土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第1页/共29页知识·储备区第6课时人为改变自变量可变影响碱碳源、氮源、水、无机盐、生长因子本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第2页/共29页知识·储备区第6课时本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第3页/共29页第6课时学习·探究区目的菌株pH抑制阻止DNA聚合酶Taq

热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物特定抑制阻止本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第4页/共29页第6课时学习·探究区KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL葡萄糖尿素凝固剂脲酶

只有能够以分泌脲酶从而以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第5页/共29页第6课时学习·探究区稀释涂布平板法一个活菌菌落数30～300(平均菌落数÷涂布的稀释液体积)×稀释倍数本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第6页/共29页第6课时学习·探究区稀释度二第一位同学需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数显微镜直接计数本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第7页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第8页/共29页第6课时学习·探究区非测试可信度被测试相同对照实验本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第9页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第10页/共29页第6课时学习·探究区C本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第11页/共29页第6课时学习·探究区D本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第12页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第13页/共29页第6课时学习·探究区步骤实验操作操作提示土壤取样从酸碱度接近

的

.土壤中取样。先铲去表层土

.左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中取样用的小铁铲和盛土样的信封都要经过灭菌制备培养基分别配制牛肉膏蛋白胨培养基和

为唯一氮源的

培养基牛肉膏蛋白胨培养基可以作为

,用来判断选择培养基是否起到了

.样品的稀释和涂布①称取

g土样加到盛有

mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀；②吸取上清液

mL，转移至盛有

mL的生理盐水的无菌大试管中,按照上图流程进行样品的稀释;③按照由107～103稀释度的顺序分别吸取

mL进行

操作。按照浓度从

到

的顺序涂布平板，不必更换移液管①应在

旁称取土样;②由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围

;③实验时要对所用的平板、试管作好

。如培养皿要注明培养基类型、培养时间、

、培养物等中性潮湿3cm尿素选择对照选择作用1090190.1平板涂布火焰103～107

标记稀释度低高本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第14页/共29页第6课时学习·探究区培养将涂布好的培养皿放在

℃温度下培养。随着培养时间的延长,会有不同的菌落产生。比较牛肉膏蛋白胨培养基和选择培基中菌落的数量、形态等,并做好记录在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显

.选择培养基上的数目,才说明选择培养基有选择作用计数当菌落数目

时,选取菌落数在

的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对

个平板进行重复计数,然后求出

,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目①如果得到了

.菌落数目符合要求的平板,则说明稀释操作比较成功;②如果学生选取的是同一种土样,结果相差太远,教师需要引导学生一起分析产生差异的原因30～37多于稳定30～3003平均值2个或2个以上本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第15页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第16页/共29页第6课时学习·探究区酚红脲氨红本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第17页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第18页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第19页/共29页第6课时学习·探究区本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第20页/共29页第6课时学习·探究区D本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第21页/共29页第6课时学习·探究区目的菌株稀释涂布平板法显微镜直接计数法本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第22页/共29页第6课时自我·检测区A本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第23页/共29页第6课时自我·检测区A本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第24页/共29页第6课时自我·检测区C本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我·检测区第25页/共29页第6课时自我·检测区B本课时栏目开关知识·储备区学习·探究区自我