临床实验室生物安全第二篇

临床实验室生物安全第二篇第1页/共89页生物安全事件

1.1956年，前苏联的一个实验室曾有9支装有感染了委内瑞拉马脑炎病毒的鼠脑的安瓿被打破。由于没采取必要的措施，结果在几天内造成24名工作人员感染。

2.美国密执安州立大学布氏杆菌病实验室的一起布氏杆菌泄露事件，共感染了45人，死亡1人。

3.1967年，欧洲的三个城市为研制疫苗，从乌干达等地进口了一批黑长尾猴，而这些猴子携带一种特殊的病毒，引起了13名工作人员患病，并使这种疾病在德国马堡等地区流行，马堡病毒由此而得名。第2页/共89页生物安全事件

4.2003年9月，新加坡国立大学非典事件

5.2003年12月17日，台湾非典事件

6.2004年4月，中国CDC非典事件

第3页/共89页2002年11月19日,《健康报》在头版报道,北京市某医院的某临床护士在捆扎病房污物口袋时,左手食指被1支用于艾滋病病人的输液针刺破。从美国的调查来看，艾滋病职业暴露的危险概率约为6.4/万。一般而言，针刺的平均血量为1.4μl，一次针头刺伤感染HIV的概率为0.33%，而黏膜表面暴露后感染的概率为0.09%。此外，对2712例无破损皮肤暴露者的统计显示，没有感染发生。（职业暴露）从2002~年2004年三年之间，广东共发生了152例HIV职业暴露事件。其中医务人员113例，占74%；干警21例，约占14%。临床生物安全事件第4页/共89页outline总论一

临床实验室生物安全管理措施二血液及代替品的生物安全三第5页/共89页一、总论凡是为预防、诊断、治疗任何人类疾病或损伤、或者评价人类健康而对人体的物质进行生物、微生物、血清化学、血液、生物物理、细胞或者其他类型检验的部门，统称为临床实验室。第6页/共89页2004年北京再度发现SARS病例，中国当局在24小时内就通知了WHO。其驻中国代表处发言人沃雷·罗迪亚在谈及这次被定性为“重大责任事故”的SARS病毒实验室感染时说，人为的错误有好几种，比如，实验室本身的条件、实验室里的粗心、实验室里的管理不善等等。不过，无论怎么样，无论在哪里，实验室总会发生一些错误。

第7页/共89页实验室每天要处理来自临床的标本，如血液、穿刺液、分泌物等，对这些“未知疾病标本”无法其危险程度，因此，每个临床实验室每天都面临生物安全隐患。第8页/共89页临床实验室危害源危害源生物源危害化学源危害物理源危害细菌病毒真菌寄生虫易燃性、腐蚀性、有毒性、强酸性化学品等电器设备、辐射、噪声等第9页/共89页细菌（bacteria）结核杆菌Mycobacteriumtuberculosis.Rod-shapedBacterium

白喉杆菌Corynebacteriumdiphtheriae.Rod,clubed-shapedBacterium(causesdiphtheria)第10页/共89页病毒（viruses）狂犬病病毒RabiesDNA肿瘤病毒

DNAtumorviruses脊髓灰质炎病毒polio第11页/共89页Harrington和Shannon在1976年的调查中发现，结核分枝杆菌、乙型肝炎病毒与志贺菌已成为英国临床实验室工作人员最为常见的职业性感染原因。第12页/共89页临床实验室生物污染的原因和种类对空气的污染对水的污染对物体表面的污染实验室排出及扩散出的空气是重要原因之一医院污水操作不当或感染性物质的溢出造成地面、仪器等的污染第13页/共89页实验室工作人员在实验过程中受到实验室生物污染而发生的感染。实验室感染第14页/共89页

２００３年９月９日，新加坡一名患者被确诊感染了非典病毒。这名２７岁的新加坡华人男子是新加坡国立大学专门研究西尼罗病毒的微生物实验室的一名研究生。由１１名专家组成的国际调查小组认为，不恰当的实验程序、以及西尼罗病毒样本与非典冠状病毒在实验室里的交叉感染，可能是这名患者感染非典病毒的原因。第15页/共89页实验室感染的途径空气传播：接种环、吸管、注射器使用时经口传播直接接种：针刺、划伤等黏膜接触：如HIV能通过眼结膜进入人体节肢动物媒介第16页/共89页临床实验室安全管理硬件管理实验室设备个人防护设备一级防护二级防护

软件管理：包括组织机构、管理制度、操作规程、人员素质等。第17页/共89页管理责任实验室管理层对所有员工和实验室来访者的安全负责，实验室负责人应制定规定和程序，以确保实验室符合国家有关安全要求，并定期检查、维护、更新。第18页/共89页实验室标准操作程序（SOP）根据实验对象、生物危害程度评估、研究内容和设备设施等特点，对涉及的任何危险以及如何在风险最小的情况下开展工作的详细作业指导书。第19页/共89页实验室人员培训制度持证上岗新工作人员经过培训通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作1个月，才能获得上岗证。所有人员每年至少要接受一次新的培训建立并保存人员培训和考核记录档案第20页/共89页实验室设施设备监测、检测和维护制度特别关注高效过滤器、高压灭菌器的检查、维护和更新生物安全柜检测高压灭菌器定期检测灭菌效果第21页/共89页安全记录职业性疾病、伤害和不利事件记录危害评估记录危险标识危险废弃物记录事件、伤害、事故和职业性疾病的报告第22页/共89页实验室分区清洁区：包括办公室、休息室、培养基室等半污染区：包括缓冲间、更衣室和卫生通道等污染区：包括样本收集区、处理区、培养区和废弃物处理区等第23页/共89页第24页/共89页第25页/共89页实验室的出口和通道必须保持畅通无阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备。出口通路第26页/共89页临床实验室工作人员安全的一般要求食物不能存放在血液或其他有潜在传染性的材料存放处应禁止在实验室工作区内吸烟工作区内应禁止化妆（手霜除外）和处理隐形眼镜第27页/共89页利器，包括用过的针头不应折断、重新戴套或被动戴套。应鼓励所有实验室工作人员接受免疫以预防其可能被接触的生物体感染。丢弃的利器应立即放入耐扎容器中所有离心机应该有封闭的盖子，旋转时不能掀开第28页/共89页禁止使用口吸吸液所有样本和废弃物应假定含有活性病原体，应以安全方式处理。所有进行涡流搅拌的样本应置于有盖容器内标本应以确保承运人员、公众和接收实验室的安全的方式运送，并遵守法规要求（危险物品运输法规）第29页/共89页二、临床实验室生物安全管理措施临床实验室理化安全准则临床实验室生物安全防护临床实验室废物处理通则第30页/共89页2006年09月25日,西安交大电气绝缘教学楼内的实验室突然发生爆炸并起火，正在实验室的兄弟俩不幸被烧伤，其中一人为西安交大在校博士生。

第31页/共89页电气设备安全准则

连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护套线，不可使用普通的塑料绞线。严禁私拉乱扯。接地：仪器应有良好的接地，提高仪器的稳定性及安全系数。检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换。触电：断电或绝缘脱离急救第32页/共89页2008年3月13日晚上，南京东南大学四牌楼校区动力楼发生特大火灾，过火面积达1000多平方米，有30多个房间被烧毁，包括约10个实验室，多年收藏的学术资料也遭到毁坏。第33页/共89页防火隐患的估计和研究易燃易爆物火源隐患（电、火、气、试剂）第34页/共89页1.加热

进行蒸馏实验和消化样品时应使用加热套和封闭式电炉，不应使用明火加热。

安全使用酒精灯。2.明火

实验室内严禁吸烟!

在使用易燃气体和易燃试剂的实验室内不得使用明火。第35页/共89页灭火学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）。易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用干粉灭火器灭火。导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，切忌外跑。第36页/共89页化学危险物品使用安全准则所有化学危险品的容器都应有清晰标记，实验室管理人员有责任向工作人员介绍化学危险物品，应有材料安全数据表显示每一种化学危险物品的特性。第37页/共89页气体直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；避免曝晒和强烈振动；一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。第38页/共89页临床实验室生物安全防护实验室生物安全防护（biosafetycontainmentforlaboratories）是指实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、个体防护装置、严格遵守标准化操作程序和规程确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。第39页/共89页2003年12月17日，台湾“卫生署疾病管制局”证实，一名非典研究人员在全球安全等级最高的生物安全四级实验室，因违规操作不慎感染了非典病毒。第40页/共89页病原微生物危险度分级WHO&通用要求危险度1~4级(渐高)

条例危险度一~四类（渐低）危险度1级无或极低的个体和群体危险危险度2级个体危险中等，群体危险低危险度3级个体危险高，群体危险低危险度4级个体和群体危险均高第41页/共89页第42页/共89页第43页/共89页临床检验相关生物危险等级分布第44页/共89页实验室生物危害评估评估应从三个方面予以考量微生物的致病性和流行性实验室环境及实验室操作的特殊性实验室工作人员的免疫状态第45页/共89页在对相对信息了解较少时进行危险度评估时，应谨慎地采取一些较为保守的标本处理方法。在临床实验室，标本取自患者，处理此类标本时最低需要二级生物安全水平。第46页/共89页

为查找２００４年４月传染性非典型肺炎疫情在北京、安徽发生的原因，卫生部成立了调查组，对疫情的来源进行了专项调查。调查结果如下：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所腹泻病毒室跨专业从事非典病毒研究，采用未经论证和效果验证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，发现人员健康异常情况未及时上报。第47页/共89页实验室生物安全防护水平根据使用的一级和二级防护屏障的不同，实验室生物安全防护水平（biosafetylevel,BSL）分为四级。按防护水平由低到高排列即：一级生物安全水平（BSL-1）二级生物安全水平（BSL-2）三级生物安全水平（BSL-3）四级生物安全水平（BSL-4）第48页/共89页一级生物安全防护（BSL-1）实验室

如用于教学的普通微生物实验室等，适用于非常熟悉的致病因子，在开放的实验台上开展工作。二级生物安全防护（BSL-2）实验室

实验人员接受过致病因子处理的培训，进行实验时，限制进入。某些可能产生传染性气溶胶的过程，应在生物安全柜中或其他物理安全设备中进行。

第49页/共89页三级生物安全防护（BSL-3）实验室用于主要通过呼吸途径使人感染上严重的甚至是可导致生命危害的致病微生物及其毒素。第50页/共89页四级生物安全防护（BSL-4）实验室适用于对人体具有高度危险性的、通过气溶胶途径传播或传播途径不明的、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。第51页/共89页你知道吗？科研人员进入四级生物安全防护（BSL-4）实验室，必须换上特制的正压防护服。进入到实验室核心区，先后得穿4层防护服、戴两层口罩、眼罩、防护鞋、手套等。有时手套要戴6层。如室内的病原微生物可通过空气传播，还得戴上面具。光穿防护设施至少得花30分钟。第52页/共89页防护装备壁挂式洗眼器护目镜防护服第53页/共89页临床实验室基本安全操作规程临床实验室标本处理所有操作戴手套采血人员受过培训血清分离时注意眼和黏膜的保护规范操作技术以减少气溶胶产生使用消毒剂处理使用后的移液管和溢出标本第54页/共89页用于显微镜观察的盖玻片和涂片应用镊子夹取，丢弃前应清除污染和高压灭菌。移液管和移液辅助器的使用禁止口吸，污染的移液管应完全浸泡在盛有消毒液的容器中。第55页/共89页锐利物品禁止直接用手处理破碎的玻璃器具离心机所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本，都应使用密封的离心管。第56页/共89页生物安全柜保持负压每隔一段时间应对其运行性能进行验证可减少气溶胶暴露

第57页/共89页有关实验室意外处理规程泄露事故：立即清洗发生泄漏的区域，上报吸净漏出的液体清洗发生泄漏的区域尽可能使用漂白剂、酒精或苯酚对工作台进行消毒第58页/共89页血液或其他体液发生泄漏或工作结束后，均应使用合适的化学杀菌剂对实验室工作区进行表面消毒。无法彻底消毒的设备必须贴上生物危害的标签。个人防护服装应定期更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染时，则应立即更换。第59页/共89页LyndaAnold1992年5月以外科护理学士毕业，当年9月的一天，在为急诊病人用套管针进行静脉输液时，拔出针芯时意外刺伤了手指，93年4月确诊感染了HIV，她当年只有23岁。由她倡导的在全美国掀起了自觉使用安全锐器的运动已经有十年。KarenDaley（公共卫生硕士，注册护士）以她自己1998年在丢弃使用过的针头时刺伤了手指不幸感染上HIV和丙肝的遭遇，对提出设立防止针尖扎伤法案做了一个非常生动的陈述，因此加快了该法案的立法进程。第60页/共89页锐器所致事故性划伤或擦伤

①用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤；如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤口的局部挤压。②受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如75%酒精或0.5%碘伏进行消毒，并包扎伤口。③随即向有关负责人报告第61页/共89页临床实验室废物处理废物（waste）：

使用者不再使用的一切物品称为废物。化学废物安全处理感染性废物安全处理锐利物安全处理无害废物处理第62页/共89页化学废物安全处理1.废物分离:

有害化学废物不能与一般废物、无害化学废物、放射性或感染性废物相混合。有害化学废物在产生后应分别收集、运输、贮存和处理。2.工程控制:

通风措施、相对封闭及隔离系统、安全措施、防火措施和安全通道。

3.操作控制:

实验室应有完备的处理技术，以确保仪器、工作面和防护设备的污染在最低水平第63页/共89页4.化学废物处理的选择对无法确定特性的废物，不能做任何处理清除废物前尽量减少其有害程度严格禁止有害废料与一般废料或固体废料混合处理第64页/共89页感染性废物安全处理感染性废物指能传播感染性疾病的废物操作感染性或任何有潜在危害的废物时，必须穿戴手套和防护服。对有多种成份混和的医学废料，应按危害等级较高者处理。处理含有锐利物品的感染性废料时应使用防刺破手套。第65页/共89页感染性废料最常用的处置方法是灭菌和焚烧。其储存地应有“生物危险”标志和进入管理限制。实验室应有针对传染物泄露等的解决计划。第66页/共89页生物废物容器废针头容器生物危害样品转移箱第67页/共89页锐利物安全处理锐利物指所有能穿透皮肤的物品。需与其他废物分别存放。

针的处理尽量减少对针具的操作，放入硬质、防刺破的容器内。第68页/共89页三、血液及代替品的生物安全1983年3月美国疾病控制中心提出要把高危人群（吸毒者、同性恋、性工作者等）排除出献血员队伍，1983年4月《柳叶刀》杂志报道首例经输血传播艾滋病的事例。在80年代及90年代初，仍有许多发达国家及发展中国家出现经输血传播艾滋病的现象。全世界经采供血传播艾滋病的病例，占总报道病例的3％～5％。第69页/共89页

安全的血液是指不含有任何病毒、寄生虫、药物、酒精、化学物质或其他能给受血者带来损害、危险或疾病的外来物质，没有也未曾患过任何严重的疾病的供者的血液。第70页/共89页可以通过血液传播的疾病

HIV

病毒性肝炎梅毒疟疾等

第71页/共89页1998年10月1日施行了《中华人民共和国献血法》，全国无偿献血占临床用血比例由1998年的22%上升到2005年的95.5%，其中自愿无偿献血比例由1998年的5.5%上升到2005年的84.7%。第72页/共89页血液及代替品概念及分类血液及替代品：采自或应用于人体的血液或替代品。全血：指血液的全部成分。成分血：指用物理方法提取主要成分制备成较浓缩的制品。血液替代品：包括血浆代用品和红细胞代用品，第73页/共89页据日本媒体报道，由于日本政府没有严格监管制药措施，导致大约１０００人因使用不良血制药品罹患丙肝。第74页/共89页全血与一定比例抗凝保存液混合后保存在2-6℃冰箱中，分为三层，上层淡黄色为血浆，下层暗红色为红细胞，中间为白细胞和血小板。第75页/共89页浓缩红细胞和悬浮红细胞少白细胞的红细胞洗涤红细胞和辐射红细胞血小板浓缩粒细胞血浆和冷沉淀第76页/共89页

２０世纪８０年代和９０年代初，加拿大２万多名血友病患者因误用被污染的血液和血制品，而感染艾滋病病毒和丙型肝炎病毒，许多人因此死亡。２００２年加拿大警方对加红十字会、佩罗特等人及阿莫尔公司提起诉讼，指控他们疏于职守，未能有效阻止被污染血液和血制品的传播。第77页/共89页血液安全管理由中国输血协会、各级政府卫生行政部门、血液中心、中心血站、中心血库和医疗机构分别履行其职责。对血站实行统一设置采供血机构、统一管理血源、统一采供血的“三统一”原则。第78页/共89页临床用血血液入库

医疗机构临床用血，由