、RDWRDW—红细胞体积分布宽度：

是反应红细胞体积大小不等的指标，RDW愈大其红细胞大小差别愈大，在数值上用单个红细胞体积的变异系数表示。（SD或CV%）红细胞参数分析RDW的临床意义鉴别缺铁性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血：

分析两类贫血患者的RDW变化，其中53例缺铁性贫血RDW全部增高（异常率为100%），而44例轻型β-珠蛋白生成障碍性贫血中38例中RDW正常（正常率为88%）因此认为RDW可作为此两类贫血筛选及鉴别指标。诊断缺铁性贫血：

95%以上的缺铁性贫血的RDW均异常。用于缺铁性贫血的临床治疗效果观察：

铁剂治疗早期RDW增大，后趋于正常。进行贫血的新形态学分类（MCV/RDW分类）根据RDW所反应红细胞体积的异质性结合MCV分为六类贫血。红细胞参数分析MCVRDW贫血类型敏感性特异性缺铁性贫血96.5%98.1%巨幼红贫血100%100%溶血性贫血94.3%100%铁粒幼贫血94.7%95.4%再生障碍性贫血90.4%96.0%单纯小细胞贫血87.6%91.4%恶性贫血96.9%83.4%利用MCV、RDW鉴别贫血的敏感性及特异性血小板相关参数PLT（血小板数）MPV（血小板平均体积）PDW（血小板体积分布宽度）P-LCR（大血小板比率）血小板相关参数鉴别血小板减少的原因

血小板破坏增多引起血小板减少MPV增高；骨髓病变血小板生成减少MPV降低。提示骨髓功能恢复的预后价值

MPV增加是骨髓功能恢复的表现。判断止血能力的强弱

血小板减少时，MPV增加者其止血能力相对较强。MPV的临床意义血小板相关参数血小板三项参数分析NPLT(x+s)MPV(x+s)PDW(x+s)正常对照组100196.36+47.538.39+0.788.64+1.25骨髓增生异常综合症75131.36+76.329.23+1.219.26+1.72原发PLT减少性紫癜2454.88+21.3410.49+2.0612.94+2.77再生障碍性贫血增多症9962.36+52.779.35+0.919.44+1.76原发性PLT增多症18537.5+30.417.70+0.507.80+0.62慢性粒细胞白血病51266.53+129.39.19+1.4710.42+2.39慢性急变24122.00+53.029.05+1.029.93+1.82急性淋巴细胞白血病8184.55+47.898.67+1.008.63+1.69急性非淋巴细胞白血病6686.77+50.488.47+1.088.39+1.62血液细胞体积直方图

直方图是由测量通过感应区的每个细胞脉冲累积得到的，是在计数的同时进行分析测量的。

横坐标为体积，纵坐标是血细胞的相对数量，血细胞分析仪在进行细胞分析时将每个细胞的脉冲根据其体积大小分配并存在相应的体积通道中，每个通收集的数据被统计出相对数并表示在“Y”轴上。体积数据以飞升（fl）为单位，表示在X轴上白细胞体积直方图

经过溶血剂处理后的白细胞可以根据体积大小初步确认其相应的细胞群：第一群是小细胞群，主要是淋巴细胞。第二群是中间细胞群，包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞，核象左移或白血病可有各阶段幼稚细胞及白血病细胞。第三群是大细胞群，主要是中性粒细胞。仪器根据各亚群占总体的比例计算出各亚群的百分率，如果与该标本的白细胞总数相乘，即得到各类细胞的绝对值。白细胞直方图变化的临床意义

白细胞直方图的变化可反映某些人为的或一些干扰白细胞计数和分类计数的情况，比如外周血出现有核红细胞或巨大血小板，采血时由于技术原因造成血小板聚集或某些病理因素使红细胞膜对溶血剂有抵抗作用，使红细胞溶血不完全，以至测检标本中有大量红细胞膜碎片等情况，均可使白细胞直方图在50fl以下区域出现一个或大或小的小峰。因此当实验结果出现这种图形时，提示白细胞计数和分类计数均不准确，需在采取相应的手段进一步检测。红细胞体积直方图的临床意义

与白细胞直方图不同，某些贫血标本其红细胞体积直方图各有其特点，此种图形变化再结合其它参数进行分析，对鉴别诊断颇有价值。分析时，要注意观察图形的位置，峰底的宽度、峰顶的形态及有无双峰出现。（1）缺铁性贫血的直方图：其特点为曲线波峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。几种贫血时图形变化（2）轻型β-血红蛋白合成障碍的直方图：表现为小峰左移，峰底变窄，典型的小细胞均一性贫血。（1）缺铁性贫血的直方图：其特点为曲线波峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。红细胞体积直方图的临床意义几种贫血时图形变化（3）铁粒幼细胞性贫血的直方图显示红细胞呈典型的“双形”性改变（即同时存在着两类型的红细胞，一种是低色素红细胞，另一种是正常形态的红细胞）多见于铁粒幼细胞性贫血。在缺铁性贫血经治疗有效时，也可出现类似的图形，但峰底要更宽些。血小板体积直方图的临床意义

当检测标本中小细胞增多或出现细胞碎片或血小板凝聚时，都会影响实验结果，血小板体积直方图也均能反映出这些变化。因此在发出血小板报告之前，首先要观察其图形是否正常，如为异常的图形，应考虑有血小板凝聚，必要时作血涂片检查是否有小红细胞或大血小板增多现象。血小板体积直方图的临床意义常见血小析异常直方图测定后的分析根据直方图变化判断计数结果是否准确，是否需要显微镜检查。分析实验结果各参数之间的关系。分析实验结果与临床资料的相关性。机测血细胞分析的进展分析的多参数化测定原理的多功能合成操作流水线化五分类细胞分析仪1．容量、电导、光散射（VCS）联合检测2．阻抗与射频联合技术3．光散射与细胞化学联合技术4．多角度偏振光散射技术

联合型血液分析系统－血液工作站

在一个操作平台下，将血细胞分析仪、涂片机、染色机、网织红细胞仪串联在一起。血液先经血细胞分析仪检测，根据红细胞情况决定是否做网织红计数；根据HCT来改变推片机的角度