临床免疫学检验技术第23自身免疫性疾病及其免疫检测

第二十三章自身免疫性疾病及其免疫检测1第一节常见自身免疫疾病简介第二节常见自身抗体检验项目及临床意义第三节自身抗体检测的常用方法及检测流程第四节自身免疫性疾病相关的其他检验项目及其临床意义2第一节常见自身免疫性疾病简介3一、自身免疫性疾病分类结缔组织疾病神经肌肉疾病内分泌性疾病消化系统疾病泌尿系统疾病血液系统疾生殖系统疾病皮肤组织疾病循环系统疾病按疾病累及的系统区分：

4非器官特异性自身免疫病(organ-specificautoimmunedisease)器官特异性自身免疫病

(organ-specificautoimmunedisease)按器官特异性分为两类：5二、常见自身免疫病

器官特异性

非器官特异性桥本甲状腺炎扩张性心肌炎自身免疫性溶血性贫血系统性红斑狼疮原发性粘液水肿恶性贫血特发性血小板减少性紫癜干燥综合征甲状腺机能亢进自身免疫性胃炎特发性粒细胞减少症类风湿关节炎Addisino病自身免疫性肝炎绝经过早（少数病例）硬皮病1型糖尿病原发性胆汁性肝硬化男性不育（少数病例）多发性肌炎/皮肌炎重症肌无力原发性硬化性胆管炎交感性眼炎混合性结缔组织病多发性硬化症溃疡性结肠炎晶状体源性葡萄膜炎系统性血管炎脱髓鞘疾病克罗恩病抗磷脂综合征寻常型天疱疮自身免疫性肾小球肾炎肺肾出血综合征6第四节

自身抗体检测与自身免疫性疾病的诊断7标志抗体相关疾病dsDNASLESmSLESSBSS着丝点抗体PSS（局限型）Scl-70抗体PSS（弥漫型）AKA、抗CCP抗体RAJo-1抗体PM/DM高滴度RNP抗体MCTD肝肾微粒体抗体（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝炎平滑肌抗体（SMA）Ⅰ型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常见自身免疫性疾病的标志抗体8

抗核抗体（ANA）抗可提取性核抗原抗体（ENA）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）类风湿因子（RF）抗角蛋白抗体（AKA）抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）抗心磷脂抗体（ACLA）常检测的自身抗体9抗核抗体（antinuclearantibody，ＡＮＡ）:是一组将自身各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体总称。一、抗核抗体的检测及其临床意义10抗核抗体谱11抗核抗体的分类１、抗DNA抗体２、抗组蛋白抗体３、抗非组蛋白抗体４、抗核仁抗体12以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗Sm抗体等；以相关疾病命名，如抗Scl-70等；以抗原的部位命名，如抗核仁抗体以抗原的化学名称分类命名，如抗DNA抗核抗体的命名13间接免疫荧光法（indirectimmunofluorescence,IIF）酶免疫斑点法ELISA免疫印迹法

（Western-blot）

（一）抗核抗体检测方法14HEp-2细胞或肝组织荧光标记抗体病人血清（待检抗体）间接免疫荧光法示意图15自身免疫性疾病ANA阳性率（%）SLE95MCTD95~100RA20~30PSS85~95PM/DM30SS60~70溃疡性结肠炎26自身免疫性肝病10~15其它风湿病20~50（二）临床意义

16

95%-99%可排除SLE（－）SLE治疗缓解病情特重（大量IC沉积消耗抗体）（＋）低滴度常见于RA等其它自身免疫性疾病高滴度可作为诊断SLE的依据ANA初筛17

细胞核细胞浆细胞骨架细胞周期

均质型核糖体型肌蛋白型中心体型

斑点型线粒体型波形纤维蛋白型纺缍体型核仁型高尔基体型细胞角蛋白型纺缍丝型着丝点型溶酶体型原肌球蛋白型中间体型

周边型颗粒型纽带蛋白型PCNA型核点型(dots)IIF检测ANA荧光染色模型（二）常见的ＡＮＡ荧光图形及临床意义18均质型

抗dsDNA抗体抗组蛋白抗体(histone)抗ssDNA抗体抗核小体抗体(nucleosome)19斑点型（nRNP/Sm）

高滴度的抗U1-nRNP为MCTD的特征。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性。斑点型（SSA/SSB）抗SSA最常出现于SS及新生儿红斑狼疮（100%）。抗SSB抗体几乎仅见于女性,可出现于SS和SLE。20周边型

可见于胶原病、PBC、CAH等患者

21抗原纤维蛋白型

仅见于5%-10%的PSS，男性高于女性抗RNA多聚酶Ⅰ型抗体

仅见于硬皮病患者，阳性率为4%核仁型22抗PM-Scl（PM-1）抗体

见于重叠综合征（多发性肌炎PM/皮肌炎DM/弥漫性PSS）

核仁型

23抗Scl-70型

PSS弥漫型的标志抗体核仁型

24核点型（DOTS）

见于SLE、SS、PBC、风湿病25抗dsDNA抗体与细胞核DNA（外围区）脱氧核糖磷酸框架结合。

抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗体。其抗体滴度与疾病的活动程度有相关性。二、抗双链DNA抗体的检测及其临床意义26检测方法：间接免疫荧光检测，是目前国内外临床常规检测抗dsDNA抗体最常用的方法。临床意义：抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%-100%，但其敏感性仅为30%-50%，因此抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。27

抗dsDNA抗体SLE特异性抗体，与病情活动度相关。28三、抗核小体抗体的检测及其临床意义（Antinucleosomeantibody,AnuA）29检测方法：AnuA的检测通常采用ELISA检测法。临床意义：

1.AnuA具有同抗ds-DNA抗体相同的诊断特异性，可达到95%，在系统性硬化（SSc）病中可有20%-50%低浓度阳性率，其他自身免疫性疾病中该抗体均为阴性。

2.AnuA的表达与SLE病情活动分数相关。检测方法及临床意义30

抗ENA抗体谱:可提取核抗原抗体的总称临床常检测的抗ENA抗体谱主要包括：抗Sm抗RNP

抗SSA抗SSB

抗Jo-1抗Scl-70四、抗可提取核抗原抗体谱的检测及其临床意义31抗可提取性核抗原（ENA）抗体32

双向免疫扩散（ID）对流免疫电泳（CIE）

免疫印迹法（Western-blot）

酶免疫斑点法

ENA检测方法33

SDS电泳转移电泳酶免疫检测免疫印迹法3435

抗可提取性核抗原（ENA）抗体抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%-30%）抗nRNP抗体：MCTD95%-100%（高滴度）抗SSA抗体：PSS60%-75%，其它CTD抗SSB抗体：PSS10%-40%，其它CTD抗Scl-70抗体：SSc25%-75%,标记性抗体抗Jo-1抗体：PM/DM25%，标记性抗体抗rRNP抗体：SLE特异性抗体（10%-30%）36抗Jo-1抗体

多发性肌（PM）37抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体SLE标志抗体38增殖细胞核抗原Ⅰ型（PCNA）

SLE特异性抗体39

抗着丝点型PSS局限型标志抗体40

抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophilcytoplasmicautoantibodies,ANCA）是一组以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病密切相关的自身抗体，对系统性血管炎、炎症性肠病等疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。

五、血管炎相关的自身抗体检测及其临床意义41

荧光染色型

靶抗原

胞浆型(cANCA)蛋白酶3（PR3）杀菌/通透性增高蛋白（BPI）

核周型(pANCA)

髓过氧化物酶（MPO）组织蛋白酶G（Cath-G）乳铁蛋白（LF）白细胞弹性蛋白酶（HLE）

非典型(aANCA)兼有两种特性ANCA荧光染色型与靶抗原42胞质型抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)主要见于Wegener’s肉芽肿及微小多动脉炎43周边型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）主要见于炎症性肠病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）44ANCA临床应用

组织蛋白酶G(Cath-G)白细胞弹性蛋白酶(HLE)乳铁蛋白(LF)可见于SLE、IBD、PBC、PSC等45类风湿因子（RF)抗角蛋白抗体（AKA)抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体)六、与RA相关自身抗体的检测与应用461.胶乳颗粒凝集实验定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定IgM-RF2.速率散射比浊法（ARRAY、IMAGE）定量、准确、快速，测定IgM-RF3.ELISA

定量、准确，可测定不同类型的RF(一）类风湿因子--检测方法47

（1）RF在RA、SLE、PSS等多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。疾病阳性率（%）RA79SLE30SS95Sclerosis80PM80MCTD25(一）类风湿因子--临床应用48（2）RF滴度与RA患者临床表现正相关。

（3）IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关。

（4）IgA-RF与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。49AKA主要见于RA，阳性率36%-59%，特异性95%-99%，高滴度可预示较严重的RA类型。（二）抗角蛋白抗体（AKA）50常用方法：ELISA临床意义：RA特异性自身抗体，敏感性65%-85%，特异性为94%-98%；高浓度抗

CCP抗体是RA发生关节侵蚀的危险因子之一，定量检测有助于判断预后。（三）抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）51

自身免疫性肝炎(AIH)原发性胆汁性肝硬化(PBC)原发性硬化性胆管炎(PSC)重叠综合征七、自身免疫性肝病相关自身抗体的检测及其临床意义52在多种累及肝胆疾患的自身免疫疾病中，自身抗体在发病机制中起重要作用自身免疫性肝病有相对特异性自身抗体谱自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断及鉴别诊断具有重要意义自身免疫性肝病与自身抗体53

疾病类型相关自身抗体

自身免疫性肝炎（AIH）

Ⅰ型AIHANA/ASMAⅡ型AIHanti-LKM-1anti-LC-1Ⅲ型AIHanti-SLA(可溶性肝原)

原发性胆汁性肝硬化（PBC）

AMA(M2/M4/M8/M9)anti-gp210，sp100ACA

原发性硬化性胆管炎（PSC）pANCA自身免疫性肝病及其自身抗体谱54抗平滑肌抗体见于自身免疫性慢性活动型肝炎55

抗线粒体抗体（AMA）原发性胆汁性肝硬化56核点型（DOTS）

见于SLE、SS、PBC、风湿病57(一）桥本甲状腺炎抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA)抗甲状腺微粒体抗体（TMA）八、内分泌疾病相关自身抗体的检测与应用58（二）糖尿病相关自身抗体

谷氨酸脱羧酶抗体胰岛细胞抗体胰岛素抗体八、内分泌疾病相关自身抗体的检测与应用59

抗乙酰胆碱受体抗体（AchR)

抗骨胳肌抗体（ASA）