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文档简介
实验高温对植物细胞膜的伤害第1页/共13页实验九高温胁迫对植物
细胞膜的伤害第2页/共13页1.实验目的■学习电导仪法测定膜相对透性的方法■理解逆境对植物膜透性的影响
第3页/共13页植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用,它的选择透性是其最重要的功能之一。当植物受到逆境影响时,如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜的透性增加,选择透性丧失,细胞内部分电解质外渗,将植物组织浸入去离子水中,水的电导将因电解质的外渗而加大,伤害愈重,外渗愈多,电导率愈大。膜结构破坏的程度与逆境的强度、持续的时间、作物品种的抗性等因素有关。因此,质膜透性的测定常可作为逆境伤害的一个生理指标,广泛应用在植物抗性生理研究中。本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率,来了解胁迫情况下植物受害的程度。2.实验原理第4页/共13页当质膜的选择透性被破坏时细胞内电解质外渗,其中包括盐类、有机酸等,这些物质进入环境介质中,如果环境介质是蒸馏水,那么这些物质的外渗会使蒸馏水的导电性增加,表现在电导率的增加上。植物受伤害愈严重,外渗的物质越多,介质导电性也就越强,测得的电导率就越高(不同抗性品种就会显示出抗性上的差异。)本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率,来了解胁迫情况下植物受害的程度。第5页/共13页伤害率本次实验测定高温对植物细胞膜的伤害电导率K=GQQ:电极常数(电导仪本身决定)G:实测电导值伤害率(%)=
处理电导率煮沸电导率×100%第6页/共13页3材料、仪器设备及试剂(一)材料:梧桐叶片;(二)仪器设备:
1.电导仪;2.打孔器;3.真空干燥器;
4.恒温水浴锅;第7页/共13页4实验步骤1)打取叶圆片:自选叶片,洗净吸干,避开叶脉打取30个叶圆片,放入1支试管,再打取30个叶圆片,放入另1支试管,依此类推,每支试管皆放入30个叶圆片;2)试管分别编号为:1A,1B,2A,2B……5A,5B,每管加入15ml纯水,抽真空20min;3)水浴处理:5组(1A1B,2A2B……5A5B)分别在60℃水浴0,10,20,30,40min,取出后用自来水冷却10分钟;高温处理时间(min)CK(0)10203040重复11A2A3A4A5A重复21B2B3B4B5B第8页/共13页4)测量电导率:用电导仪测定浸泡溶液的电导率(分组单独领取电导仪,详细使用方法分组指导);5)煮沸电导率:测过电导率的10支试管再放入100℃沸水浴中15min,以杀死植物细胞,使细胞内物质全部渗漏出来,取出试管后用自来水冷却10min,测其煮沸电导率。第9页/共13页电导仪的使用方法电源开关“开”,预热;打开(测量/校正)拨至“测量”;(补偿/一般)拨至“一般”;(×1/×10-2)拨至“×1”;量程范围选“×103”,使待测值介于0.1~0.999之间。每次往待测液中插入电极时,都要首先用纯水冲洗电极,并用吸水纸轻轻拭干。第10页/共13页处理电导率CtAB煮沸电导率C100AB伤害率(Ct/C100)×100AB伤害率平均值CK(0)
10min20min30min40min
5数据记录与处理表1高温对叶片伤害率的影响第11页/共13页6实验结果及分析计算电导率时,取2支试管的平均值计算伤害
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