实验诊断学骨髓细胞学检测

实验诊断学骨髓细胞学检测第1页/共58页骨髓细胞学检测第2页/共58页上课内容（P266-279）骨髓细胞学检测的临床应用骨髓细胞学检测血细胞的生成、发育规律及形态特点血细胞化学染色细胞免疫分型细胞遗传学分析第3页/共58页一、骨髓细胞学检测的临床应用

临床作用适应症禁忌症第4页/共58页1、骨检的临床作用

疾病诊断肯定性诊断符合性诊断怀疑性诊断排除性诊断形态学描述稀释骨髓象观察疗效缓解改善退步复发第5页/共58页2、骨检的适应证不明原因外周血细胞计数或和分类异常不明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大黄疸、骨痛、骨质破坏、蛋白尿、肾功能异常、血沉明显增加等第6页/共58页2、骨检的适应证血液病的定期复查和疗效观察了解骨髓造血功能其它检查：骨髓活检细胞免疫学分型染色体核型检查分析病原学检查造血祖细胞培养

第7页/共58页3、骨检的禁忌证

严重出血的疾病禁用晚期妊娠的孕妇慎用

第8页/共58页骨髓片的选择低倍镜检查油镜检查骨髓象的分析与报告二、骨髓细胞学检测的方法和内容第9页/共58页1）涂片（肉眼观察）1、骨髓片的选择厚薄均匀头体尾分明两边留有空隙尾呈锯齿状头部要留有约2cm的空间第10页/共58页第11页/共58页第12页/共58页第13页/共58页2）取材抽吸骨髓液时有特殊的疼痛感抽出的骨髓液中有黄色小粒（骨髓小粒）显微镜下有骨髓特有的细胞：幼红、幼粒、巨核细胞、浆细胞等骨髓杆/分叶、有核细胞数大于外周血1、骨髓片的选择第14页/共58页3）染色细胞核、质颜色分明，颗粒清楚，没有染料沉渣1、骨髓片的选择第15页/共58页1）确定取材、涂片和染色是否满意2）估计骨髓有核细胞增生程度3）巨核细胞计数4）观察有无异常细胞2、低倍镜下检查第16页/共58页骨髓有核细胞增生程度增生程度成熟红细胞：有核细胞有核细胞均数/高倍镜视野常见病例增生极度活跃1：1>100各类型白血病增生明显活跃10：150～100各类型白血病、增生性贫血、ITP增生活跃20：120～50正常骨髓象、增生性贫血增生减低50：15～10再障、粒缺或粒细胞减少症增生极度减低200：1<5再障第17页/共58页增生极度活跃第18页/共58页增生明显活跃第19页/共58页增生活跃第20页/共58页增生减低第21页/共58页增生极度减低第22页/共58页有核细胞分类计数：200～500个细胞，按细胞的不同系列和不同发育阶段分别计数，计算各阶段细胞所占百分比。观察细胞形态：分类计数同时观察细胞形态是否正常，有无异常细胞、寄生虫等。3、油镜检查第23页/共58页1）病人的基本信息2）骨髓的取材、涂片、染色情况3）骨髓增生程度、粒红比值和骨髓各期细胞结果4）骨髓象特征的描述5）血象特征6）细胞化学染色特征4、骨髓象的分析和报告第24页/共58页第25页/共58页

血细胞的生成血细胞的发育规律各系血细胞的形态特点

三、血细胞的生成、发育规律

及形态特点第26页/共58页

造血干细胞祖细胞原始细胞幼稚细胞成熟细胞

1.血细胞的生成

早幼C中幼C晚幼C骨髓：是人体最大器官之一，主要生理是进行造血活动，骨髓细胞主要是发育过程中的血细胞。第27页/共58页血细胞生长发育图

第28页/共58页胞体大小大小胞核大小大小核仁有无染色质细致粗核膜不明显明显核形圆形椭圆形肾形杆状分叶2.血细胞的发育规律

第29页/共58页胞浆量少多嗜碱性强弱、消失颗粒无有

(非特异性特异性)核浆比例

大小

2.血细胞的发育规律

第30页/共58页第31页/共58页粒细胞系列

原粒早幼粒中幼粒晚幼粒杆状核粒分叶核粒第32页/共58页原始细胞形态学共同特点胞浆嗜碱性胞浆常无颗粒核染色质细致核仁有、清楚高核浆比第33页/共58页

红细胞系列粒细胞系列淋巴细胞系列浆细胞系列单核细胞系列巨核细胞系列3.血细胞的正常形态学特征第34页/共58页正常细胞形态观察内容：1.大小、形态。3.核：位置、大小、形态、染色质。2.胞浆：量、着色、包含物。4.核仁：大小、多少、清晰度。第35页/共58页正常细胞形态观察内容：1.大小、形态。3.核：位置、大小、形态、染色质。2.胞浆：量、着色、包含物。4.核仁：大小、多少、清晰度。第36页/共58页红细胞系列

胞体、胞核圆形胞浆有明显的变化规律胞浆中无颗粒第37页/共58页粒细胞系列

胞体圆形颗粒和胞核有明显的变化规律第38页/共58页淋巴细胞系列

胞体、胞核小胞浆量少第39页/共58页

浆细胞系列

胞核圆形、偏位胞浆丰富、深兰色、核旁淡染区、泡沫浆第40页/共58页单核细胞系列胞体、胞核较大且不规则胞浆较丰富、灰兰色胞核染色质疏松第41页/共58页巨核细胞系列胞体、胞核巨大且不规则胞浆量、颗粒极丰富第42页/共58页

是一种以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理，对血细胞内的各种化学物质，作定性、定位、半定量分析的方法四、血细胞化学染色血细胞化学染色的定义

第43页/共58页

辅助疾病的诊断和细胞系列的判断不同细胞系列，其所含的化学物质各有不同血细胞在病理情况下，其化学物质成分及含量会发生改变血细胞化学染色的作用

四、血细胞化学染色第44页/共58页过氧化物酶染色（POX）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）酯酶染色铁染色四、血细胞化学染色血细胞化学染色的方法

第45页/共58页

粒细胞及部分的单核细胞质内的颗粒含有过氧化酶，此染色用于急性白血病类型的鉴别诊断(急粒和急淋)急粒——强阳性急单——阴性、弱阳性急淋——阴性1.过氧化物酶（POX）染色第46页/共58页

第47页/共58页

NAP主要存在于成熟阶段的中性粒细胞报告形式为阳性率及积分增加：细菌性感染、类白血病反应、再障、急淋、淋巴瘤减少：慢粒、阵发性睡眠性血红蛋白尿、急粒、恶组2.中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色第48页/共58页

第49页/共58页

辅助鉴别急性白血病细胞类型（急粒和急单）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DNCE）:特异性酯酶（SE）急粒呈阳性（M3—强阳性）α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）：非特异性酯酶(NSE)急单呈阳性或强阳性，加NaF抑制急粒呈阴性或弱阳性，加NaF不抑制急淋呈阴性3.酯酶染色第50页/共58页第51页/共58页M5

第52页/共58页

骨髓铁分为细胞外铁、内铁减少：缺铁性贫血增加：铁粒幼红细胞性贫血

4.铁染色

第53页/共58页骨髓外铁染色第54页/共58页骨髓内铁染色第55页/共58页急性白血病常见细胞化学染色

急淋急粒急单POX-+++-~+NAP↑↑↓↓↔~↓SE-++~+++-~+NSE-