抗菌药物敏感性试验(药敏试验)

内容简介药物选择及报告K-B法操作方法报告方式影响因素稀释法Etest联合药敏试验2010年CLSI更新内容简介第一页，共118页。目的指导临床医生针对各类临床感染患者选择最佳抗菌药物一定区域内积累对公共卫生有关的重要耐药的微生物流行病学资料根据细菌对药物敏感谱进行菌种鉴定第二页，共118页。药敏试验原理把含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试细菌的琼脂平板上纸片中药物吸收琼脂水分溶解后通过弥散作用形成递减的浓度梯度纸片扩散法第三页，共118页。纸片周围一定距离范围内试验菌生长受抑制，从而形成无菌生长的透明圈即抑菌环。抑菌环大小反映测试菌对测定药物的敏感程度抑菌环大小除与细菌的敏感性有关外还与其它诸因素相关。第四页，共118页。定量测定抗菌药物活性抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合稀释后种入试验细菌，孵育过夜。以能抑制细菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度（MIC）将MIC与机体血清或体液中可获得药物浓度相比较来确定恰当的临床疗效稀释法

第五页，共118页。MIC的对数与抑菌环直径关系——近似线性负相关第六页，共118页。CLSI药物选择原则A组

常规和首选药物，其结果应常规报告B组

首选试验选择性报告。包含一些临床上重要的、特别针对医院感染的药物C组

替代性和补充性药物U组

补充性试验，仅用于治疗泌尿道感染的抗菌药物。第七页，共118页。表中小框内是一组类似药物，其结果解释和临床效力相似，不必个个试验。“或”字表示一群相关药物，其抗菌谱和解释结果几乎完全相同，交叉耐药性和交叉敏感性也完全相同，通常只选择一种药进行试验。药物选择第八页，共118页。

菌种代表药物苯唑西林葡萄球菌属所有β-内酰胺类包括酶抑制剂复合药和碳青霉烯类四环素除葡萄球菌和不动杆菌以外的所有菌属多西环素、米诺环素、金霉素、地美环素、土霉素、美他环素红霉素革兰阳性球菌罗红霉素、克拉霉素、阿齐霉素、地红霉素药敏试验中常用试验药及其代表的药物所有菌属试验药物林可霉素克林霉素第九页，共118页。青霉素G葡萄球菌属淋病奈瑟菌苯氧甲基青霉素、苯氧乙基青霉素、氨苄西林、阿莫西林、巴氨西林、氨环己西林、海他西林、羧苄西林、美洛西林、阿洛西林、替卡西林、哌拉西林头孢噻吩肠杆菌科

头孢匹林、头孢拉啶、头孢氨苄、头孢克罗、头孢羟氨苄氨苄西林所有菌属阿莫西林、巴氨西林、氨环己西林、海他西林第十页，共118页。磺胺异恶唑所有菌属所有磺胺类萘啶酸（敏感）肠杆菌科所有喹诺酮类敏感头孢噻吩/头孢唑啉（敏感）肠杆菌科所有头孢菌素敏感万古霉素革兰阳性杆菌替考拉宁氨苄西林肠球菌属青霉素第十一页，共118页。B组药物细菌对A组同类药物耐药，可选择性报告报告指征特定的标本来源多种细菌感染多部位感染对A组药过敏、耐受或无效以流行病学调查为目的向感染控制部门报告第十二页，共118页。C组药物某些医院潜在局部或广泛流行的耐药菌株对数种手选药物（特别是同类的如β-内酰胺类或氨基糖甙类）耐药治疗对基本药物过敏的患者治疗少见菌的感染流行病学调查为目的向感染控制部门报告第十三页，共118页。试验方法—纸片扩散法改良Kirby-Bauer法(K-B法)第十四页，共118页。培养基非苛氧菌用Mueller-Hinton（M-H）琼脂药物纸片直径6mm纸片，每片吸水量约20μl菌液比浊管0.5号麦氏（McFarland）标准比浊管，菌液浓度为1.5×108/ml质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923大肠埃希菌ATCC25922铜绿假单胞菌ATCC27853试验材料第十五页，共118页。操作方法第十六页，共118页。菌液制备挑取已纯化的4~5个菌落制备菌悬液

挑选琼脂平板上3~5个形态特征一致的菌落，用接种环接触每个菌落顶部转移至4~5mL适宜的液体培养基中（如胰酶消化大豆胨肉汤）生长法

第十七页，共118页。置35℃孵育2-6h用无菌生理盐水或肉汤校正，使其浊度至0.5号麦氏管第十八页，共118页。

从孵育16-24h的非选择性琼脂培养基上用接种环挑取单个新鲜菌落，悬浮于生理盐水或肉汤中震荡混匀与标准比浊管比浊，以有黑字的白纸为背景调整其浊度相当于0.5号麦氏管。直接调制菌悬液法生长法的简便替代法第十九页，共118页。第二十页，共118页。用无菌棉拭子蘸取菌液在管壁上方旋转挤压几次去掉过多水分用拭子涂布整个M-H培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60°最后沿平皿周边绕两圈以保证涂布均匀平板接种第二十一页，共118页。制备好的菌液必须在15min内使用贴纸片前可将培养皿盖半开3-5min以使表面过多水分被吸收但不超过15min第二十二页，共118页。将接种好的平板敞开盖子倒置在室温下干燥3-5min使平板上的水分被琼脂完全吸收。用镊子取纸片一张贴在琼脂平板表面，轻压使其与琼脂完全接触。纸片中心间距≥24mm,纸片中心距平皿边缘≥15mm。直径90mm的平板最好贴6张。加贴纸片第二十三页，共118页。15min内将平板倒置放温箱孵育。纸片一旦贴下就不可再挪动位置，因纸片中的药物已扩散到琼脂中。需要时应在适当的地方贴新纸片注意第二十四页，共118页。

必须用35℃孵箱（苛氧菌药敏平板应置于5%CO2环境）箱内平板最好单独摆放，不超过两个叠在一起，否则中间的平板因达不到孵箱温度而产生预扩散的作用。孵育第二十五页，共118页。平板孵育规定时间（一般为18-24h）后读取结果，葡萄球菌和肠球菌必须孵育24h以检测苯唑西林和万古霉素的耐药性。第二十六页，共118页。孵育16-18h后检查每一块平板如果划线满意，接种物准确无误，抑菌圈应为正圆形，菌落应融合生长出现明显单个菌落表示接种量太少重复试验第二十七页，共118页。可用直尺或游标卡尺，读取最接近的整毫米数测量时应将尺子置于倒置的平板上，置平板在黑色无反射光背景上方几厘米处并用反射光照明。含血的药敏琼脂应移去平板盖后用反射光照明平板，于表面上方测量抑菌环。抑菌环直径测量第二十八页，共118页。测量抑菌环直径时抑菌环边缘以见不到细菌明显生长为限，测量的是完全抑制的区域直径（包括纸片直径）按抑菌环直径判断细菌的敏感性，应依据CLSI的解释标准，报告细菌对测试药物敏感、中介、耐药。第二十九页，共118页。在清楚抑菌环内有独立的菌落生长提示接种的菌落不纯，需要重新分离、鉴定和药敏试验抗菌药物选择出的高频突变耐药株结果判断第三十页，共118页。变形杆菌属的菌株可扩散到某些抗菌药物的抑菌环内，故在明显抑菌环内有薄膜状爬行生长可以忽略。链球菌应检测其生长抑制圈而非溶血抑制圈。第三十一页，共118页。对于甲氧苄啶和磺胺，拮抗物使细菌轻微生长故抑菌圈直径应忽略细微生长的菌落。来自血琼脂菌落可能带有足够的甲氧苄啶或磺胺拮抗物，在SXT抑菌圈内细菌可沿敏感菌株周围产生模糊生长。第三十二页，共118页。检测苯唑西林和万古霉素对葡萄球菌和肠球菌的抑菌环需要用透射光（平板对着光源），抑菌环的边缘用放大镜才可发现小菌落可以忽略。在纸片周围的抑菌环内有任何可辨的菌落或生长薄膜（包括针尖样菌落）提示耐药。第三十三页，共118页。报告方式敏感

菌株能被使用推荐剂量在感染部位达到的抗菌药物浓度所抑制常规报告第三十四页，共118页。中介被测菌株对该药物的MIC接近于血液、组织中通常可达到的浓度而治疗反应率可能低于敏感株。意味着可通过提高剂量或在药物被生理浓集的部位发挥临床效力。第三十五页，共118页。被测菌不能被该抗菌药物的常用剂量在组织或血液内达到的浓度所抑制其MIC落在某些范围内提示该菌可能存在特定的耐药机制（如β-内酰胺酶）而且治疗研究表明其临床疗效不可靠。耐药第三十六页，共118页。当药物对菌株的MIC高于或抑菌圈直径低于敏感折点时报告为非敏感。非敏感并不意味着菌株携带某种耐药机制。由于耐药菌株缺失或稀少因而仅确立了敏感性解释标准。对于“不敏感”菌株，鉴定和药敏结果需再次确认。不敏感（NS）M100-S20定义第三十七页，共118页。解释性报告

某些菌种或菌群对抗菌药物的选择和报告有特殊要求大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs菌株应报告对所有青霉素类、头孢菌素类及氨曲南耐药。第三十八页，共118页。对沙门菌属和志贺菌属的分离株只有氨苄西林、一种喹诺酮类药物和磺胺异恶唑/甲氧苄啶可用于常规试验和报告第一、二代头孢菌素和氨基糖甙类药物体外可能有活性但临床无效故不应报告敏感第三十九页，共118页。沙门菌属的肠道外分离株应测试并报告氯霉素和一种三代头孢菌素的敏感性肠球菌对头孢菌素类、氨基糖甙类、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶和克林霉素在体外可能有活性但临床耐药，不能报告敏感。第四十页，共118页。MRS应报告耐受所有β-内酰胺类药物（包括其复合药）从威胁生命的感染（脑膜炎、菌血症、会厌炎和面部蜂窝组织炎）患者的血和脑脊液中分离的流感嗜血杆菌常规应报告氨苄西林、一种三代头孢菌素和氯霉素的药敏结果。第四十一页，共118页。“警告”

下列抗生素/微生物组合，在体外可出现活性但在临床上无效，不应报告敏感细菌不作为敏感报告的抗微生物药产ESBL肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌青霉素类、头孢菌素类和氨曲南沙门菌属、志贺菌属Ⅰ、Ⅱ代头孢菌素、头霉素和氨基糖苷类苯唑西林耐药葡萄球菌属所有青霉素类，头孢菌素类、β-内酰胺/β-内酰胺抑制剂、碳青霉烯类肠球菌属氨基糖苷类(除外高浓度)、头孢菌素类、克林霉素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑第四十二页，共118页。苛养菌药敏试验第四十三页，共118页。培养基为HTM（嗜血杆菌试验培养基）常规试验并不推荐用M-H巧克力琼脂过高的接种浓度对某些β-内酰胺类抗生素可造成假耐药的结果相当于0.5号麦氏管含菌1~4×108CFU/mL嗜血杆菌第四十四页，共118页。HTM氯化血红素母液氯化血红素50mg溶于100ml0.01mmol/L的NaOH，加热搅拌至完全溶解。NAD母液NAD50mg溶解于10ml蒸馏水，过滤除菌。第四十五页，共118页。HTM30ml氯化血红素母液加至1L含5g酵母粉的M-H琼脂中高压灭菌冷却后用无菌手续加入3ml的NAD母液第四十六页，共118页。淋病奈瑟菌培养基

GC琼脂+1%的特定生长添加剂不推荐用高营养的巧克力琼脂作药敏若10μg青霉素纸片抑菌圈≤19mm，表示产生β-内酰胺酶。β-内酰胺酶试验更为迅速，为确认质粒介导耐药性的好方法。第四十七页，共118页。培养基

含5%脱纤维羊血的M-H琼脂肺炎链球菌用苯唑西林测定对青霉素的敏感性，抑菌环直径≤19mm应测其MIC而不是直接报告对青霉素中介或耐药肺炎链球菌和其他链球菌第四十八页，共118页。肺链以外的链球菌不推荐用苯唑西林试验对于草链，青霉素（或苯唑西林）纸片扩散试验是不可靠的，无菌部位分离的草链应测其青霉素的MIC。第四十九页，共118页。适用于肠杆菌科细菌等快速生长的致病菌无论哪种接种方式，只要质控菌种的抑菌环在预期范围内，均可按同一解释标准报告药敏结果为WHO推荐药敏方法专性厌氧菌及酵母样菌等某些特殊菌种药敏试验不能用纸片法特点第五十页，共118页。技术简单，试剂量低，不需要特殊设备，可自由选择抗菌药物，可重复，易于由人判断，故必须标准化。纸片法药敏试验必须标准化第五十一页，共118页。影响因素第五十二页，共118页。M-H培养基批间重复性较好含有磺胺、甲氧苄啶和四环素的抑制物很少绝大多数非苛养菌生长良好已积累大量的数据和经验第五十三页，共118页。按商用脱水培养基说明制备高压灭菌后水浴冷却至45-50℃水平台面上倾注平皿，厚度均匀一致约4mm，150mm平皿倒60-70mL，100mm平皿倒25-30mL培养基配制第五十四页，共118页。冷却至室温，若当天不使用应贮存于2-8℃冰箱制备后7天内使用完毕每批平板均应进行抽样进行无菌试验，30-35℃孵育24h或更长时间。第五十五页，共118页。检查每批M-H琼脂的pH，胶化后室温下为过低、过高会使某些药物失去效力（如氨基糖甙类和大环内酯类）或活性可能增强（如青霉素类）。pH第五十六页，共118页。若使用前琼脂表面过分潮湿，应放35℃孵箱或在室温下敞开盖子倒置，直至多余水分蒸发。琼脂表面应保持湿润在接种后琼脂表面或平板的盖子表面不应有可见的潮湿水珠湿度第五十七页，共118页。过量胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶可逆转磺胺类和甲氧苄啶的抑菌效应而使抑菌环变小、模糊甚至消失而导致假耐药的报告，应使用胸腺嘧啶核苷含量尽可能低的M-H琼脂。评价新的M-H琼脂可用甲氧苄啶/SMZ纸片对粪肠球菌ATCC29212或粪肠球菌ATCC33186进行试验胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶影响第五十八页，共118页。不合格培养基没有抑菌圈抑菌圈内有菌生长抑菌环直径＜20mm合格培养基培养基上出现边缘清楚的抑菌环直径为20mm或更大第五十九页，共118页。主要指镁和钙影响氨基糖甙类、多粘菌素和四环素对假单胞菌的试验结果含量过高抑菌圈变小含量过低抑菌圈变大甚至不可接受锌离子主要影响细菌对碳青霉烯的敏感性二价阳离子含量的影响第六十页，共118页。培养条件非苛氧菌解释标准的基础是在空气中孵育。某些药物（氨基糖甙类、大环内酯类和四环素）受CO2影响抑菌环直径会有较大改变，非苛氧菌不能在CO2浓度较高的环境中孵育。苛氧菌应在CO2环境孵育中第六十一页，共118页。纸片的贮存装有纸片的容器应置于非无霜冰箱中，≤8℃冷藏或≤-14℃冷冻至使用前某些不稳定药物（如亚胺培南、头孢克洛、克拉维酸复合药等）也应冷冻保存直至使用当天，以尽量保持其稳定性。第六十二页，共118页。装有纸片的密封容器应于使用前1-2h移出冰箱，平衡至室温后才能打开以防热空气接触冷纸片时产生冷凝水。装有纸片的塑胶管从密封包装中取出后应置于密封的干燥容器中β-内酰胺类药物纸片应密封包装并冷冻，少量正在使用的纸片可冷藏至少一周第六十三页，共118页。使用纸片分配器应上紧盖子并配备足量干燥剂，分配器打开前应平衡至室温；指示剂变色时应更换干燥剂以防过于潮湿。装有纸片的分配器不用时应冷藏过期纸片不得使用，应废弃。第六十四页，共118页。接种物的浊度使用BaSO4浊度标准管或其光学等同物（如乳胶颗粒悬液）相当于0.5号麦氏标准管(配制方法见后）第六十五页，共118页。使用前将浊度标准管取出置于旋转混匀器上剧烈振动，目测其外观浊度应均匀一致出现大颗粒浊度管应更换每月应更换硫酸钡浊度管或核实其浊度第六十六页，共118页。0.048mol/L的BaCL20.5mL（1.175%w/vBaCl2·H2O）加入到99.5mL0.18mol/L的H2SO4（1%v/v），并不断搅动以维持混悬状态。0.5号麦氏标准管配制第六十七页，共118页。按每管4-6mL分装于带螺帽的试管，其口径应与稀释菌所用一致。密封并贮存于室温黑暗处可使用分光光度计核实浊度标准管的浊度，光径1cm，625nm吸光度值者即为0.5号麦氏标准管。第六十八页，共118页。注意事项对每种可能致病的细菌进行药敏试验时，使用的单个菌落应选自原始琼脂平板多种不同型细菌的混合物不能在同一药敏试验平皿上进行试验直接用临床标本药敏试验须经分纯菌种药敏试验复核第六十九页，共118页。接种物浓度避免过浓或过稀禁止用未稀释的过夜肉汤或其他非标准接种物进行平板划线必须应用标准化操作方法并测量抑菌环直径，绝对不允许只凭环的有无而不考虑环的大小判断结果。第七十页，共118页。试验方法—稀释法第七十一页，共118页。琼脂稀释法重复性好同时测定多种细菌可观察被检菌落生长情况、发现污染菌可应用机械化手段、提高效率第七十二页，共118页。微量肉汤稀释法一块板可以同时测定多种抗菌药物操作规范、简便、结果可信药物不一定适合实际工作需要第七十三页，共118页。试验方法—Etest第七十四页，共118页。是一种抗菌药物浓度梯度法直接测量MIC的药敏试验结合了稀释法和扩散法原理、特点并克服两者缺点结果准确、重复性好、操作简便第七十五页，共118页。原理E试条为5mm*50mm的长条，一面固定有预先制备的稀释度呈指数级连续增长的抗菌药物；另一面有读数和判别刻度。抗菌药物梯度可覆盖20个等倍稀释度试条贴在涂有细菌的琼脂平板上孵育后其周围可见椭圆形抑菌环，边缘与试条交点的刻度称为抑制浓度（IC）。第七十六页，共118页。方法培养基和菌种同纸片法贴试条确保已接种细菌的平板干燥用镊子将试条刻度面朝上放入使之与琼脂紧密接触药物最高浓度处应靠平板边缘轻压以驱赶其下方气泡孵育时间和环境要求参考说明书第七十七页，共118页。结果解释无抑菌环，IC≥最大浓度；抑菌环延伸至试条下方、与试条无交点，IC≤最小浓度应排除薄雾状和散在菌落，读取完全抑制处数值。IC与CLSI的MIC高度相关、直接对应。第七十八页，共118页。联合药敏试验第七十九页，共118页。为确定两种药物之间是否存在拮抗或协同作用，需用联合敏感试验进行测定，以便临床选择有效的抗生素方法纸片法平板纸条交错法梯度纸条试验法第八十页，共118页。纸片法与单片纸片扩散法相类似即将两种含药纸片贴于已接种被检菌株的平板上，相距2~3mm。置于35‘C培养18~24小时根据呈现的抑菌图形报告“协同”、“无关”或“拮抗"作用。第八十一页，共118页。协同作用第八十二页，共118页。相加作用第八十三页，共118页。拮抗作用第八十四页，共118页。无关作用第八十五页，共118页。CLSI2010更新内容简介第八十六页，共118页。表1A“建议分组”

肠杆菌科细菌

头孢噻吩CLSIM100-S20.2010GroupUCLSIM100-S19.2009GroupA第八十七页，共118页。为什么头孢噻吩被移动位置在美国，注射头孢噻吩已经无效口服头孢噻吩主要用于肠杆菌科细菌尿路感染的治疗；仅尿路感染分离株报告头孢噻吩结果。头孢噻吩敏感性测试可以代表其他口服头孢菌素类–头孢羟氨苄,头孢泊肟,头孢氨苄,氯碳头孢第八十八页，共118页。肠杆菌科

折点已修正(MICµg/ml)药物CLSIM100-S192009CLSIM100-S202010SIRSIR头孢唑啉<=816>=32<=12>=4头孢噻肟<=816-32>=64<=12>=4头孢唑肟<=816-32>=64<=12>=4头孢曲松<=816-32>=64<=12>=4头孢他啶<=816>=32<=48>=16氨曲南<=816>=32<=48>=16CLSIM100-S20.Table2A.第八十九页，共118页。肠杆菌科细菌

折点未修正，有待评估(MICµg/ml)

药物CLSIM100-S202010SIR头孢呋辛（非口服）<=816>=32头孢吡肟<=816>=32头孢替坦<=1632>=64头孢西丁<=816>=32CLSIM100-S20.Table2A.第九十页，共118页。肠杆菌科折点修正(纸片法mm)药物CLSIM100-S192009CLSIM100-S202010SIRSIR头孢唑啉>=1815-17<=14NANANA头孢噻肟>=2315-22<=14>=2623-25<=22头孢唑肟>=2015-19<=14>=2522-24<=21头孢曲松>=2114-20<=13>=2320-22<=19头孢他啶>=1815-17<=14>=2118-20<=17氨曲南>=2216-21<=15>=2118-20<=17第九十一页，共118页。为什么头孢唑啉没有纸片法折点？所研究地区范围内头孢唑啉MIC折点无可靠结果需要进一步深入研究纸片药物浓度有待修正第九十二页，共118页。为什么CLSI降低肠杆菌科细菌头孢菌素和氨曲南的折点？先前的折点是20多年前制定的加强了对以往的和新β-内酰胺酶耐药机制的认识，以及加上ESBLs的加入确定折点有了新方法药代动力学和药效动力学（PK/PD)第九十三页，共118页。

折点无需再评估在美国，大多药物都买不到或者没有批准使用对于E.coli，Klebsiellaspp.和Proteusmirabilis，检测他们中的任何一个，都必须继续完成ESBLs筛选和确证实验如果ESBLs阳性，要把cephalosporins、penicillins、aztreonam敏感的结果改为耐药头孢孟多头孢尼西头孢哌酮拉氧头孢第九十四页，共118页。肠杆菌科修正后的碳氢酶烯类折点

（MICug/ml）药物CLSIM100-S192009CLSIM100-S202010SIRSIR多利培南---<=12>=4厄他培南<=24>=8<=0.250.5>=1亚胺培南<=48>=16<=12>=4美罗培南<=48>=16<=12>=4第九十五页，共118页。ESBLs检测（1）最初的方法来源于：某些分离株在敏感范围内提高了MIC值得到关于病人的产ESBLs的分离菌株的数据结果有限对大肠埃希氏菌，克雷伯均属，奇异变形杆菌进行ESBLs的筛选和确证实验第九十六页，共118页。ESBLs检测（2）ESBLs表型检测不是最理想的在做确证实验时，多重耐药机制的出现会掩盖ESBLs

例如

-ESBLs+AmpC-ESBLs+porinmutationESBLs出现在除E.coli，Klebsiellaspp.，Proteusmirabilis之外的其他肠杆菌科细菌某些种时确证实验并不可行一些实验室不做检测相对于耐药机制的认识，MIC与统计输出结果关系更密切第九十七页，共118页。ESBLs检测（3）目的如果使用……旧的折点M100-S19修正过的折点M100-S20用于标本处理ESBL筛选和确证实验YesNo把头孢菌素类，青霉素类，氨曲南由“S”改为“R”YesNo用于感染控制ESBL筛选和确证实验Yes(如果要求做…..)Yes（如果要求做…..)把头孢菌素类，青霉素类，氨曲南由“S”改为“R”YesNo第九十八页，共118页。非肠杆菌科细菌第九十九页，共118页。不动杆菌属将黏菌素和多粘菌素B从实验报告C组中删除。

第一百页，共118页。删除铜绿假单胞菌

—关于青霉素类的解释对这类药物敏感的种类提示需要一个高浓度治疗铜绿假单胞菌引起的严重感染。针对这些感染，单一疗法往往造成临床治疗失败。应考虑加入体外实验对铜绿假单胞菌有抗菌活性的抗生素，例如喹诺酮类和氨基糖苷类第一百零一页，共118页。葡萄球菌属第一百零二页，共118页。万古霉素MICCLSIM100-S20(2010)万古霉素纸片扩散法无抑菌环(=6mm)可检测含VanA的金黄色葡萄球菌分离株万古霉素抑菌环>=7mm，必须检测其MIC值纸片扩散法测万古霉素不可靠检测到万古霉素MIC>=8ug/ml的任何金黄色葡萄球菌，应送往参考实验室第一百零三页，共118页。增加Linezolid耐药折点Linezolid不敏感的S.aureus罕见0.05%(7/15,280isolates)CLSIagendabookJune2009耐药机制已经确定

–rRNA突变、介导耐药（能被质粒编码）Mendesetal.2008.AntimicrobAgentsChemother.52:2244.第一百零四页，共118页。增加MRSA的定义MRSA就是金葡的某些菌株表达mecA基因或是其他耐甲氧西林机制，比如与青霉素结合蛋白亲和力的改变。第一百零五页，共118页。关于mecA阴性MRSA机制修饰青霉素结合蛋白位点(PBPs)1,2,4(MOD-SA)编码blaZ的青霉素酶过度表达Methicillinase？罕见文献里临床资料有限

re:有关β-内酰胺类药物的治疗

Croes,Setal.2009.ClinMicrobiolInfect.Epub.10/09Chambers,H.1997.ClinMicrobiolRev.10:781.第一百零六页，共118页。S.aureusorS.Lugdunensis

苯唑西林和头孢西丁的检测头孢西丁取代苯唑西林检测耐药报告苯唑西林敏感或耐药必须以头孢西丁为准如果头孢西丁和苯唑西林同时耐药或任一耐药，应报告苯唑西林耐药。第一百零七页，共118页。