血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱详解演示文稿

血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱详解演示文稿当前1页，总共103页。（优选）血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱当前2页，总共103页。目录

血浆蛋白质及其代谢紊乱1氨基酸代谢紊乱2嘌呤核苷酸代谢紊乱3血清蛋白质测定4血清蛋白质电泳分析5血清氨基酸测定6小结与展望7返回总目录3当前3页，总共103页。第一节血浆蛋白质及其代谢紊乱蛋白质是人体中含量和种类最多的物质，蛋白质占人体干重的45％，种类约有10万之多。几乎在所有的生理过程中蛋白质都起着关键作用。血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多的一类化合物，目前所了解的血浆蛋白质约有500种。4当前4页，总共103页。一、血浆蛋白质的种类和生理功能

（一）血浆蛋白质的种类——电泳分类法

可将血清蛋白质分为清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白5条主要区带。

正常血清蛋白电泳图谱示意图及其扫描曲线5当前5页，总共103页。血浆蛋白质的种类——功能分类法运输载体类补体蛋白类免疫球蛋白类凝血蛋白类蛋白酶抑制物蛋白类激素6当前6页，总共103页。（二）血浆蛋白质的生理功能①营养作用，修补组织蛋白；②维持血浆胶体渗透压；③作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体；④作为血液pH缓冲系统的一部分；⑤抑制组织蛋白酶；7当前7页，总共103页。（二）血浆蛋白质的生理功能⑥一些酶在血浆中起催化作用；⑦代谢调控作用；⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；⑨作为免疫球蛋白与补体等免疫分子组成体液免疫防御系统。8当前8页，总共103页。（一）血清蛋白电泳的正常图谱血清蛋白电泳（serumproteinelectrophoresis，SPE）正常图谱，由正极到负极可依次分为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带。二、血清蛋白质电泳组分的临床分析9当前9页，总共103页。（二）血清蛋白电泳的异常图谱血清蛋白电泳异常图谱分型血清蛋白电泳典型异常图谱浆细胞病与M蛋白10当前10页，总共103页。（一）血清蛋白电泳异常图谱分型图谱类型TPAlbα1α2βγ低蛋白血症型↓↓↓↓N↑N↓N↑肾病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）弥漫性肝损害型N↓↓↓↑↓↑慢性炎症型↓↑↑↑急性时相反应型N↓N↑↑NM蛋白血症型在α-γ区带中出现M蛋白区带高α2(β)-球蛋白血症型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑N蛋白质缺陷型个别区带出现特征性缺乏11当前11页，总共103页。（二）血清蛋白电泳典型异常图谱

A.

正常电泳图

B.双清蛋白血症

C.

清蛋白缺乏症

D.肾病综合征

E.肝硬化（β-γ桥）

F.急性炎症

12当前12页，总共103页。（三）浆细胞病与M蛋白正常血清蛋白电泳上显示的宽γ区带主要成分：免疫球蛋白。发生浆细胞病（plasmacelldyscrasia）时，异常浆细胞克隆增殖，产生大量单克隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白，在蛋白电泳时呈现一个色泽深染的窄区带，此区带较多出现在γ或β区，偶见于α区。13当前13页，总共103页。浆细胞病的电泳图电泳条带由上至下依次为Alb,α1,α2,β,γ区带箭头所指为可疑M区带血清蛋白电泳图可疑M区带14当前14页，总共103页。血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系电泳区带蛋白质种类成人参考范围（g/L）半寿期（d）分子量（kD）等电点含糖量(%)功能前清蛋白前清蛋白0.2~0.41.9554.70.5营养、运载清蛋白清蛋白35~5215~1966.24~5.80维持胶压、运载和营养等α1-球蛋白α1-抗胰蛋白酶0.9~2.04524.812蛋白酶抑制剂α1-酸性糖蛋白0.5~1.25402.7~3.545免疫应答修饰剂甲胎蛋白3×10－569胎儿期蛋白高密度脂蛋白1.7~3.25200胆固醇逆转运α2-球蛋白结合珠蛋白0.3~2.0285~4004.112结合血红蛋白α2-巨球蛋白1.3~3.057205.48蛋白酶抑制剂铜蓝蛋白0.1~0.44.51324.4铁氧化酶β-球蛋白转铁蛋白2.0~3.6779.65.76运铁到胞内低密度脂蛋白0.6~1.55300运胆固醇到组织C30.9~1.81852补体成分C40.1~0.42067补体成分β2-微球蛋白0.001~0.00211.8纤维蛋白原2.0~4.02.53405.53凝血因子γ-球蛋白IgG7.0~1624144~1506~7.33免疫球蛋白IgA0.7~4.06~1608免疫球蛋白IgM0.4~2.3597012免疫球蛋白C-反应蛋白＜5~1156.20炎症介质15当前15页，总共103页。三、血浆蛋白质及其异常分析（一）前清蛋白（prealbumin，PA）PA的主要功能：作为组织修补材料和运载蛋白，参与T3、T4、维生素A的运输。PA是负性急性时相反应蛋白，在急性炎症、恶性肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况下，血清PA均迅速下降。16当前16页，总共103页。前清蛋白的临床评价PA在临床上可以：①作为营养不良的指标，其评价标准是：PA200mg/L～400mg/L为正常，100mg/L～150mg／L轻度缺乏，50mg/L～100mg／L中度缺乏，＜50mg／L严重缺乏；②作为肝功能不全的指标，在反映肝功能的损害与恢复方面的敏感性优于清蛋白。17当前17页，总共103页。（二）清蛋白（albumin，Alb）585个氨基酸残基组成分子量66.2kD含17个二硫键，是唯一不含糖的血浆蛋白质肝实质细胞合成半寿期19d血浆中含量最多的蛋白质18当前18页，总共103页。清蛋白的功能特征维持血浆胶体渗透压：血浆渗透压的75%～80%由Alb维持血浆中主要的载体蛋白，具有结合各种配体分子的能力缓冲酸碱，维持酸碱平衡作用营养作用19当前19页，总共103页。清蛋白的临床评价低清蛋白血症：Alb合成不足、Alb的分布异常、Alb过度丢失、Alb分解代谢增加、无清蛋白血症(analbuminaemia)

血浆Alb增高：少见Alb的遗传性变异由Alb含量估计其配体的存在形式和作用作为个体营养状态的评价指标20当前20页，总共103页。＞35g/L正常28g/L～34g/L轻度缺乏21g/L～27g/L中度缺乏＜21g/L严重缺乏血浆Alb作为营养指标的评价标准21当前21页，总共103页。（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）394个氨基酸残基组成；分子量51kD；pI为4.8含糖10%～12%在醋纤膜电泳中位于α1区带主要由肝细胞合成，单核细胞、肺泡巨噬细胞和上皮细胞也能合成22当前22页，总共103页。（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）AAT具有多种遗传表型，迄今已分离鉴定的有33种等位基因，其中最多见的是PiMM型，占人群的90%以上F型：

fast（电泳迁移率快

）,M型：middle（电泳迁移率中等

）,S型：slow

（电泳迁移率慢

）根据等位基因出现频率的不同，缺陷变体可进一步分为常见和少见两部分,最常见的缺陷变体为Z和S型,表现为：ZZ、SS、SZ、MZ、MS23当前23页，总共103页。α1-抗胰蛋白酶的临床评价

AAT缺陷：

PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年（20岁～30岁）出现的肺气肿低血浆AAT可发现于胎儿呼吸窘迫综合征ZZ蛋白聚集在肝细胞，导致肝硬化24当前24页，总共103页。α1-抗胰蛋白酶的临床评价PiZZ表型的新生儿中10%～20%在出生数周后易患肝炎，最后因活动性肝硬化致死PiZZ表型的某些成人会发生肝损害AAT增加：

AAT属急性时相蛋白，在炎症、感染、肿瘤、肝病时均显著增加25当前25页，总共103页。（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181个氨基酸残基组成分子量约40kD；pI为2.7～3.5属血浆中含糖量最高（达45%）、酸性最强的糖蛋白典型的急性时相反应蛋白α1-酸性糖蛋白是一种粘多糖与蛋白质分子结合成的有耐热功能的复合蛋白质，主要在肝脏产生,某些肿瘤组织也可产生26当前26页，总共103页。α1-酸性糖蛋白与粘蛋白氨基葡萄糖、氨基半乳糖、甘露糖、岩藻糖及唾液酸（sialicacid，涎酸）等均称为粘多糖。Meyer将糖与蛋白质的复合物以氨基己糖的含量进行分类，氨基己糖的含量大于4%的称粘蛋白（因含糖量高而粘稠），小于4%的称糖蛋白。因α1-酸性糖蛋白含糖量很高，曾被称为血清类粘蛋白（orosomucoid，粘蛋白）。粘蛋白是第3版《规程》上的一个测定项目。进一步研究发现，α1-酸性糖蛋白只是血清类粘蛋白的一种主要成分，属于体内糖蛋白的一种。现在，一般将血清类粘蛋白统称为糖蛋白。27当前27页，总共103页。α1-酸性糖蛋白（AAG）的临床评价目前主要作为急性时相反应指标：在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一般增加3～4倍。AAG增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。28当前28页，总共103页。AAG增高：糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，可引起AAG升高。AAG降低：见营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况。此外，雌激素也可使AAG降低。α1-酸性糖蛋白（AAG）的临床评价29当前29页，总共103页。（五）结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一种急性时相蛋白和转运蛋白。在电泳中位于α2区带。由α与β链形成α2β2四聚体，α链有α1及α2两种，而α1又有α1F及α1S两种遗传变异体，两种变异体仅为一个氨基酸残基不同。30当前30页，总共103页。结合珠蛋白的功能特征运输血管内游离的血红蛋白(Hb)到网状内皮细胞降解，防止Hb从肾脏丢失而为机体有效地保留铁，并能避免Hb对肾脏的损伤。31当前31页，总共103页。表型

亚单位的结构

组成Hp1-1

(α1F)2β2α1Fα1Sβ2(α1S)2β2分子量约为80kD，α链含氨基酸残基83个，β链含氨基酸残基245个Hp2-1

(α1Sα2β2)n(α1Fα2β2)n分子量为120kD~200kD的聚合体，由于n不同，可以在电泳中出现多条带Hp2-2

（α2β)nn=3~8分子量为160kD~400kD，由于n不同，可在电泳中出现多条带结合珠蛋白的遗传表型32当前32页，总共103页。结合珠蛋白的临床评价Hp下降：①溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾。Hp参考范围较宽，须连续观察溶血是否处于进行状态。血管外溶血不会使Hp发生变化。②严重肝病患者，其Hp合成减少。Hp升高：属急性时相反应蛋白，当烧伤和肾病综合征情况下，血Hp常明显升高。组合检测项目包括血浆Hp、LD和游离Hb。33当前33页，总共103页。（六）α2-巨球蛋白（α2-MG或AMG）血浆中分子量最大的糖蛋白，约为725kD，含糖量约8%由肝细胞、单核细胞和星形细胞合成半寿期约5d包括补体C3和C4在内的一组血浆蛋白的主要成员，为硫酯键血浆蛋白家族34当前34页，总共103页。α2-巨球蛋白的功能特征主要特性是能与多种离子和分子结合，特别是能与蛋白水解酶结合而抑制酶的活性，导致酶不易作用于大分子底物

分子量小的蛋白质，则能被α2-MG-蛋白酶复合物所催化水解。

因此，α2-MG可选择性地保护某些蛋白酶的活性35当前35页，总共103页。不属于急性时相反应蛋白α2-MG增高：低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，显著增高α2-MG降低：严重的急性胰腺炎和进展型前列腺癌治疗前α2-巨球蛋白的临床评价36当前36页，总共103页。（七）铜蓝蛋白（ceruloplasmin,Cp）含铜的α2球蛋白由1046个氨基酸残基组成含糖约8%~9.5%每分子结合6个～8个铜原子，由于含铜而呈蓝色95%的血清铜存在于Cp中，其余5%呈可扩散状态血循环中的Cp可认为是铜的无毒性代谢库37当前37页，总共103页。铜蓝蛋白的功能特征①能调节铁的吸收和运输，对多酚及多胺类底物有催化其氧化的能力，具有亚铁氧化酶及胺氧化酶的活性②抗氧化作用，可防止组织中脂质过氧化物和自由基的生成，特别在炎症时具有重要意义38当前38页，总共103页。铜蓝蛋白的临床评价Cp浓度减少有关的疾病：包括Wilson病、营养性铜缺乏和Menkes病（遗传性铜吸收不良）。属于急性时相反应蛋白：在妊娠、感染、创伤和肿瘤时血浆浓度增加。但在营养不良、严重肝病及肾病综合征时往往下降。39当前39页，总共103页。

Wilson病的诊断标准定义：Wilson病是一种常染色体隐性遗传病，即患者血浆Cp含量明显减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核则导致豆状核变性，因而该病又称为肝豆状核变性。Wilson病诊断标准：Cp下降，血清总铜浓度降低、游离铜增加和尿铜排泄增加，肝中铜的含量升高。40当前40页，总共103页。（八）转铁蛋白（transferrin，TRF）分子量约79.5kD；pI5.5～5.9；半寿期为7d为单链糖蛋白，含糖量约6%电泳位置在β区带主要由肝细胞合成能可逆地结合多价阳离子，每分子TRF可结合2个Fe3+血浆中TRF的浓度受食物铁供应的影响41当前41页，总共103页。转铁蛋白的临床评价用于贫血的鉴别诊断TRF在急性时相反应中含量往往降低。因此在炎症、恶性病变时常随着清蛋白、前清蛋白同时下降作为营养状态的一项指标，在营养不良及慢性肝脏疾病时下降42当前42页，总共103页。（九）C-反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）CRP是由肝细胞所合成的急性时相反应蛋白，含5个相同的亚单位，非共价地结合为盘形多聚体相对分子质量为115kD～140kD循环中的CRP半寿期约19h，电泳分布在慢γ区带，有时可以延伸到β区带43当前43页，总共103页。C-反应蛋白的临床评价第一个被认识的急性时相反应蛋白，是急性时相反应的一个极灵敏指标结合临床病史监测疾病：如评估炎症性疾病的活动度监测系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染监测肾移植后的排斥反应等44当前44页，总共103页。四、急性时相反应蛋白

在急性炎症性疾病如感染、手术、创伤、心肌梗死、恶性肿瘤等，血浆AAT、AAG、Hp、Cp、CRP，以及α1-抗糜蛋白酶、血红素结合蛋白、C3、C4、纤维蛋白原等浓度显著升高或升高；而血浆PA、Alb、TRF浓度则出现相应下降。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白（acutephasereactionproteins，APRP）、急性时相反应蛋白（acutephaseproteins，APP），这种现象称为急性时相反应（acutephasereaction，APR）。

45当前45页，总共103页。各种APRP升高的速度不同，CRP和α1-抗糜蛋白酶首先升高，在12h内AAG也升高，然后AAT、Hp、C4和纤维蛋白原升高，最后是C3和Cp升高，这些APRP通常在2d~5d内达到最高值。检测APRP有助于监测炎症进程和判断治疗反应，尤其是检测那些升高最早和最多的蛋白质。四、急性时相反应蛋白

返回章目录46当前46页，总共103页。

第二节氨基酸代谢紊乱原发性氨基酸代谢紊乱：由于参与氨基酸代谢的酶或其他蛋白因子缺乏而引起的遗传性疾病。继发性氨基酸代谢紊乱：由与氨基酸代谢有关的器官（如肝、肾）出现严重病变而导致。47当前47页，总共103页。氨基酸血症（aminoacidemia）：当酶缺乏出现在代谢途径的起点时，其作用的氨基酸将在血循环中增加。氨基酸尿症（aminoaciduria）：升高的氨基酸从尿中排出。48当前48页，总共103页。遗传性氨基酸代谢紊乱及血、尿的检测结果遗传性氨基酸代谢紊乱名称缺乏的酶血中升高的成分尿中升高的成分苯丙酮酸尿症苯丙氨酸羟化酶苯丙氨酸、苯丙酮酸苯丙氨酸、苯丙酮酸Ⅰ型酪氨酸血症延胡索酰乙酰乙酸水解酶酪氨酸、甲硫氨酸酪氨酸、对-羟苯丙酮酸等尿黑酸尿症尿黑酸氧化酶尿黑酸（轻度）尿黑酸同型胱氨酸尿症胱硫醚--合酶同型胱氨酸、甲硫氨酸胱硫醚尿症-胱硫醚酶胱硫醚胱硫醚及其代谢产物组氨酸血症组氨酸酶组氨酸、丙氨酸咪唑、丙酮酸和组氨酸代谢产物甘氨酸血症甘氨酸裂解酶系统受阻甘氨酸槭糖浆尿症(支链酮酸尿症)支链酮酸脱羧酶亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和相应的酮酸丙酸尿症丙酰CoA羧化酶甘氨酸甘氨酸、丙酸、羟化丙酸、甲基柠檬酸49当前49页，总共103页。一、原发性氨基酸代谢紊乱（一）苯丙酮酸尿症

苯丙酮酸尿症（phenylketonuria，PKU）是主要由苯丙氨酸羟化酶缺乏引起的常染色体隐性遗传病，因患儿尿液中排出大量的苯丙酮酸等代谢产物而得名。50当前50页，总共103页。苯丙氨酸+O2酪氨酸+H2O苯丙氨酸羟化酶四氢生物蝶呤二氢生物蝶呤NADPH+H+NADP+苯丙氨酸的正常代谢苯丙氨酸转变为酪氨酸的过程51当前51页，总共103页。当出现遗传性苯丙氨酸羟化酶缺乏或不足时，苯丙氨酸不能正常转变成酪氨酸，在体内蓄积，并可经转氨基作用生成苯丙酮酸等代谢产物。1.苯丙氨酸的代谢紊乱52当前52页，总共103页。2.苯丙酮酸尿症的临床表现及治疗PKU患者有智力缺陷。PKU患者还表现有毛发和皮肤色素较正常人略浅。患儿在出生后3月内就需用低苯丙氨酸膳食（如低苯丙氨酸的奶粉）治疗即饮食治疗。治疗最少要坚持到10岁，甚至终生。在停止饮食治疗前需作负荷试验。若脑电图正常，则可停止饮食治疗。女性在幼时若治疗恰当，可正常生长发育。妊娠时，则应使用治疗本病的膳食，以免因再发高苯丙氨酸血症而影响胎儿正常发育。53当前53页，总共103页。（二）酪氨酸血症1.酪氨酸的正常分解代谢和转变正常情况下酪氨酸在酪氨酸转氨酶的催化下，生成对羟苯丙酮酸，进一步氧化生成尿黑酸、最终转变为延胡索酸和乙酰乙酸，然后分别进入糖和脂肪酸的代谢途径。54当前54页，总共103页。

酪氨酸先转变为多巴，经多巴脱羧酶作用后转变为多巴胺，然后生成肾上腺素和去甲肾上腺素。通常把多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素等含有邻苯二酚的激素统称为儿茶酚胺类激素。酪氨酸转变成儿茶酚胺激素

55当前55页，总共103页。酪氨酸先转变为多巴，在皮肤黑色素细胞中多巴经氧化、脱羧等反应转变成吲哚-5,6-醌，吲哚醌可聚合生成黑色素。酪氨酸酶（tyrosinase）缺乏，酪氨酸则不能转变为黑色素，将导致白化病（albinism），患者表现为白色头发、浅色皮肤和灰蓝色眼睛等。

酪氨酸转变成黑色素

56当前56页，总共103页。2.酪氨酸血症——Ⅰ型（tyrosinemiaⅠ）原因：酪氨酸分解途径中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性降低。该症可出现：血和尿中酪氨酸水平增加；血中甲硫氨酸浓度升高；尿中排出大量多巴和其他酪氨酸代谢物。57当前57页，总共103页。

I型酪氨酸血症又称肝肾型酪氨酸血症，急性患者有肝大、肝细胞脂肪浸润或坏死，如未治，常在1岁前死于肝功能衰竭。慢性患者可有肝纤维化、肝硬化、甚至发生肝癌，症状较轻，常在10岁前死亡。酪氨酸血症——Ⅰ型（tyrosinemiaⅠ）58当前58页，总共103页。3.酪氨酸血症——Ⅱ型（tyrosinemiaⅡ）

原因：肝细胞液酪氨酸转氨酶缺乏。血中和尿中酪氨酸水平升高，尿中酚酸和酪胺浓度增加。Ⅱ型病罕见。与Ⅰ型不同的是：血中甲硫氨酸不升高。59当前59页，总共103页。（三）含硫氨基酸代谢紊乱1.含硫氨基酸的正常代谢

甲硫氨酸S-腺苷同型半胱氨酸S-腺苷甲硫氨酸同型半胱氨酸FH4N5—CH3—FH4N5—CH3—FH4转甲基酶(VitB12)H2O腺苷RHATPPPi+PiR-CH360当前60页，总共103页。（1）同型胱氨酸尿症（homocystinuria）是最常见的以HCY（同型半胱氨酸）增高为特征的代谢紊乱。胱硫醚-β-合成酶缺失(常见)。体液HCY及其前体积聚，Cys和胱氨酸下降。生化异常：血浆同型胱氨酸(HCY的氧化形式)达到可检测水平，血浆Met升高。尿含有同型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。N5-甲基四氢叶酸转甲基酶缺失(罕见)。血浆Met不升高。2.同型半胱氨酸代谢紊乱61当前61页，总共103页。（2）同型半胱氨酸与心血管疾病

——

HCY水平检测适宜人群血脂正常，胆固醇不高的人群。有严重AS性疾病和家族史人群。有早期(＜50岁)冠心病、脑血管或外周血管病症状的人群。服用氨甲喋呤、氨茶碱、苯妥英等人群中HCY升高的比例较高，有进一步引发血管疾病的可能，需要联合考虑。62当前62页，总共103页。二、继发性氨基酸代谢紊乱

主要发生在肝脏和肾脏疾患（蛋白质营养紊乱）以及烧伤等：肝功能衰竭和氨基酸代谢失衡肾脏疾病返回章目录63当前63页，总共103页。

第三节核苷酸代谢紊乱核苷酸是核酸的基本组成单位。嘌呤核苷酸合成和分解中最多见的代谢紊乱是高尿酸血症，并由此导致痛风。嘧啶核苷酸从头合成途径中的酶缺陷可引起乳清酸尿症，但临床应用很少，故不在本章介绍。64当前64页，总共103页。嘌呤核苷酸从头合成途径合成原料:CO2、甲酰基、氨基酸等合成场所:肝细胞的胞液合成过程:包括两个阶段①次黄嘌呤核苷酸(IMP)的合成②腺苷酸（AMP）和鸟苷酸（GMP）的合成一、嘌呤核苷酸的代谢65当前65页，总共103页。嘌呤核苷酸从头合成途径66当前66页，总共103页。嘌呤核苷酸补救合成途径67当前67页，总共103页。嘌呤核苷酸分解68当前68页，总共103页。二、高尿酸血症

由尿酸排泄障碍或嘌呤代谢紊乱引起。人体内缺乏尿酸酶，尿酸无法再分解，通过肾脏排出体外。体液尿酸浓度的高低取决于体内嘌呤合成量、食入量和尿酸排出量之间的平衡状态。肾脏尿酸排泄减少或体内嘌呤来源过多均可导致高尿酸血症。69当前69页，总共103页。高尿酸血症的原因原发性:原发性肾脏排泄尿酸减少原发性尿酸产生过多继发性:各种肾脏疾病导致嘌呤分解过多疾病70当前70页，总共103页。三、痛风的发生机制

痛风（gout）是一组嘌呤代谢紊乱所致的疾病

，由遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症及尿酸盐结晶形成和沉积，从而引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎，严重者呈关节畸形及功能障碍；常伴尿酸性尿路结石。仅有高尿酸血症，即使合并尿酸性结石也不称之为痛风。（一）痛风的概念

71当前71页，总共103页。（二）尿酸结晶与痛风

血浆中尿酸盐以单钠尿酸盐形式存在，其溶解度很低，当血液pH为7.4时，尿酸钠的溶解度约为420µmol/L，超过此浓度时血浆尿酸已成过饱和状态。72当前72页，总共103页。（二）尿酸结晶与痛风

当浓度>480µmol/L持久不降，如遇下列情况可使尿酸钠呈微小结晶析出：①血浆清蛋白及α1、α2球蛋白减少；②局部pH降低；③局部温度降低。73当前73页，总共103页。（三）各种痛风症状的发生机制1.急性关节炎：由尿酸钠结晶沉积于关节腔内引起，常是痛风的首发症状，最易受累部位是跖趾关节。2.痛风石：是痛风特征性损害。74当前74页，总共103页。（三）各种痛风症状的发生机制3.间质性肾炎：是肾髓质或乳头处有尿酸盐结晶，其周围有圆形细胞和巨大细胞反应，慢性间质性炎症导致肾小管变形、上皮细胞坏死、萎缩、纤维化、硬化、管腔闭塞，进而累及肾小球血管床。返回章目录75当前75页，总共103页。第四节血清蛋白质测定

（一）血清总蛋白测定方法学概述

凯氏定氮法：参考方法

双缩脲法：是临床测定血清总蛋白首选的常规方法

酚试剂法紫外吸收法染料结合法：氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红钼一、血清总蛋白测定76当前76页，总共103页。（二）血清总蛋白双缩脲法测定原理血清中蛋白质的两个相邻肽键（-CO-NH-）在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色络合物。生成的紫色络合物颜色的深浅与血清蛋白质含量成正比，故可用来测定蛋白质含量。77当前77页，总共103页。（三）总蛋白测定方法学评价

凯氏定氮法优点：准确度高，回收率达101.54%

；精密度好，CV%为0.85%缺点：操作流程长，程序复杂。各种蛋白质含氮量在疾病状态差异较大，等该法主要用作血清蛋白质标准品定值及参考性工作，血清总蛋白常规测定中很少使用。78当前78页，总共103页。（三）总蛋白测定方法学评价

双缩脲法优点：显色稳定性好，干扰物质少，试剂单一，方法简便缺点：灵敏度较低干扰物质：主要为右旋糖酐，其与反应混合液中的铜和酒石酸结合形成沉淀，影响测定结果的准确度。此外胆红素、血红蛋白、脂浊、某些抗菌素和铵盐等也可干扰结果。

79当前79页，总共103页。优点：呈色灵敏度较高，达到双缩脲法的100倍左右，有利于检出较微量的蛋白质。缺点：费时较长，试剂配制复杂，且专一性较差，大部分具有还原性的物质均有不同程度的干扰作用。酚试剂法（三）总蛋白测定方法学评价

80当前80页，总共103页。优点：简便而常用，因未加任何试剂和处理，可保留制剂的生物活性，多用于纯化的蛋白质样品。缺点：准确性不如双缩脲法，因而不能作为常规方法广泛使用。紫外吸收法（三）总蛋白测定方法学评价

①芳香族氨基酸280nm吸收峰：但因为各种蛋白质中芳香族氨基酸的含量与比例不同而有较大差异；且尿酸和胆红素在280nm附近也有干扰，故该法的准确性和特异性有限；高度灵敏要稀释。②肽键220～225nm强吸收峰：但太高而需要大量稀释。81当前81页，总共103页。氨基黑、丽春红常作为血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳或琼脂糖凝胶电泳的染料。染料结合法测定方法学评价

82当前82页，总共103页。考马斯亮蓝常用于需更高呈色灵敏度的蛋白电泳中，也可用于测定尿液、脑脊液等的蛋白质。优点：简便、快速、灵敏。缺点：不同蛋白质与染料的结合力不一致，且试剂对比色杯有吸附作用。染料结合法测定方法学评价

83当前83页，总共103页。邻苯三酚红钼可用于测定尿液、脑脊液等蛋白质，该法克服了考马斯亮蓝法易吸附于比色杯的缺点，具有简便、稳定等优点，可用于自动化分析仪。染料结合法测定方法学评价

84当前84页，总共103页。染料结合法——国内最常用方法是溴甲酚绿（bromcresolgreen，BCG）法，还有溴甲酚紫（bromcresolpurple,BCP）法。BCP法比BCG法受其他血浆蛋白的干扰少，但灵敏度较低，且与非人源性清蛋白结合力相当弱，不适合于测定动物样本中的清蛋白，故BCP法临床应用较少。电泳法免疫法（免疫扩散法、免疫比浊法和RIA）电化学测定法（一）血清清蛋白测定方法学概述二、血清清蛋白测定85当前85页，总共103页。（二）溴甲酚绿法测定血清清蛋白

血清清蛋白(pI4.7)在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料BCG结合形成蓝绿色复合物，其颜色深浅与清蛋白浓度成正比。86当前86页，总共103页。（三）血清清蛋白测定方法学评价BCG法灵敏度高、操作简便、重复性好，既可用作手工操作也可自动分析。该法存在问题较多，主要是试剂标准化、标准品的选用、反应时间等，如不严格掌握，将会对测定结果造成严重影响。

反应时间：要求血清清蛋白的测定在30s内完成（快反应），30s后球蛋白的非特异性反应增高。87当前87页，总共103页。三、特定蛋白质的测定血清中的蛋白质因为都是由氨基酸组成，性质相似，故除清蛋白等少数蛋白质有某种特性可利用，因而能使用染料结合法等方法测定外，其他都需制备特异的抗血清，可采用免疫比浊法、免疫扩散法、化学发光免疫法、放射免疫法等方法测定。88当前88页，总共103页。目前临床上特定蛋白质多采用免疫比浊法测定，包括散射比浊法和透射比浊法，透射比浊法可在自动生化分析仪中测定，散射比浊法则通常需利用特定蛋白分析仪。特定蛋白质的测定方法返回章目录89当前89页，总共103页。第五节血清蛋白质电泳分析

一、血清蛋白质电泳

原理：电泳利用血清蛋白质各种组分所带电荷性质、电荷数量以及相对分子质量的不同，在同一电场的作用下，各组分泳动的方向和速率也各不相同。因此，在一定时间内各组分泳动的距离也不同，从而达到分离鉴定的目的，然后经染色洗脱比色或扫描等方法求得血清各组分蛋白质的含量。90当前90页，总共103页。醋酸纤维素薄膜电泳临床常规检测项目

琼脂糖凝胶电泳血清蛋白质的分离通常采用低压电泳：100V～500V，电泳时间较长。临床检测蛋白质最常用的染色剂是丽春红，其具有很高的灵敏度，通过扫描光密度仪对染色的凝胶进行扫描也可以进行定量分析，确定样品中不同蛋白质的相对含量。

91当前91页，总共103页。二、免疫固定电泳

原理：免疫固定电泳包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程