临床PCR实验室的设计及管理体系的建立

临床PCR实验室的设计及质量管理体系的建立卫生部临床检验中心李金明Tel前1页，总共66页。临床标本的接收通常的工作流程：标本采集血清分离编号保存或检测应在四个测定区域之外的地方或区域内接收接收的标本应收集在原始容器中在核酸提取时带入至标本制备区当前2页，总共66页。理想的PCR实验室设计A产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区当前3页，总共66页。产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区理想的PCR实验室设计B当前4页，总共66页。PCR实验室设计的一般原则各区独立注意风向因地制宜方便工作“十六字口诀”当前5页，总共66页。门试剂准备区标本制备区扩增区产物分析区外走廊门门门门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区外走廊门门门门AB当前6页，总共66页。试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门门空气流向空气流向空气流向当前7页，总共66页。走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向空气流向其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室当前8页，总共66页。门试剂准备区标本制备区扩增及产物分析区门门门空气流向空气流向+空气流向++走廊走廊试剂准备区标本制备区扩增和产物分析区空气流向空气流向+空气流向++其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室其他实验室空气流向当前9页，总共66页。产物分析区空气流向空气流向空气流向空气流向缓冲间缓冲间缓冲间专用走廊工作流向扩增区标本制备区试剂准备区传递窗传递窗传递窗当前10页，总共66页。“无基因”或“无核酸”概念的重要性！！！当前11页，总共66页。实验室质量管理体系的建立质量手册质量体系程序文件标准操作程序

(相关记录表格)当前12页，总共66页。质量管理的内涵写你所做的做你所写的记录你已做的分析你已做的当前13页，总共66页。看得见的看不见的当前14页，总共66页。当前15页，总共66页。当前16页，总共66页。当前17页，总共66页。当前18页，总共66页。当前19页，总共66页。当前20页，总共66页。当前21页，总共66页。当前22页，总共66页。当前23页，总共66页。好习惯是生产力罗马不是一天建成的(Romewasnotbuiltinaday)任何事情只要能够坚持不断去加强它，它终究会变成一种习惯。当前24页，总共66页。质量体系文件的三大特性法规性、唯一性和适用性。法规性:是指文件一旦制定完成并批准实施，就必须认真执行，按照相应的文件去完成日常检验工作，也就是前面所说的做你所写的。并且文件的修改不能随意，只能按规定的程序进行。唯一性:则是指（1）一个实验室只能有一个质量体系文件系统；（2）一项检验活动只能有唯一的操作程序；（3）一项规定只能有唯一的理解，不产生歧义；（4）只能使用文件的有效版本，无效版本在实验室的任何地方都不能使用。适用性:是指质量体系文件无统一格式；无标准文本；怎么做怎么写，切合实际，具有可操作性，不拘一格。所有文件的规定均应保证在临床实际检测工作中能完全做到。当发现文件有不适合情况时，则应立即按规定程序对文件进行修改。当前25页，总共66页。怎样编写SOP？XXX单位XXX实验室XXX标准操作程序编号：启用日期：版本：第页共页一目的：适用范围：职责或责任人：（方法原理）（检测设备和试剂）（所需的环境条件）操作步骤：

1．

2．

3．

五、本操作程序变动程序：六、相关的文件七、相关的记录表格和报告编写人审核人批准人当前26页，总共66页。SOP（5W和1H）谁来做(Who)：

责任人做什么(What)：适用范围何时（When）：适用范围何地（Where）：适用范围为什么做（Why）：目的如何做（How）：操作步骤当前27页，总共66页。SOP等于试剂盒说明书吗？当前28页，总共66页。当前29页，总共66页。当前30页，总共66页。当前31页，总共66页。当前32页，总共66页。当前33页，总共66页。当前34页，总共66页。当前35页，总共66页。当前36页，总共66页。当前37页，总共66页。当前38页，总共66页。当前39页，总共66页。当前40页，总共66页。当前41页，总共66页。当前42页，总共66页。当前43页，总共66页。当前44页，总共66页。当前45页，总共66页。当前46页，总共66页。当前47页，总共66页。当前48页，总共66页。实验室清洁SOP要点

目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备在使用后，处于洁净和无感染性状态，以防止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用寿命；防止因实验室台面、地面和仪器设备的生物传染危险性造成实验室人员感染，以及防止实验室交叉污染而出现假阳性结果等。适用范围应包括实验室地面、台面和仪器设备等的清洁。按实验室台面、地面和仪器设备分开来写各自的具体清洁方法，要具体而又有可操作性应规定工作人员在清洁时，必须按试剂准备区标本制备区扩增(及产物分析)区方向进行，不得逆行规定每一工作区域的清洁必须使用专用的清洁用具，不得混用规定有潜在生物传染危险性材料溅出时的消毒清洁方法当前49页，总共66页。

实验台面的清洁当前50页，总共66页。当前51页，总共66页。当前52页，总共66页。

实验记录表格的设计当前53页，总共66页。存在问题表格种类繁多重复记录表格无实用性，用于检查的痕迹很重当前54页，总共66页。当前55页，总共66页。当前56页，总共66页。当前57页，总共66页。记录表格设计的基本原则信息充分简单明了临床标本的检测信息能有机联系起来融入LIS系统？当前58页，总共66页。

临床PCR检验流程记录表

检验日期

检验项目：

扩增仪中保存文件名：

使用说明：1．本记录表须严格遵循试剂准备区标本制备区扩增区（产物分析区）单一流向移动，严禁逆向移动。2．各项工作执行后，在相应叙述前的“”内打“”。3．本记录表最后与相应的标本接收记录等归档保存于扩增区的专用文件柜内，以备查找。实验前准备试剂在有效期内扩增仪、加样器和温度计在校准的有效期内生物安全柜的滤膜在使用有效期内消毒溶液在有效期内冲眼器内无菌生理盐水在有效期内离心管、带滤心吸头已经过质检合

操作者：

当前59页，总共66页。

试剂准备区（1区）实验前：

打开通风设备实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）冰箱温度：冷藏室（2~8℃）

℃；冷冻室（18℃2℃）

℃实验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）PCR试剂来源：（可直接列出有关厂家名称）批号：

检验项目：

本次实验用量：

人份，剩余量：

人份。其他有关试剂配制：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制1%含氯消毒液

毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制4％NaOH溶液

毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯

毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制

毫升；其他：仪器设备使用：离心机：正常不正常振荡器：正常不正常实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面、加样器和离心机，并进行紫外照射30分钟以上。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。

操作者：

当前60页，总共66页。

标本制备区（2区）实验前：打开通风设备实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）冰箱（柜）温度：冷藏室（2~8℃）

℃；冷冻室（18℃2℃）

℃实验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）阳性室内质控物来源：

浓度及批号：

扩增位置：

阴性室内质控物来源：

批号：

扩增位置：

所取理的标本（对应标本接收的唯一编号）及拟扩增位置：1

9

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2

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核酸提取及加样过程：按XXX（列出编号）SOP进行。仪器设备使用：生物安全柜：正常不正常恒温仪温度校准：

℃离心机：正常不正常振荡器：正常不正常实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。

操作者：

当前61页，总共66页。

扩增及产物分析区（3区）实验前打开通风设备实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）实验室温度：

℃（允许范围：10~30℃）；相对湿度：

（允许范围：30%~70%）扩增仪操作：开机自检及运行正常按XXX（列出编号）SOP进行编程、参数设定标准曲线计算值：Slope值：（）Intercept值：（）r值：（）室内质控结果：结果：

□填写室内质控记录、描质控图是否失控：□否□是实验结果：见所附扩增仪打印结果实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。