细胞房使用细则

细胞房使用细则1.穿着专用实验服。将自己的白大衣或厚外套脱下，挂在门外的衣帽架上，进入缓冲间，穿上专用的细胞服。2.穿着无菌鞋套。尽量避免在缓冲间走动、停留。3.穿戴无菌口罩、帽子和手套。细胞房最多可3个人同时使用。避免在内长时间逗留、交谈。4.物品通过缓冲间进出细胞房。物品表面经酒精喷洒后，于缓冲间内紫外消毒30min。试剂等不可照射紫外的物品于缓冲间内经酒精喷洒表面后带入细胞房。手机等个人物品需套上EP袋，于缓冲间内经酒精喷洒表面后带入细胞房。1.注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。2.培养瓶皿放入培养箱前，若用酒精消毒表面，需等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。3.每人一层培养箱，按预定位置摆放培养器皿，方便查找，以免长时间敞开培养箱。4.培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。5.值班人员定期检查培养箱水盘水位，及时加水。6.如遇培养箱报警，及时告知实验室负责人。7.更换CO2气瓶后，将空的气瓶搬至实验室门外走廊处，并在气瓶使用登记表上记录。8.培养过程中出现污染时，立刻取出污染的培养瓶，弃至细胞房外。及时告知其他实验人员，若污染扩散，需取出所有培养瓶，对培养箱及细胞室进行消毒。1.显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。2.单次使用完毕后，将显微镜灯源调至最暗，物镜调至最低。3.离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。4.尽量避免频繁开关显微镜电源。1.使用超净台前、后用酒精棉球擦拭工作区，所有物品在放入超净台前均应酒精消毒。2.1/3-2/3。注：消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精，向喷壶或灯内添加酒精时请留意。值日人员定期补给酒精和酒精棉球。3.并冲洗晾干备用。注：若垃圾桶已满，自行更换垃圾袋并将垃圾存放至905实验室垃圾桶旁，不可让清洁员进入细胞房进行清理。4.本实验室超净台在使用后进行紫外消毒30min，以便下一位实验人员直接使用。5.超净台配备废液吸引器一台，值日人员及时清理废液缸内废液，并重新加入200ml消毒液。6.超净台内配备移液枪1套，移液器2把，酒精灯1个，漩涡器1台，不可取出。实验结束后将物品摆放整齐，所有试剂耗材均不可储放于超净台内。1.细胞房水浴锅温度设定为37℃，不可更改。2.由值日人员周定期换水，其余时间由实验人员自行更换。3.使用完后及时关闭电源，以免烧干。4.从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。5.6.培养液公用，但不可共用，以免交叉污染。公用培养液储存于公用位置，用完一瓶或整瓶取用时需在引索表上做好登记，当余量不足供下周使用时在备注上标明需订购的量，以便管理员及时采购。7.血清由值日人员分装，分装时每管贴上标签纸，标明血清品牌、等级、到期时间、分装日期，分装后在库存引索表上等记并入库储存。8.分装好的血清长时间保存于-20℃，使用前放于4℃预解冻。从-20℃取用血清者需登记，并在血清管9.原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用，若有剩余，则暂存于4℃并尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清，以免交叉污染。10.生长因子、包被物、活性蛋白等用量小且不可反复冻融的试剂，收到后由使用者或管理员按说明和需要配制分装，集中于EP袋中并标明：配制人、配制时间、试剂名称、浓度、工作浓度等信息。做好入库登记并入库储存，取用需登记。1.每周值日生值日时间从周一开始，至周五结束。周末进行实验者在实验结束后需自行更换垃圾袋。2.值日周开始时需做的事情：1)在周六、日或之前准备好灭菌的枪头、离心管，供未来一周的使用。注：新离心管灭菌前，先用去离子水过2-3次，再用双蒸水冲1次，烘干后用牛皮纸包好、灭菌。2)配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%乙醇供酒精灯使用。注：75%的酒精可用750ml95%的酒精加去离子水至950ml配制而成。3)垃圾铲和拖把。打扫完后紫外消毒细胞房1h。4)5)每周三下班前将细胞房专用的实验服交由阿姨清洗，将上周清洗完送回的实验服放回细胞房。6)给培养箱换灭菌水，必须是MilliQ水，保证水质清洁。应经常检查，以便及时发现异常情况。3.值日周内每天需做的事情：1)更换垃圾袋；2)清理废液吸引器缸内废液，清洗后加入200ml消毒液，安装回原处。3)检查培养箱内水量是否足够；4)检查灭菌物品的储备情况，包括：灭菌枪头、离心管、血清移液管、无菌塑料吸管、培养皿、培养瓶，若储备不足，及时补充并做好登记。注：补充无菌耗材时，不可将纸箱带入，用酒精喷洒所有耗材表面，于缓冲间内紫外消毒30min后带入细胞房。5)检查培养液母液、血清、酒精等公用试剂的储备情况，当余量不足时，及时告知管理员进行采购。6)填写《值日登记表》1.惩罚对象：做完实验不清理生物安全柜内个人废弃物者，将个人试剂、耗材堆放于生物安全柜内者，随意乱扔包装袋、酒精棉球等垃圾者，领用物资不作登记者，最后离开实验室不做好检查工。2.惩罚方法：若发现以上对象即发出紧告，累计收到三次警告者罚值日一周。3.值