中药提取物抗菌防腐课件

对三种食物腐败抑制效果研究中草药提取物Contents小组成员组长：莫达康

组员：温影珍陈宏伟袁浩彬黄伟华指导老师：鲍波许碧莲Contents研究目的添加食品防腐剂益于人体健康，有一定的营养价值，消费者认可度高天然防腐剂化学防腐剂

民以食为天，食以安为先。近年来食品安全问题一次又一次的进入公众的视野，其中食品安全又以食品腐败问题尤为严重，全世界农副产品、果蔬等食品因腐烂变质而引起的经济损失十分巨大。所以延长保存期限、防止食品腐败变质是食品工业的重要任务。传统方法如干制、盐腌、加热、罐藏冷冻干燥、气调贮藏辐射保藏、微波杀菌工艺程序复杂耗能大、投资成本高价格低廉，但若超过安全剂量存在致癌性、致畸性、易引起食物中毒等问题Contents研究内容1.比较八种中药提取物体外抗三种食物腐败菌的能力，选择抗菌效果最好的一种中药进行下一步研究。2.研究1中所选中药提取物在不同浓度下的抑菌效果及该中药的MIC。Contents实验选材中草药的选取八种具有广谱、高效、低毒的抗菌中药：五倍子、白花蛇舌草、金银花、肉桂、黄连、罗汉果、栀子、鱼腥草细菌的选取中国食品微生物限量规定不得含有的致病致腐菌：沙门氏菌、志贺菌、金色葡萄球菌Contents实验步骤中药药液的提取（水提煎煮法）

各取50g进行粗粉碎后,通过球磨机再进行球磨,过筛得到各中草药的细粉碎样品。取粉碎后中药各50g，分别加水500ml，将中药浸泡在水中，加热至沸腾，改用文火加热20分钟，将滤液滤出，在将滤渣加水至200ml，二次煎煮，后将两次煎煮所得滤液加在一起，水浴浓缩至100ml，高压灭菌后放凉至室温，备用。所得中药水煎煮液浓度为0.5g/ml。Contents实验步骤三、药敏试验

用无菌棉拭子取菌液涂布在以打孔的90MM直径的MH药敏平板上，每平板打4个孔，待干后，分别加入中药水煎液50UL。在培养箱中37摄氏度培养24小时后，用游标卡尺量取抑菌环直径。利用琼脂扩散法,分别取浓度为10^6cfu/mL的菌液各0.2mL,分别加入LB琼脂培养基中,凝固后用无菌打孔器在琼脂培养基上打孔。将各中药提取物加入孔中每组分别做三个平行实验;另外做两组对照实验,在一个平皿中加入蒸馏水作CK;在另一个平皿中加入浓度为3.4mg/ml苯甲酸钠作CK-。然后再将平皿置于37℃恒温箱中培养,24h后取出观察。用卡尺十字交叉法测量抑菌圈直径,计算抑制生长率。抑制生长率=处理净生长量/CK-净生长量×100%Contents实验步骤中草药水提物显著性P<0.05P<0.01抑菌圈直径（cm）五倍子白花蛇舌草金银花肉桂黄连栀子鱼腥草罗汉果苯甲酸钠蒸馏水沙门氏菌志贺氏菌金黄色葡萄球菌八种中草药水提物抗菌谱（抑菌环）Contents实验步骤四、不同浓度的中草药提取物抑菌效果

选取各细菌抑菌生长率最高的一种中药水提物,分别设置提取物浓度分别为：重复上一步做药敏实验。0.5g/ml,0.25g/ml,0.125g/ml,0.0625g/ml,0.0313g/mlContents实验步骤五、MIC的测定

选取效果平均抑菌生长率最好的一种中药水提物，测定对三种致病菌的最小抑菌浓度，并与常用化学防腐剂苯甲酸钠的最小抑菌浓度作对比。采用试管2倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)。实验中每种药均用肉汤培养基2倍系列稀释10个梯度,第11支试管作阳性对照,第12管作阴性对照,各管稀释后的最终体积为10mL。每管加接种菌液100μL,置37℃培养18～24h,观察是否有菌生长,每种药物做3组重复。Contents实验步骤沙门氏菌志贺氏菌金黄色葡萄球菌中草药水提物0.50.250.1250.06250.0313浓度(g/ml)目标细菌MICA中药C中药B中药中草药对