药分电子课件第十二章讲义

1盐酸三氟拉嗪的含量测定：精密称取本品0.2089g，加无水甲酸10ml与醋酐40ml溶解后，依照电位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1023mol/L）滴定，消耗高氯酸滴定液8.46ml，另取无水甲酸10ml与醋酐40ml，同法测定，消耗高氯酸滴定液0.06ml，计算盐酸三氟拉嗪的含量。盐酸三氟拉嗪的分子量为480.4。98.8%2第十二章喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析3第一节喹啉类药物的分析临床上以周期性定时性发作的寒战、高热、出汗退热，以及贫血和脾大为特点。疟疾(malaria)，是由疟原虫经蚊叮咬传播的传染病。寄生于人体的疟原虫有间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫及卵形疟原虫4种，分别引起间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。4根据用药目的，抗疟药分为三类：用于控制症状的抗疟药：如磷酸氯喹、硫酸奎宁、磷酸咯萘啶、青蒿素、蒿甲醚、青蒿琥酯、本勿醇等。用于控制复发和传播的抗疟药：如磷酸伯氨喹等。用于病因性预防的抗疟药：如乙胺嘧啶、磺胺类等。一、喹啉类药物的基本结构与主要性质5（一）基本结构喹啉结构特点：含有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环，环上杂原子的反应性能基本与吡啶相同。脂肪氮——碱性6典型药物（金鸡纳霜）奎宁环1-氮杂双环[2.2.2]辛烷硫酸奎宁(quininesulfate)硫酸奎尼丁(quinidinesulfate)78磷酸咯萘啶1,5-萘啶四氢吡咯（二）主要性质硫酸奎宁*N喹啉环1.碱性2.旋光性4.荧光特性3.UV吸收pKb=9.8pKb=5.29硫酸奎宁比旋度为-237°~-224°硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸溶液中显蓝色荧光二、鉴别试验（一）化学法1.绿奎宁反应（鉴别6-位含氧喹啉衍生物）Cl2NH3试液H+，中性蓝色H+，酸性紫红色硫酸奎宁硫酸奎尼丁翠绿色10二醌基亚胺的铵盐或Br2ChP硫酸奎宁的鉴别：取本品约5mg，加水5ml溶解后，加溴试液3滴与氨试液1ml，即显翠绿色。2.酸根的反应（1）B2·H2SO4B2·H2SO4BaCl2BaSO4↓(白色沉淀)PbAc2PbSO4↓(白色沉淀)11B2·H2SO4HCl或HNO3不溶NH4AC或NaOH溶解HClB2·H2SO4不反应Na2S2O3

+2HCl=2NaCl+H2O+S↓+SO2↑与硫代硫酸盐区别（2）B·2HClB·2HClAgNO3MnO2HNO3AgCl↓(氨试液中溶解）混匀H2SO4ΔCl2↑+淀粉-KI试纸蓝色12B·2HCl（3）B·nH3PO4B·nH3PO4AgNO3MgNH4ClAg3PO4↓(氨试液和稀HNO3中溶解）MgNH4PO4↓(白色结晶性沉淀)HNO3(NH4)2MoO4(NH4)3PO4·12MoO3↓Δ(氨试液中溶解）13B·nH3PO4B·nH3PO4磷钼酸铵磷酸铵镁（二）

光谱法1.UV—特征值示例12-3ChP磷酸咯萘啶的UV鉴别：取本品，加磷酸缓冲液制成每1ml中约含10ug的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在260与276nm波长处有最大吸收。14ChP磷酸氯喹、磷酸咯萘啶（示例12-2）（示例12-3）ChP磷酸伯氨喹（示例12-4）示例12-4ChP磷酸伯氨喹的UV鉴别：取本品，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含15ug的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在265与282nm波长处有最大吸收，其吸光度分别为0.50~0.52和0.49~0.51。2.荧光光谱特征蓝色荧光（示例12-5）dilH2SO4硫酸奎宁15示例12-5ChP硫酸奎宁的荧光鉴别：取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使溶液成酸性，即显蓝色荧光。硫酸奎宁、二盐酸奎宁、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘啶和磷酸伯氨喹在CHP中均采用红外光谱进行鉴别。3.IR16示例12-6ChP磷酸氯喹的IR鉴别：取本品约0.5g，置分液漏斗中，加水25ml溶解后，加氢氧化钠试液5ml、乙醚50ml振摇提取，醚层用水洗涤后通过置有无水硫酸钠的漏斗滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣用五氧化二磷为干燥剂减压干燥至析出结晶，其红外光谱应与氯喹的对照图谱一致。三、纯度检查（一）硫酸奎宁的纯度检查17奎宁主要从金鸡纳树皮中提取，在提取分离过程中除了得到奎宁外，还可得到奎宁丁、辛可宁和辛可尼定等其他金鸡纳碱。硫酸奎宁为白色针状晶体，在氯仿-乙醇（2：1）溶液中易溶，在水、乙醇、氯仿和乙醚中微溶。纯度控制主要通过检查酸度、氯仿-乙醇中不溶物质和其他金鸡纳碱等。来源：主要是在成盐过程中引入检查法：取本品0.20g，加水20ml溶解，用酸度计进行测定，pH应为5.7~6.6。18

1.酸度

目的：主要控制药物中酸性杂质2.三氯甲烷-乙醇中不溶物质目的：主要控制醇中不溶性杂质或无机盐类。检查法：取本品2.0g三氯甲烷-无水乙醇（2:1）15ml50℃,10min垂熔坩埚滤过滤渣洗涤沉淀，5次每次10ml105℃干燥至恒重残渣（标准：不超过2mg）19来源：制备过程中引入。3.其他生物碱方法：HPLC和TLC主成分自身对照法或杂质对照品对照法检查法：对（50µg/mL）对供硅胶G氯仿-丙酮-二乙胺（5:4:1.25）对供20目的：主要控制在奎宁提取分离过程中可能混入的奎宁丁、辛可宁和辛可尼定等其他金鸡纳碱。供（10mg/mL）用碘铂酸钾试液显色（二）磷酸咯萘啶的纯度检查21磷酸咯萘啶为黄色至橙黄色晶体性粉末，具引湿性，在水中易溶，在乙醇和乙醚中几乎不溶。磷酸咯萘啶在生产和贮藏过程中引入的有关物质，主要通过溶液的澄清度与颜色、有关物质等项目的检查进行控制。来源：主要是在成盐过程中引入检查法：取本品1.0g，加水25ml溶解，用酸度计进行测定，pH应大于2.4。22

1.酸度

目的：主要控制药物中酸性杂质23

2.水中不溶物目的：主要控制药物中不溶性物质检查法：取本品2.0g加水25ml溶解放置30min垂熔坩埚滤过滤渣用水15ml分次洗涤105℃干燥至恒重残渣不得超过4mg（注射用）或7mg（口服用）24

3.氯化物来源：生产工艺中带入检查法：取本品0.10g加水4ml溶解加20%NaCO35ml垂熔漏斗滤过滤液漏斗用水15ml分次洗涤加水至25ml与标准NaCl溶液比较限量0.03%25

4.甲醛来源：在合成反应中使用甲醛进行缩合四氢吡咯40%甲醛26取本品50.0mg加水2ml溶解加5%NaCO34ml滤过滤液加50%硫酸3ml加品红亚硫酸试液3ml与新制甲醛对照液比较限量0.2%20-30℃,30min检查法：甲醛和品红亚硫酸试液反应呈紫红色27

5.四氢吡咯来源：在合成反应中使用四氢吡咯进行缩合检查法：Rimini试验，即硝普钠（亚硝基铁氰化钠，Na2[Fe(CN)5NO]）与胺的反应。与一级胺的反应产生红色化合物，与二级胺的反应则生成蓝色化合物。取本品10.0mg加水2ml溶解加5%NaCO32ml滤过滤液加亚硝基铁氰化钠乙醛试液1ml5分钟内不得显蓝紫色四、含量测定非水滴定法（碱量法）HPLC法28（一）硫酸奎宁的含量测定2（1）直接滴定法硫酸奎宁原料药的含量测定摩尔比=1:(4-1)=1:31429非水滴定法（碱量法）30示例12-7ChP硫酸奎宁的含量测定：取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml溶解后，加酸酐5ml与结晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于24.90mg的(C20H24N2O2)2∙H2SO4（分子量746.93）。T=0.1X1/3X746.93=24.90mg/ml2（2）先碱化再滴定硫酸奎宁制剂的含量测定摩尔比=1:44碱化3132示例12-8ChP硫酸奎宁片的含量测定：取本品20片，除去包衣后，精密称定，精密称取适量，置分液漏斗中。加氯化钠0.5g与0.1mol/L氢氧化钠溶液10ml，混匀，精密加三氯甲烷50ml，振摇10分钟，静置，分取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液25ml，加醋酐5ml与二甲基黄指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显玫瑰红色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于19.57mg的(C20H24N2O2)2∙H2SO4∙2H2O（分子量783）。T=0.1X1/4X783=19.57mg/ml33HPLC法示例12-9USP硫酸奎宁片含量的HPLC测定法色谱柱：C18流动相：水-乙腈-甲磺酸溶液——二乙胺溶液检测波长：235nm结果：采用对照品，按外标法以峰面积计算原料药——非水滴定法制剂——UV法、提取酸量法、HPLC法34（二）磷酸氯奎的含量测定3536硫酸奎宁碱性——非水滴定含量测定绿奎宁反应——鉴别在稀硫酸中有荧光——鉴别UV——鉴别和含量测定IR——鉴别硫酸盐鉴别反应HPLC——检查和含量测定37第二节青蒿素类药物的分析青蒿素为脂溶性，易透过血脑屏障，是一种高效、速效、低毒的抗疟药。主要用于耐氯喹的恶性疟，包括脑型疟的抢救。青蒿素又名黄蒿素，是我国学者从菊花科植物黄花蒿中提取分离得到的一个含过氧基团的新型倍半萜内酯。一、青蒿素类药物的基本结构与主要性质38（一）基本结构39（二）主要性质1.氧化性具有过氧桥结构2.旋光性具手性中心，有旋光性3.水解性仅青蒿素有内酯结构，在碱性

条件下发生水解4.UV吸收分子结构中没有共轭体系，

UV吸收光谱主要是末端吸收*******二、鉴别试验（一）呈色反应1.过氧桥的氧化反应（酸性条件下将I-氧化成I2）乙醇溶解KI和稀H2SO4蓝紫色青蒿素40淀粉指示液示例12-13ChP青蒿素的鉴别：取本品约5mg，加无水乙醇0.5ml溶解后，加碘化钾试液0.4ml，稀硫酸2.5ml与淀粉指示液4滴，立即显紫色。412.羟肟酸铁反应含内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物在碱性条件下与羟胺反应生成羟肟酸，在稀酸溶液中与高铁离子呈紫红色。NH2OHFe3+H+呈色ChP2010收载了青蒿素和青蒿琥酯的羟肟酸铁鉴别反应OH-示例12-16ChP青蒿素的鉴别：取本品约5mg，加无水乙醇0.5ml溶解后，加盐酸羟胺试液0.5ml与氢氧化钠试液0.25ml，置水浴中微沸，放冷后，加盐酸2滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。3.香草醛-硫酸（硫酸香兰素显色剂）反应42使分子中的羧基脱水，增加双键位移，分子缩合反应生成共轭系统，在酸作用下形成阳碳离子盐而显色。示例12-17ChP青蒿琥酯的鉴别：取本品约50mg，加三氯甲烷1ml溶解后，取3-4滴置白瓷板上，待三氯甲烷挥发后，加2%香草醛硫酸溶液1滴，显红色。43（二）吸收光谱特征1.红外吸收光谱特征：青蒿素类抗疟原料药在ChP2010中均采用红外光谱进行鉴别，要求所得红外光谱图与对照图谱一致。制剂的红外光谱鉴别须经提取分离，残渣干燥后进行红外光谱图与对照图谱比较。2.紫外吸收光谱特征：青蒿素类药物分子结构中不具共轭体系，ChP2010中均未采用本法鉴别青蒿素类药物。44（三）色谱法供试品主峰保留时间与对照品主峰保留时间一致1.HPLC法（原料药ChP2010）供试品所显主斑点的位置和颜色与对照品主斑点的位置和颜色一致2.TLC法（制剂ChP2010）45示例12-19ChP双氢青蒿素片的鉴别：取本品与双氢青蒿素对照品各适量，分别加二氯甲烷制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液与对照品溶液。照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述两种溶液各10ul，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-冰醋酸（90：10：2）为展开剂，展开后，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液，在85℃加热10-20分钟至斑点清晰。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。46青蒿素制品中通常存在结构类似的有关物质，主要通过TLC和HPLC进行检查三、纯度检查47CHP2010中青蒿素原料药均采用HPLC法进行含量测定，双氢青蒿素片